毛细管电泳色谱法的技术特点
毛细管电泳色谱法(capillary electrochromatography; CEC)是毛细管电泳与液相色谱相结合形成的一种高效、快速微分离分析技术。毛细管电泳色谱法可以分离离子和中性分子。它是利用缓冲溶液的电渗流作为泵,使被分析的分子通过对其具有不同保留程度的第二相,达到分离的目的。......阅读全文
毛细管电泳技术的分离因素
缓冲液缓冲试剂的选择主要由所需的pH决定,在相同的pH下,不同缓冲试剂的分离效果不尽相同,有的可能相差甚远。CE中常用的缓冲试剂有:磷酸盐、硼砂或硼酸、醋酸盐等。缓冲盐的浓度直接影响到电泳介质的离子强度,从而影响Zeta电势,而Zeta电势的变化又会影响到电渗流。缓冲液浓度升高,离子强度增加,双电层
毛细管电泳技术的优缺点
毛细管电泳具备如下优点:(1)高效塔板数目在105-106 片/m 间,当采用CGE 时,塔板数目可达107 片/m 以上;(2)快速一般在十几分钟内完成分离;(3)微量进样所需的样品体积为nL 级;(4)多模式可根据需要选用不同的分离模式且仅需一台仪器;(5)经济实验消耗不过几毫升缓冲溶液,维持费
毛细管电泳技术的仪器系统
毛细管电泳系统的基本结构包括进样系统、两个缓冲液槽、高压电源、检测器、控制系统和数据处理系统。1-温度控制系统;2-高压电源;3-高压电极槽;4-毛细管;5-检测器;6-低压电极槽;7-铂丝电极;8-记录/数据处理由于毛细管内径的限制,检测信号是CE系统最突出的问题。紫外可见法(UV)是CE常用的检
毛细管电泳仪有哪些特点?
1)与紫外,激光诱导荧光和电化学检测器相比,更是一种通用型检测器; 2)由于质谱的选择性和专一性,弥补了样品迁移时间变化的不足; 3)质谱检测的灵敏度优于紫外分光光度法; 4)质谱在检出峰的同时还能给出分子量和结构信息; 5)某些质谱技术可以给出多电荷离子,对分析大分子如糖,蛋白质等与C
毛细管电泳色谱仪特点归纳
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。CE分离模式有毛细
色谱法常见的技术方法
色谱法常见的方法有:柱色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。
柱色谱法的技术原理
柱层析技术(Column chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。
亲和色谱法的技术简介
利用酶与基质(或抑制剂)、抗原与抗体,激素与受体、外源凝集素与多糖类及核酸的碱基对等之间的专一的相互作用,使相互作用物质之一方与不溶性担体形成共价结合化合物,用来作为层析用固定相,将另一方从复杂的混合物中选择可逆地截获,达到纯化的目的。
凝胶色谱法的实验技术
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,
置换色谱法的技术介绍
样品加载到色谱柱上后,用含有一种比样品组分保留作用更强的化合物(顶替剂或置换剂)的流动相洗脱,而将样品组分置换流出色谱柱的分析方法。
亲和色谱法的技术简介
亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。
毛细管电泳色谱仪的主要特点
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度和分配系数的差异进行分离。由于毛细管的散热性能良好,允许在小内径毛细管两端加高达30kV的高电压,可在很短的时间内达到很高的分离效率,具有以下特点: 一、分离速度快。二、分离效率高。三、运行成本低。四、样品和试剂消
毛细管电泳质谱检测器的特点
1)与紫外,激光诱导荧光和电化学检测器相比,更是一种通用型检测器; 2)由于质谱的选择性和专一性,弥补了样品迁移时间变化的不足; 3)质谱检测的灵敏度优于紫外分光光度法; 4)质谱在检出峰的同时还能给出分子量和结构信息; 5)某些质谱技术可以给出多电荷离子,对分析大分子如糖,蛋白质等与C
简述微流控芯片毛细管电泳的特点
芯片毛细管电泳技术将常规的毛细管电泳操作在芯片上进行,利用玻璃、石英或各种聚合物材料加工微米级通道,以高压直流电场为驱动力,对样品进行进样、分离及检测。它与常规毛细管电泳的分离原理相同,因此在分离生物大分子样品方面具有优势。此外,与常规毛细管电泳系统相比,芯片毛细管电泳系统还具备分离时间短、分离
高效液相色谱法特点归纳
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。特点:1.高
毛细管电泳法比高效液相色谱法柱效高的原因
范德姆特方程最常用的形式如下式所示,该式直观地反映了流动相流速对于分离的影响。式中A, B, C为常数,u表示流动相的流速。 H=A+B/u+C*u A项反映的是被分析物在填充柱中可能采取不同的路径,因而经过的路程也不一样长,引起色谱峰的展宽,这就是“多路径效应”。在毛细管开管柱中不存在多路径效
毛细管电泳法比高效液相色谱法柱效高的原因
范德姆特方程最常用的形式如下式所示,该式直观地反映了流动相流速对于分离的影响。式中A,B,C为常数,u表示流动相的流速。 H=A+B/u+C*u A项反映的是被分析物在填充柱中可能采取不同的路径,因而经过的路程也不一样长,引起色谱峰的展宽,这就是“多路径效应”。在毛细管开管柱中不存在多路径效
毛细管电泳法比高效液相色谱法柱效高的原因
范德姆特方程最常用的形式如下式所示,该式直观地反映了流动相流速对于分离的影响。式中A, B, C为常数,u表示流动相的流速。 H=A+B/u+C*u A项反映的是被分析物在填充柱中可能采取不同的路径,因而经过的路程也不一样长,引起色谱峰的展宽,这就是“多路径效应”。在毛细管开管柱中不存在多路
毛细管电泳法比高效液相色谱法柱效高的原因
范德姆特方程最常用的形式如下式所示,该式直观地反映了流动相流速对于分离的影响。式中A, B, C为常数,u表示流动相的流速。 H=A+B/u+C*u A项反映的是被分析物在填充柱中可能采取不同的路径,因而经过的路程也不一样长,引起色谱峰的展宽,这就是“多路径效应”。在毛细管开管柱中不存在多路
毛细管电泳微流控芯片毛细管电泳技术展望
微流控芯片毛细管电泳系统应用于蛋白质的分离分析具有突出的优越性,特别是在临床检验及现场监测等方面的应用具有良好的发展前景,同时,其对分析仪器的集成化、微型化与便携化的发展也具有重要意义。据文献报道,Renzi等已经研制出手持式的微流控芯片电泳分离蛋白质装置。该装置由电泳芯片、小型激光诱导荧光检测系统
薄层色谱法的特点和应用介绍
薄层色谱法是应用非常广泛的色谱方法,这种色谱方法将固定相图布在金属或玻璃薄板上形成薄层,用毛细管、钢笔或者其他工具将样品点染于薄板一端,之后将点样端浸入流动相中,依靠毛细作用令流动相溶剂沿薄板上行展开样品。薄层色谱法成本低廉操作简单,被用于对样品的粗测、对有机合成反应进程的检测等用途。
色谱法中塔板理论的特点
一、色谱仪塔板理论的假设: 1、在色谱柱的一小段长度 H 内,组分可以在两相之间迅速达到平衡,这一小段柱长称为理论塔板高度 H。 2、流动相进入色谱柱不是连续进行的,而是脉动式,每次进量为一个塔板体积。 3、所有组分开始时都存在于第 0 号塔板上,而且样品沿轴向(纵向)的扩散可以忽略。
毛细管电泳技术的展望和发展
CE技术的研究和应用,给药物分析领域和药品检验工作带来了生机与活力,无疑将对该专业技术的发展及提高起着重要的推动和促进作用。尤其以对基因工程药物、中成药复方制剂的分析和中药材种属的鉴定,令人瞩目。但任何事物都有两面性,它也有弱点和不足,如有的药物用CE分析精确度还不够高;有的灵敏度很高,但专属性
毛细管电泳技术的广泛应用
毛细管电泳技术的高分离性能以及消耗试剂少等特点使其分析领域得到了广泛的应用,但是其常规分析的灵敏度不能适应痕量分析的要求,限制了它的应用和推广。样品前处理技术可以提高样品通量或将痕量分析物进行预富集,去除样品基质,将其与毛细管电泳技术联用不仅可以提高分析的灵敏度,同时也消除了大部分可能的基质干扰
毛细管电泳技术的基础理论
双电层双电层是指两相之间的分离表面由相对固定和游离的两部分离子组成的。双电层是与表面异号的离子层,凡是浸没在液体中的界面都会产生双电层。在毛细管电泳中,无论是带电粒子的表面还是毛细管管壁的表面都有双电层。Zeta 电势电介质溶液中,任何带电粒子都可被看成是一个双电层系统的一部分,离子自身的电荷被异号
毛细管电泳技术的简介及其应用
毛细管电泳的基本原理CE指以高压电场力为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中各组分毛细管之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。其仪器装置简图如下图所示,其结构包括高压电源、毛细管、检测器各一及两个缓冲液贮瓶。CE所用的石英毛细管柱,在pH>3情况下,其内表面带负电,和溶液接触时形
毛细管电泳色谱仪的检测技术
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。由于CE溶质区带的
毛细管电泳技术的基础理论
双电层双电层是指两相之间的分离表面由相对固定和游离的两部分离子组成的。双电层是与表面异号的离子层,凡是浸没在液体中的界面都会产生双电层。在毛细管电泳中,无论是带电粒子的表面还是毛细管管壁的表面都有双电层。Zeta 电势电介质溶液中,任何带电粒子都可被看成是一个双电层系统的一部分,离子自身的电荷被异号
毛细管电泳色谱仪主要特点
毛细管电泳色谱仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度和分配系数的差异进行分离,具有三高二少的特点。一、高灵敏度:紫外检测器的检测下限可达10ˉ1~10ˉ15mol,激光诱导荧光检测器可达10ˉ19~10ˉ21mol。二、高分辨率:每米理论塔板数为几十万,高
毛细管电泳色谱仪性能特点归纳
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。CE分离模式有毛细