等电聚焦电泳的技术特点
是将两性电解质加入盛有pH梯度缓冲液的电泳槽中，当其处在低于其本身等电点的环境中则带正电荷，向负极移动；若其处在高于其本身等电点的环境中，则带负电向正极移动。当泳动到其自身特有的等电点时，其净电荷为零，泳动速度下降到零，具有不同等电点的物质最后聚焦在各自等电点位置，形成一个个清晰的区带，分辨率极高。......阅读全文
毛细管等电聚焦电泳色谱仪分析技术
毛细管等电聚焦电泳色谱仪（CIEF）是以载体两性电解质为介质，根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术。一、载体两性电解质应具备的条件：载体两性电解质是两性分子，使其在电泳柱中能达到一个平衡位置。载体两性电解质可作为载体，但两性电解质不能用于等电聚焦。只有载体两性电解质，即具有好的电导和缓冲
等电点聚焦的定义和特点
等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质，当通以直流电时，两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度，当蛋白质放进此体系时，不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上。
等电点聚焦的定义和特点
等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质，当通以直流电时，两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度，当蛋白质放进此体系时，不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上。
双向凝胶电泳的等电聚焦相关介绍
蛋白质是两性分子，在不同的pH环境中可以带正电荷、负电荷或不带电荷。对每个蛋白质来说都有一个特定的pH，此时蛋白质的静电荷为零，此pH值即该蛋白质的等电点(pI)。将蛋白质样品加载至pH梯度介质上进行电泳时，它会向与其所带电荷相反的电极方向移动。在移动过程中，蛋白分子可能获得或失去质子，并且随着
等电聚焦水平板电泳法的相关介绍
两性电解质在电泳场中形成一个pH梯度，由于蛋白质为两性化合物，其所带的电荷与介质的pH值有关，带电的蛋白质在电泳中向极性相反的方向迁移，当到达其等电点（此处的pH值使相应的蛋白质不再带电荷）时，电流达到最小，不再移动。本法用于检测蛋白类和肽类供试品的等电点。 除另有规定外按以下方法测定。 1
等电聚焦电泳色谱仪的检测方法
等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同，在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离，检测方法有染色法、扫描法和其它检测方法。一、染色法：1、考马斯亮蓝染色法。2、银染色法。3、同工酶染色法。4、专一蛋白染色法。5、荧光标记以及免疫法。二、扫描法：激光光源强度大，单色性好，扫描I
高效毛细管等电聚焦电泳色谱仪分析技术
高效毛细管等电聚焦电泳色谱仪（CIEF）是以载体两性电解质为介质，根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术。一、载体两性电解质应具备的条件： 载体两性电解质是两性分子，使其在电泳柱中能达到一个平衡位置。载体两性电解质可作为载体，但两性电解质不能用于等电聚焦。只有载体两性电解质，即
等电聚焦电泳（IEF）分离蛋白及测定蛋白质等电点
一、原理等电点聚焦（IEF）是在电场中分离蛋白质技术的一个重要发展，等电聚焦是在稳定的pH梯度中按等电点的不同分离两性大分子的平衡电泳方法。在电场中充有两性载体和抗对流介质，当加上电场后，由于两性载体移动的结果，在两极间逐步建立稳定的pH梯度，当蛋白质分子或其他两性分子存在于这样的pH梯度中时，这种
蛋白质技术专题：蛋白等电聚焦凝胶电泳技术（二）
1） 若产生模糊条带则证明聚焦不完全，这可能是由于电泳中的问题或大分子蛋白质限制了其在凝胶中的迁移能力。若聚焦时间过长或过短，条带的分辨率会下降。增加电压梯度可以使带形更加锐利。高分子量蛋白质在琼脂糖凝胶中可以聚焦的更好。 2） 产生歪斜的条带通常由于不正确的pH梯度，检查电极是否洁净，是
蛋白质技术专题：蛋白等电聚焦凝胶电泳技术（一）
等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术，等电聚焦中，蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸，在电场中形成正极为酸性，负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷，因此可以在电场
蛋白质技术专题：蛋白等电聚焦凝胶电泳技术（二）
8.常见问题及解释1） 若产生模糊条带则证明聚焦不完全，这可能是由于电泳中的问题或大分子蛋白质限制了其在凝胶中的迁移能力。若聚焦时间过长或过短，条带的分辨率会下降。增加电压梯度可以使带形更加锐利。高分子量蛋白质在琼脂糖凝胶中可以聚焦的更好。2） 产生歪斜的条带通常由于不正确的pH梯度，检查电极是否洁
毛细管电泳芯片等电聚焦分离
芯片等电聚焦分离芯片等电聚焦分离蛋白质的原理与常规毛细管等电聚焦基本相同，都是依据蛋白质的等电点(pI)不同而进行分离。Hofmann等首次将毛细管等应用于蛋白质分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上，采用等电聚焦模式分离厂牛血清白蛋白和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)。Das等。26 3
毛细管等电聚焦电泳仪简介
毛细管等电聚焦电泳仪（CIEF）是根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术。一、分离机理：毛细管内充有两性电解质载体（合成的具有不同等电点范围的脂肪族多胺基多羧酸混合物），阳极端装稀H3PO4溶液，阴极端装稀NaOH溶液。当施加直流电压（6～8V）时，管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的pH梯
固相pH梯度等电聚焦实验——等电聚焦
试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液实验步骤打开循环水浴，设置冷却温度，一般为 10℃。将制好的固相 pH 梯度凝胶铺在冷却板上，注意正负极。其间涂以液体石蜡或煤油，避免气泡陷入，以保证胶板和冷却板之间的良好接触。用合适的电极溶液（参见表 7.7) 润湿滤纸电极条，分别放置凝胶的酸、碱侧。有的仪
简述等电聚焦水平板电泳法的结果判定
将胶片置凝胶电泳扫描仪中扫描，通过扫描定位法测量蛋白质或多肽与等电点标准的迁移距离。 （1）等电聚焦水平板电泳法— 鉴别 供试品主成分迁移位置应与对照品迁移位置一致。 （2）等电聚焦水平板电泳法— 等电点 以等电点标准试剂中各种蛋白的等电点（pI）对其相应的迁移距离直线回归作图；将供试品的迁
关于等电聚焦水平板电泳法的操作介绍
（1）等电聚焦水平板电泳法— 制胶 取A液2.5ml，pH3~10的两性电解质（或其它pH范围的两性电解质）0.35ml，水1.25ml，50%甘油0.5ml，抽气5~10分钟，加B液25μl，N,N,N’,N’-四甲基乙二胺6μl，混匀后缓慢的注入水平模具内，室温下聚合。 （2）等电聚焦水平
等电聚焦电泳色谱仪pH梯度的类型
等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同，在一个稳定的、连续的和线性的pH梯度中进行分离，具有灵敏度高、分辨率高和重复性好等特点，特别适合大批量纯度检测和真实性鉴定以及遗传多样性等群体生物学领域的研究。pH梯度按形成方式可分为载体两性电解质pH梯度和固相pH梯度等。一、载体两性电
载体两性电解质等电聚焦电泳技术介绍
载体两性电解质等电聚焦电泳技术是蛋白质理化性质研究的核心技术之一，载体两性电解质等电聚焦电泳的基本原理是利用蛋白质分子或其他两性分子等电点的不同，在一个稳定、连续的线性的p H梯度中进行蛋白质的分离和分析电泳检测方法。 是1966年由2位瑞典科学家Harry Rilbe和OlovVesterb
AES毛细管等电聚焦电泳耗材试剂上线
毛细管等电聚焦电泳（以下简称：CIEF ）是一种简便、快速、高效的分离分析方法, 特别适用于氨基酸、多肽、蛋白质、酶类和抗体等的 分离分析, 能够满足组分定量、杂质检出、质量控制、 临床诊断等方面的要求。 CIEF 是目前处理蛋白质分辨率最高的 CE 技 术之一。随着研究工作的不断深入, CI
等电聚焦和二维凝胶电泳实验
等电聚焦和二维凝胶电泳实验 试剂、试剂盒 样品缓冲液 羟乙基二硫化物 细胞裂解缓冲液
等电聚焦和二维凝胶电泳实验
对于复杂混合物，如全细胞裂解物或富集的亚细胞组分，通过两步正交的分离 (orthogonalseperation)，二维凝胶 (2D 胶）电泳可以很好地分离成几百个至上千个单个蛋白质。第一次分离基于电荷，即使用变性等电聚焦电泳; 第二次分离基于表观分子质量，即使用变性十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电
聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测蛋白质的等电点2
四、固定、，染色和脱色将凝胶板放在培养皿中，加入固定液，浸泡数小时后，用脱色液清洗两次，每次10min, 然后加入染色液，室温下放置15－30min，再用脱色液洗脱数次，直至谱带清晰，放入保存液中浸泡10min,可制干板。五、制作干胶板1. 取完全浸湿的平整玻璃纸一张，于玻璃板上铺平，纸与板之间不可
聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测蛋白质的等电点1
实验原理所有的氨基酸均为两性物质，即它们至少含有一個羧基（carboxyl）及一個氨基（α-amino）。這些可游离的基团随着pH变化可以三种形式存在，即正电荷（cation）、两性离子（zwitterion）及负电荷（anion）等三种，在酸性溶液中带正电荷，在碱性溶液中带负电荷。若氨基酸在某一p
等电聚焦电泳色谱仪pH梯度的形成过程
等电聚焦电泳色谱仪是在电泳介质中放入载体两性电解质，当通以直流电时，载体两性电解质形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度，不同的蛋白质移动到其相当的等电点位置上，聚焦于一个狭窄区带中而达到分离。载体两性电解质是一系列脂肪族多氨基多羧酸同系物和异构体组成的混合物，具有很多既不相同又十分接近的相互连接的
影响等电聚焦电泳色谱仪分离容量的因素
等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同，在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离。等电聚焦是在电泳介质中放入载体两性电解质，当通以直流电时，载体两性电解质形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度，不同的蛋白质移动到其相当的等电点位置上，聚焦于一个狭窄区带中的过程。一、影响等电
蛋白质的双向电泳实验_等电聚焦法
蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦( Isoelect rofocusing, IEF) , 根据蛋白质的等电点不同进行分离; 第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE ) , 按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后, 可以得到蛋白质分子的等电点和分子量信息。本实验目的是
等电聚焦电泳槽和水平电泳槽什么区别
等电聚焦电泳槽和水平电泳槽什么区别两者的原理上的区别：等电聚焦是根据被分离的蛋白质组分间的等电点的差异被分离，具有不同等电点的蛋白质会停留在相应的pH区带，而普通的SDS-PAGE凝胶电泳是根据蛋白质组分间的分子量大小差异进行分离的，分子量不同的蛋白质会停留在相应孔径的凝胶层。
载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳仪特点
载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同，在一个稳定的、连续的、线性或非线性的pH梯度中进行分离，具有以下特点：一、优点：1、分辨率高，区带清晰、窄。2、加样部位自由，重现性好。3、可测定蛋白和多肽的等电点。二、缺点：1、载体两性电解质合成过程复杂，影响蛋白质点
等电聚焦水平板电泳法的固定和染色的介绍
一、固定和染色 （1）试剂 a. 固定液 20%三氯醋酸 b. 染色液 i) 染色储备液 称取1.0gG-250，溶于20ml水中，为溶液1；称取125g（NH4）2SO4，溶于400ml水中，为溶液2；称取20g H3PO4，为溶液3；将溶液3加入到溶液1中，待G-250完全溶解后 ，与
等电聚焦水平板电泳法的操作方法的介绍
（1）制胶 取A液2.5ml，pH3~10的两性电解质（或其它pH范围的两性电解质）0.35ml，水1.25ml，50%甘油0.5ml，抽气5~10分钟，加B液25μl，N,N,N’,N’-四甲基乙二胺6μl，混匀后缓慢的注入水平模具内，室温下聚合。 （2）预电泳 将已聚合的聚丙烯酰胺凝胶放到