互补DNA的合成方法
(1)取第一链反应液20uL,再依次加入:10X第二链缓冲液20uLDNA聚合酶123ul。RNaseH0.8ulH2O加至终体积为100/uL(2)轻轻混匀,如需进行第二链同位素掺入放射性活性测定,可取出10uL至另一eppendorf管,加入2~5uLCi[α一32P]dCTP。(3)14℃温浴2h(如需合成长于3kb的cDNA,则需延长至3~4h)。(4)掺入测定eppendorf管中加入90ul 50mM EDTA,取10ul进行同位素掺入放射性测定.余下的可进行电泳分析。(5)将cDNA第二链合成的反应液70℃处理10min,低速离心后置于冰上。(6)加入2uL T4 DNA聚合酶,37℃温育10min。(7)加入10uL 200mmol/L EDTA终止反应。(8)用等体积苯酚:氯仿抽提cDNA反应液,离心2min。(9)水相移至另一eppendorf管,加入0.5倍体积的7.5mol/L醋酸铵(或0.1倍......阅读全文
DNA合成仪的输送电磁阀和辅助真空介绍
输送电磁阀 试剂输送系统包括两个试剂阀块(8碱基仪器有3个)及2个或4个柱阀块。阀块控制气体和化学试剂流入柱子及出口。除亚磷酰胺和四唑以外,试剂和溶剂都被同时输送到所有活化柱。当有多个活化柱时,对流速的细微变化,以自动调节每个柱子的输送次数来补偿。每一个5—端口柱阀块将流出物导入废液口、DMT
基因探针基因探针的基本介绍
基因探针基因探针(probe)就是一段与目的基因或DNA互补的特异核苷酸序列,它可以包括整个基因,也可以仅仅是/基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。 1.探针的来源 DNA探针根据其来源有3种:一种来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针(genomic probe
原位合成芯片的制备方法介绍
方法一Affymetrix公司将光平版印刷技术(photolithographicapproach)运用到DNA合成化学中,利用固相化学、光敏保护基及光刻技术得到位置确定、高度多样性的化合物集合。该法利用光敏保护基来保护碱基单位的5’羟基。第一步利用光照射使固体表面上的羟基脱保护,然后固体表面与光敏
褐煤酸的合成及贮存方法
贮存方法密封保存,放置在通风,干燥的环境中合成方法1. 由二十八醇氧化制得。2. 烟草:FC,15, 41。
多肽的合成方法有哪些?
1、固相合成法、液相合成法 以氨基酸为原料定向合成某种单肽,属医药原料中间体,主要用于西药配方,以增强药效、增强人体对药的吸收速度和吸收率。 2、酸解法或碱解法 这种肽主要出现在日本。用酸解法生产的“大豆多肽”,属“食品添加剂”,主要用于老人和儿童食品,其目的是增强这两种人群对食品营养的吸
卡拉胶的合成方法
将海藻洗净、晒干,放入提取锅中,加入30~50倍水(或适量碱液),用蒸汽加热(100℃左右)40~60min,过滤,边搅拌边向过滤出的提取液中加入醇类溶剂,离心分离,沉淀经滚筒干燥,粉碎可得产品。以滚筒干燥时,需添加单、双甘油酯或聚山梨醇酯做滚筒脱离剂。
甘油酸的合成方法
1)将25mL 0.4mol/L的甘油溶液和一定量的催化剂加入到100mL的三颈瓶中,室温下磁力搅拌10min,并在 5min内升温至指定温度,进一步加入所需量的 3%过氧化氢。反应进行一段时间后,冷却、过滤出催化剂. 滤液送至高效液相色谱仪分析产物成分。2)静息细胞转化法是以微生物整体细胞作为反应
三十烷醇的合成方法
1.中华蜂蜡中三十烷醇含量高达30%,一般由棕榈酸三十烷醇酯、蜡酸三十烷醇酯和十六烯酸三十烷醇酯组成。这些酯与碱进行皂化反应,生成高级脂肪酸钠和三十烷醇。皂化后,加入溶剂(如苯、石油醚等)萃取,然后脱溶可得到含三十烷醇等高级一元醇和烃类的产物,然后再经过脱烃提纯而得纯品三十烷醇。总收率10%~15%
嘧啶的合成与制取方法介绍
嘧啶和各种取代的嘧啶有多种方法合成。例如,巴比妥酸(2,4,6-三羟基嘧啶)可由脲与丙二酸二乙酯在醇钠的作用下缩合而成。巴比妥酸与磷酰氯一起加热,得2,4,6-三氯嘧啶,它与甲醇钠反应,又可得三甲氧基嘧啶。氯代嘧啶与氨或一级、二级胺反应,生成相应的氨基嘧啶。嘧啶的衍生物胞嘧啶、尿嘧啶和胸腺嘧啶,是核
贝尼地平的合成方法
方法1:酰氯法。2.5g(-)-2,6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-l,4-二氢吡啶-3,5-二羧酸单甲酯(Ⅰ)和0.57ml氯化亚砜,在二氯甲烷-二甲基甲酰胺中反应,得酰氯(Ⅱ)。(Ⅱ)和1.51g(+)-1-苄基-3-羟基哌啶反应2h,酸化后得2.72g(+)-α贝尼地平盐酸盐。同样可得(-)
核甙酸的合成方法
核苷酸是核糖核酸及脱氧核糖核酸的基本组成单位,是体内合成核酸的前身物。核苷酸随着核酸分布于生物体内各器官、组织、细胞核及细胞质中,并作为核酸的组成成分参与生物的遗传、发育、生长等基本生命活动。生物体内还有相当数量以游离形式存在的核苷酸。三磷酸腺苷在细胞能量代谢中起着主要的作用。体内的能量释放及吸收主
卵裂的生物合成方法介绍
卵裂期分裂球虽然不生长,但有些物质仍在进行合成。蛋白质的合成始终在进行。组蛋白是细胞核的组成成份,海胆胚胎在卵裂中期细胞核中有50%的蛋白质是新合成的。卵裂机制涉及的主要物质──微丝,是由肌动蛋白组成,这种蛋白质也是在此时期合成的。此外尚有卵裂期中主要的酶,如核苷酸还原酶,DNA多聚酶,也是新合成的
溴酚蓝的用途及合成方法
配置溴酚蓝指示液。用途:变色范围:pH2.8-4.6(黄-蓝),酸碱指示剂;非水滴定用指示剂,蛋白电泳染色;病毒化验等。1.将苯酚红溶于冰乙酸,搅拌下加入溴溶于冰乙酸的溶液,搅拌几分钟后倾入60℃热水中,冷却至室温,放置过夜。过滤,依次用冰乙酸、苯洗涤滤饼,晾干,得溴酚蓝。2.将酚红溶于冰乙酸中,加
关于多肽的合成方法介绍
1、固相合成法、液相合成法 以氨基酸为原料定向合成某种单肽,属医药原料中间体,主要用于西药配方,以增强药效、增强人体对药的吸收速度和吸收率。 2、酸解法或碱解法 这种肽主要出现在日本。用酸解法生产的“大豆多肽”,属“食品添加剂”,主要用于老人和儿童食品,其目的是增强这两种人群对食品营养的吸
简述苯并咪唑的合成方法
由邻苯二胺与甲酸经环合而得。将邻苯二胺与甲酸的混合物在水浴上加热2h,冷却,用10%氢氧化钠溶液调节pH至10,将析出的固体滤出,用冷水洗涤得粗品。粗品加水微沸,加活性炭脱色,趁热过滤,滤液冷至室温,过滤,冷水洗涤,在100℃干燥得成品。粗品收率90%。 半数致死量(小鼠,经口)2190mg/
乙琥胺的合成方法
由2-乙基-2-甲基丁二酸用氨水环合而得。将氨水(20%)加入2-乙基-2-甲基丁二酸,至pH为10以上。加热至200-220℃,反应20min。冷至50℃以下,加入氯仿。过滤,滤饼经氯仿洗涤后弃去合并洗、滤液,分取氯仿层。回收氯仿后减压蒸馏,收集150-160℃(2.13kPa)馏分,得乙琥胺。
转运RNA的合成方法介绍
生物合成:在生物体内,DNA分子上的tRNA基因经过转录生成tRNA前体,然后被加工成成熟的tRNA: tRNA前体的加工包括:切除前体分子中两端或内部的多余核苷酸;形成tRNA成熟分子所具有的修饰核苷酸;如果前体分子3′端缺乏CCA顺序,则需补加上CCA末端。加工过程都是在酶催化下进行的。
羊毛脂的合成方法
以洗毛污水为原料羊毛脂粗品的制备 洗毛污水加三氯化铝,得含羊毛脂的烂泥浆,吸去水分,得烂泥。取烂泥600kg,加苯480kg,边加边搅拌,加热56℃保温1h,停止搅拌,沉淀1h,澄清后苯液溶解羊毛脂6%-40%,移入蒸馏塔内,加热蒸馏至含羊毛脂达34%,降温至40℃以下放出,得羊毛脂粗品。洗毛污水
介绍多肽合成仪的检测方法
a)UV Monitor 在多肽合成仪中,在线检测耦合效果的装置,如UV Monitor往往是选配装置,客户可根据实验的需要选购。其功能是让操作者直观的看到多肽合成的每一部氨基酸偶联效果,从而针对特定的序列做合成设置的调整,最终达到最佳合成效果。 对于不熟悉多肽合成仪操作的用户来说,UV M
辛二酸的合成方法
1. 烟草:OR,44;BU,26;合成:由氧化蓖麻油或蓖麻油酸或环辛烷制得。2.制法: 于装有搅拌器、回流冷凝器的反应瓶中,加入辛二腈(2)136g(1.0mol),50%(质量分数)的硫酸1800mL,搅拌下加热回流10h。冷却后析出固体。过滤,水洗,而后用丙酮重结晶,得辛二酸(1)156g,m
豆甾醇的合成方法
1.大豆中含量丰富,其他的如毒扁豆、可可脂、菜籽油等亦有。它通常不能被动物吸收利用。以豆油中不皂化物进行乙酰化、溴化,再以乙醚-醋酸混合溶剂分离提取难溶性的四溴化物以锌及醋酸进行脱溴、皂化制取 。2.烟草:FC,8, 14, 32,41,43;BU,9;BU,OR,14。3. 从乙醇-水中得到晶体
辛二酸的合成方法
1. 烟草:OR,44;BU,26;合成:由氧化蓖麻油或蓖麻油酸或环辛烷制得。2.制法: 于装有搅拌器、回流冷凝器的反应瓶中,加入辛二腈(2)136g(1.0mol),50%(质量分数)的硫酸1800mL,搅拌下加热回流10h。冷却后析出固体。过滤,水洗,而后用丙酮重结晶,得辛二酸(1)156g,m
端粒酶的合成方法
端粒的存在是为了维持染色体的稳定。没有端粒,则末端暴露,易被外切酶水解。而报道说端粒与生命长短有关,这只是个说法,还没成定论。端粒不是用DNA聚合酶来合成的,是用端粒酶来合成的。端粒酶中含有RNA模板,用来合成端粒。
山梨糖醇的合成方法
1.将配制好的53%葡萄糖水溶液加入高压釜,加入葡萄糖重量0.1%的镍催化剂。经置换空气后,在约3.5MPa、150℃、pH8.2-8.4条件下加氢,终点控制残糖在0.5%以下。沉淀5min后,将所得山梨糖醇溶液通过离子交换树脂精制即得。原料消耗定额:盐酸19kg/t、液碱36kg/t、固碱6kg/
关于溴酚蓝的合成方法介绍
1.将苯酚红溶于冰乙酸,搅拌下加入溴溶于冰乙酸的溶液,搅拌几分钟后倾入60℃热水中,冷却至室温,放置过夜。过滤,依次用冰乙酸、苯洗涤滤饼,晾干,得溴酚蓝。 2.将酚红溶于冰乙酸中,加热至沸,滴加溴溶于冰乙酸中的溶液,黄色固体析出时,过滤,用乙酸洗去游离溴,置于空气中干燥后即得粗品。用冰乙酸或丙
樟脑(合成)的性状鉴别检查方法
性状本品为白色结晶性粉末或无色半透明的硬块,加少量的乙醇、三氯甲烷或乙醚,易研碎成细粉;有刺激性特臭,味初辛、后清凉;在常温中易挥发,燃烧时发生黑烟及有光的火焰。本品在三氯甲烷中极易溶解,在乙醇、乙醚、脂肪油或挥发油中易溶,在水中极微溶解熔点取本品,置内径2.0~2.5mm并一端熔封的薄壁玻璃管中,
简述肌氨酸的合成方法
由皂树(Quillaia saponaria)的树皮(韧皮部),用热水或含水乙醇浸提后加乙醚或丙酮使之沉淀,再经重结晶、精制而得。主要成分为皂苷(皂树皂苷等)。该树主要野生于南美洲智利、玻利维亚等地,中国亦产。
脱氧核糖的合成方法
脱氧核糖一般由脱氧核糖核酸制备。生物体从核糖核苷酸合成脱氧核苷酸的过程是被核糖核苷酸还原酶催化的。已发现有三种不同的核糖核苷酸还原酶,以真核生物中的非血红素铁(Ⅲ)酶为例,该反应机理为:首先,酶半胱氨酸残基的-S,夺取C3的氢,生成C3的自由基。接着C2的羟基被一对半胱氨酸残基之一的-SH质子化,碱
硬脂酸的合成方法
硬脂酸是自然界广泛存在的一种脂肪酸,几乎所有油脂中都有含量不等的硬脂酸,在动物脂肪中的含量较高,如牛油中含量可达24%,植物油中含量较少,茶油为0.8%,棕榈油为6%,但可可脂中的含量则高达34%。工业硬脂酸的生产方法主要有分馏法和压榨法两种。在硬化油中加入分解剂,然后水解得粗脂肪酸,再经水洗、蒸馏
引物合成的步骤及方法介绍
Oligo DNA的人工化学合成始于50年代初期,1980年,全自动的固相DNA合成仪面市后,使得快速、高效合成Oligo DNA成为可能,这大大地推动了生物工程技术的蓬勃发展。 现在一般都采用β-乙腈亚磷酰胺化学合成Oligo DNA,将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的合成