免疫细胞化学法的常用的生物素介绍

亲合方法有:标记亲合素-生物素法(labelled avidin-biotin method LAB法)、桥连亲合素-生物素法(bridged avidin-biotin method, BAB法)及亲素-生物素-过氧化物酶复合物法(avidin-biotin-peroxidase complex method,ABC法);现市上有配制成的ABC药盒供应,使用简便,是广泛应用的一种方法。......阅读全文

生物素的主要功用介绍

人体每天需要量约100~300微克。生鸡蛋清中有一种抗生物素的蛋白质(卵蛋白,avidin)能和生物素结合,结合后的生物素不能由消化道吸收;造成动物体生物素缺乏,此时出现食欲不振、舌炎、皮屑性皮炎、脱毛等。然而,尚未见人类生物素缺乏病例,可能是由于除了食物来源以外,肠道细菌也能合成生物素之故。生物素

实验中常用分离法介绍

蒸馏、升华、结晶、沉淀、溶剂萃取、离子交换、色谱分离、离心分离、电渗析、电化学分离方法、盐析。

碳硫仪常用检测法介绍

  碳硫仪适用于钢铁及其它材料中碳硫两元素质量分数的测定。本仪器可采用高速引燃炉、管式燃烧炉燃烧样品,气体容量法测试碳质量分数、碘量法测试硫质量分数。   碳硫仪常用检测法介绍:   1、红外吸收法:   试样中的碳、硫经过富氧条件下的高温加热,氧化为二氧化碳、二氧化硫气体,气体经处理后进入相

生物素亲合素系统的生物素与亲和层析介绍

  亲和层析是将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液, 改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来。  生

常用色谱法介绍-离子色谱法

离子色谱法(IC)是利用离子交换原理,连续对共存的多种阴离子或阳离子进行分离、定性和定量的方法。分析阳离子时,分离柱填充低容量的阳离子交换树脂,用盐酸溶液做淋洗液。

常用色谱法介绍薄层色谱法

薄层色谱法(TLC),系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于跟踪反应进程。

常用色谱法介绍置换色谱法

样品加载到色谱柱上后,用含有一种比样品组分保留作用更强的化合物(顶替剂或置换剂)的流动相洗脱,而将样品组分置换流出色谱柱的分析方法。

常用色谱法介绍亲和色谱法

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。

常用色谱法介绍-纸色谱法

纸色谱法(filter paper chromatography)指的是把一种溶剂固定在固体的支持物(固定相) 上,由于滤纸纤维对水有较强的亲和力,一般能吸附其自身质量22%的水,其中,6%的水以氢键与纤维素牢固结合,这些水即称为固定相。被水饱和的有机相(如正丁醇乙醚水系统) 为流动相。当流动相从含

常用色谱法介绍电色谱法

电色谱是化学学科的分析化学专业的色谱分析类中的一种新兴分析技术。全称为毛细管电色谱(Capillary Electrochromatography),简称CEC.公认的现代CEC的鼻祖是美国北卡大学的Jorgenson教授,其在20世纪80年代初期在美国分析化学杂志上发表了关于CEC的第一篇文章。在

常用色谱法介绍反相色谱法

反相色谱法(英语:Reversed-phase chromatography,RPC)反相色谱法(IGC)一反普通气相色谱的测定方式。以被测的高分子为固定相、以惰性气体为流动相,为了测定需要,在流动相中加入一些探针分子,它们是挥发性的低分子。将探针分子注入气化室气化后,由载气带入色谱柱,测定它们在两

常用分离法分馏的定义和过程介绍

定义:分馏是利用分馏柱将多次气化—冷凝过程在一次操作中完成的方法。因此,分馏实际上是多次蒸馏。它更适合于分离提纯沸点相差不大的液体有机混合物。进行分馏的必要性:(1)蒸馏分离不彻底。(2)多次蒸馏操作繁琐,费时,浪费极大。混合液沸腾后蒸气进入分馏柱中被部分冷凝,冷凝液在下降途中与继续上升的 蒸气接触

生物素酰化探针的检测实验——化学发光法

实验材料DNA试剂、试剂盒生物素磷酸酶仪器、耗材紫外灯离心机实验步骤1.  用夹子固定已转印的尼龙膜的边角于一小片干的吸水纸上,样品面朝上,放进温箱内12~80℃放15~30 min 或温室晾干过夜。 2.  将带核酸的面朝上暴露于紫外灯下,用最适的时间交联。3.  用生物素探针与膜杂交,用适当强度

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

抗生物素蛋白介绍

抗生物素蛋白存在于卵白中的一种碱性糖蛋白,在生蛋清里可以找到还有大量的抗生素蛋白,与生物素(维生素B7)结合可使其难以被人体吸收。

抗体的生物素化标记的方法介绍

本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。NHSB:N-羟基琥珀酰亚胺生物素(有商品供应)0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液,pH

关于抗生物素蛋白的分布介绍

  抗生物素蛋白存在于卵白中的一种碱性糖蛋白,在生蛋清里可以找到还有大量的抗生素蛋白,与生物素(维生素B7)结合可使其难以被人体吸收。  存在于卵白中的碱性糖蛋白,因它贪婪地(avidly)与生物素结合,故有此名(avidin)。给动物以生的卵白则产生生物素缺乏症,因为生物素蛋白与生物素结合,使之失

常用镜检法的调置

  随着近代光学技术的发展以及微电子、计算机技术的融合,赋予光学显微镜以新的生命力。在掌握必要的显微镜及其各种镜检法的理论知识基础上,进行调试、校准和定期维护,对于保证显微镜技术的有效利用和观测质量尤为重要。对于镜检法操作过程中常易疏漏的调制环节我们来作为重点讨论一下。    1 明场(bright

比浊法的常用方法

(1)目视比浊法目视比浊法就是指用眼睛观, 比较悬浊液浊茺以确定物质含量的方吱。其操作是先配制一系列浊度逐渐增加的标准,然后在同样的实验条件下,将被测液的浊度与标准进行比较比而获得测量结果。(2)免疫比浊法免疫比浊法包括透射比浊法和散射比浊法两种。(3)光电比浊法当光束通过悬浊液时, 由于被散射或吸

常用色谱法介绍正相色谱法

正相色谱法 根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。硅胶色谱和极性键合相色谱可作正相色谱。

常用色谱法介绍-胶束电动色谱法

在背景电解质溶液中加入表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)形成胶束,根据样品在胶束和周围水性缓冲液中的分配系数及迁移率不同实现样品分离的一种色谱法。

常用色谱法介绍气相色谱法

气相色谱法是利用气体作流动相的色层分离分析方法。汽化的试样被载气(流动相)带入色谱柱中,柱中的固定相与试样中各组份分子作用力不同,各组份从色谱柱中流出时间不同,组份彼此分离。采用适当的鉴别和记录系统,制作标出各组份流出色谱柱的时间和浓度的色谱图。根据图中表明的出峰时间和顺序,可对化合物进行定性分析;

常用色谱法介绍高效液相色谱法

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶

关于化学沉淀法的应用和常用方法介绍

  应用  化学沉淀法经常用于处理含有汞、铅、铜、锌、六价铬、硫、氰、氟、砷等有毒化合物的废水。利用向废水中投加氢氧化物、硫化物、碳酸盐、卤化物等生成金属盐沉淀可以去除废水中的金属离子,向废水中投加钡盐可用于处理含六价铬的工业废水生成铬酸盐沉淀,向废水中投加石灰生成氟化钙沉淀可以去除水中的氟化物。 

免疫细胞化学

Introduction to Immunocytochemistry (House Ear Institute)A brief overview of common available methods.  BrDU Immunocytochemistry using peroxidase and

免疫细胞化学法的分类

  ①直接法:用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合,操作方法简便,特异性高,但敏感性较差,此法可用于检定未知抗原;②间接法:先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合,然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合;第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体,然后再结合以标

免疫细胞化学法的简介

  肽类与蛋白质种类繁多,均具有抗原性,当将人或动物的某种肽或蛋白质作为抗原注入另一种动物体内,则产生与该抗原相应的特异性抗体(免疫球蛋白);将抗体从血清中提出后,结合上某种标记物,即成为标记抗体。用标记抗体与组织切片标本孵育,抗体则与细胞中相应抗原发生特异性结合,结合部位被标记物显示,则在显微镜下

免疫组化发展及原理

  1941年Coons首先用荧光素标记抗体—检测肺组织内的肺炎双球菌获得成功。  60年代 Akanke建立酶标抗体技术—铁蛋白标记Ab技术  70年代 Stemberger改良上述技术,建立辣根过氧化物酶—抗体过氧化物酶(PAP)技术,使免疫细胞化学得到广泛应用。  80年代 Hsu等建立了抗生

抗生物素蛋白分布介绍

存在于卵白中的碱性糖蛋白,因它贪婪地(avidly)与生物素结合,故有此名(avidin)。给动物以生的卵白则产生生物素缺乏症,因为生物素蛋白与生物素结合,使之失活。分子量为68300,含4个亚单位。在体外(试管中)对含生物素的酶具有特异的抑制作用。