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遗传性失明患者新希望!LNP首次成功靶向感光细胞

过去几年间,在新冠疫情全球蔓延的背景之下,基于 mRNA 构建起的强大递送技术成为众人瞩目的焦点,其凭借优秀的临床有效性和快速响应的能力在生物医药领域掀起一阵热潮。近日,基于 mRNA 与脂质纳米颗粒(LNP)载体技术,一种新的基因疗法可能为遗传性视网膜疾病(IRD)患者带来更多选择。1 月 11 日,来自美国俄勒冈州立大学和俄勒冈健康与科学大学(OHSU)的一组研究人员在 Science Advances 期刊发布了一项最新研究。研究团队成功发现了一种能够靶向眼内光感受器(PR)的肽序列,通过将其与脂质纳米颗粒结合,新的 LNP 递送系统首次成功靶向动物的眼内感光细胞,并将 mRNA 递送至小鼠以及非人类灵长类动物的神经视网膜中。(来源:Science Advances)“当前研究已经发现,至少存在超过 250 种的基因突变与遗传性视网膜疾病有关,但目前只有一种基因疗法获得批准。因此,针对一些早期的基因治疗......阅读全文

Cas9脂质纳米粒可以作为一种高效的神经原代培养载体 一

作者:Nadia Tagnaouti1 , Anitha Thomas1 , Rebecca De Souza1 , Ian Backstorm1 , Andrew Brown1 , Eric Ouellet1 , Shyam Garg1 , Grace Tharmarajah1 , Kea

LNP制备:微流控法与乙醇注入法对比

近年来,研究者们开发了很多新型脂质类载体,如脂质体纳米粒 (LNP)。LNP 由可离子化阳离子脂质 DLinDMA、二硬脂酰磷脂酰胆碱 (DSPC)、胆固醇 (cholesterol) 和 PEG-DMA包载基因药物而形成。目前常用过膜挤压法、乙醇注射技术等方法制备。制备过程中,质粒的水相溶液、脂类

Polyadenylation of mRNA

Gene expression requires the coordination and integration of multiple processes, including transcription, splicing, polyadenylation, nucleocytoplasmic

《自然》|回顾揭秘mRNA疫苗不为人知的复杂历史

  1987年底,Robert Malone做了一个载入史册的实验。他用信使RNA(messenger RNA,mRNA)链和脂滴做了一道 “分子乱炖”,这道基因乱炖里的人体细胞吸收了mRNA,并开始用其合成蛋白。  Malone当时是美国加州索尔克生物研究所的研究生,他知道眼前的这一切会对医学产生

mRNA差异显示技术(mRNA differetial display)(2)

6.技术路线 mRNA 差异显示技术 The fluoroDD System •Builds on the HIEROGLYPH™ system –TMR-labeled anchored primers –Increased primer concentrations –I

mRNA差异显示技术(mRNA differetial display)(1)

1.概 述mRNA差异显示技术(mRNA differetial display)是一种快速有效的克隆差异性表达基因的方法。 方法建立:1992年 Liang P和Pardee首次应用DD技术对比人类乳腺癌细胞与正常细胞所表达的mRNA,以此来克隆癌细胞所特有的基因 目前已应用于个各领域:

综述|mRNA疫苗设计创新和载体开发

  前言  疫苗是预防传染性疾病传播的最有效的公共卫生干预措施。成功的疫苗接种根除了许多威胁生命的疾病,如天花和脊髓灰质炎,世界卫生组织估计疫苗每年可防止200-300万人死于破伤风、百日咳、流感和麻疹。然而,尽管常规疫苗取得了明显的成功,但它们并不能有效对付疟原虫、丙型肝炎和HIV等逃避免疫监视的

mRNA的分离

与rRNA和tRNA不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制备mRNA模板。进行

mRNA的分离

与rRNA和tRNA不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用 oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制备mRNA

mRNA的分离

与rRNA和tRNA不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制备mRNA模板。进行

如何提取mrna

1 细胞总RNA的提取1)、6孔板细胞(CNE-2)汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂(Gibco公司) 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5分钟(观察:液体变粘稠,细胞脱壁).2)、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml E

mRNA的纯化

实验概要本文介绍了mRNA的纯化方法。实验原理mRNA的分离方法较多,其中以寡聚(dT)-纤维素柱层析法最为有效,已成为常规方法。此法利用mRNA  3‘末端含有Poly(A  )的特点,在RNA流经寡聚(dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液的作用下,mRNA被特异地结合在柱上,当逐渐降低盐的浓度时或在低

脂质纳米颗粒在肿瘤免疫治疗中的应用

前言在过去的十年中,肿瘤免疫疗法得到蓬勃发展,包括免疫刺激小分子、靶向免疫细胞的免疫检查点抑制剂(ICI)、表达嵌合抗原受体(CARs)的自体T细胞或自然杀伤(NK)细胞以及表达肿瘤抗原或CARs的mRNA用于癌症免疫治疗。其中,小分子、ICIs和mRNA疗法被用作许多实体瘤的独立治疗,如黑色素瘤、

纳米药物制造系统在猪流感病毒疫苗研发中的应用-1

在关于纳米药物制造系统以及新型冠状病毒的文章中,我们已经简要提到了美国著名的疫苗研发公司Moderna早前关于猪流感病毒以及寨卡病毒疫苗的研发成果,今天我们就详细地为大家介绍一下他们的主要研究过程及结果。  研究过程及结果Moderna的研究者们通过NanoAssemblr纳米药物制造系统生产制备了

有关mRNA疫苗在感染性疾病的研究进展

  以mRNA为基础的治疗代表了一个相对新颖和高效的药物类别。最近发表的几项研究强调了mRNA疫苗在治疗不同类型的恶性肿瘤和传染病方面的潜在疗效,这些疾病中传统的疫苗策略不能引起保护性免疫反应。  传染病疫苗是目前mRNA疗法中最领先的应用。目前正在进行临床前试验和临床使用的大多数mRNA疫苗都是以

新型脂质系统可以减少mRNA疫苗的副作用

  新的脂质输送系统旨在提高效力和减少副作用。  正如任何营养师都会告诉你的那样,有些脂肪是有益的,在世界上使用最广泛的两种COVID-19疫苗中发现的小脂质球也是如此。这些被称为脂质纳米粒(LNPs)的微小脂质泡包裹着信使RNA(mRNA),它编码一种病毒蛋白,帮助将其运送到细胞中,并保护它免受破

新型的新冠疫苗经动物试验测试有效

  尽管 COVID-19 疫苗的接种已在全球范围内推广,但仍然迫切需要安全有效的疫苗,以确保为所有国家提供公平和可靠的供应。  2021年5月31日,中国疾病预防控制中心谭文杰及中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院彭小忠等共同通讯在Signal Transduction and Target

KNAUER开发应对病毒新技术——荣获柏林-勃兰登堡创新奖提名

  KNAUER 自豪地宣布,他们是今年柏林-勃兰登堡创新奖的 10 名主要提名者之一。 KNAUER公司因其碰撞喷射混合 (IJM) 技术而获得认可,该技术可用于脂质纳米颗粒的高流量生产。目前该技术正用于生产 mRNA 疫苗。KNAUER荣获柏林-勃兰登堡创新奖提名  用于对抗冠状病毒的mRNA疫

LNP,大成功:KNAUER荣获柏林勃兰登堡大学创新奖!

  KNAUER中国总代理:北京绿绵科技有限公司,作为KNAUER中国区总代理商,全权负责KNAUER的销售、技术及售后服务工作。售后服务通过ISO9001质量管理体系认证。KNAUER研发生产的碰撞喷射混合器(IJM)广泛应用于Pfizer/BioNTech的mRNA新冠疫苗的生产;带有审计追踪功

抢占mRNA赛道 2022核酸药物和疫苗创新峰会开幕

  2022年9月3日,为了探讨核酸药物和核酸疫苗领域研究趋势,寻求核酸药物递送、脱靶、毒性等难点问题解决方案,为科研工作者和研究机构搭建沟通平台,加深学术交流和产业化合作,推动核酸药物与疫苗的研发进程,2022核酸药物和疫苗创新峰会于2022年9月3日在上海召开。本次会议聚焦核酸药物、核酸疫苗、创

Human FastTrack mRNA Isolation

Preparation of Cells1.Prepare or collect between 2x107 cells for each mRNA prep (will yield about 10-20µg of mRNA). If PBMCs from a whole blood sample

隐蔽mRNA的定义

与专一性蛋白质结合不能被核糖体识别的mRNA,在受精前储存并不起始翻译。因为卵细胞核和精细胞核在融合时,无法转录出mRNA以进行必要的蛋白合成,所以隐蔽mRNA由起着母源性短暂提供蛋白合成模板的作用。

mRNA 的分离实验

实验方法原理 哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNA。实验步骤1.  用0.1 mol/L NaOH悬浮0.5~1.0 goligo(dT)-纤维素。 2.  将悬浮液装入灭菌的一次性层

细胞凋亡mRNA检测

研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因,检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道,Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells)等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X (长) 作为抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的调节物,它们

mRNA提取、分离纯化

从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之

mRNA的功能介绍

mRNA含A、U、G、C四种核苷酸,每三个相联而成一个三联体,即密码,代表一个氨基酸的信息,故按数学中排列组合法则计算,可形成43=64个不同的密码。根据实验结果,推得64个密码与氨基酸的对应关系如下表。mRNA密码与氨基酸的对应关系64个密码中,61个密码分别代表各种氨基酸。每种氨基酸少的只有一个

mRNA 的分离实验

oligo(dT)-纤维素亲和层析法             实验方法原理  哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以

mRNA的功能特点

mRNA含A、U、G、C四种核苷酸,每三个相联而成一个三联体,即密码,代表一个氨基酸的信息,故按数学中排列组合法则计算,可形成43=64个不同的密码。根据实验结果,推得64个密码与氨基酸的对应关系如下表。 mRNA密码与氨基酸的对应关系64个密码中,61个密码分别代表各种氨基酸。每种氨基酸少的只有一

mRNA差别显示技术

mRNA差别显示技术也称为差示反转录PCR(Differential Display of reverse Transcriptional PCR)简称为ddRT-PCR。它是将mRNA反转录技术与PCR技术二者相互结合发展起来的一种RNA指纹图谱技术。目前已广泛应用于分离鉴定组织特异性表达的基因。

mRNA降解途径分析

涉及到许多细胞内因子和复合物, 如Dcp1p、Pat1p、Rap55和staufen等.同时, 也有报导认为, 细胞质处理小体是体内mRNA 降解的主要位点 .因此, 明确细胞质处理小体(P-body)在mRNA 降解过程的功能以及各种酶和复合物调节mRNA 降解所经历的途径是本领域研究的主要内容.