尿中包涵体检查的检查过程
医生收集患者的尿液,通过检验科对尿液的分离检查,测定尿液中病毒包涵体的数目其其它病原体,检查时医生小心操作,以免出错。......阅读全文
从包涵体中纯化表达蛋白
实验方法原理蛋白质在大肠杆菌中的高水平表达,常常导致形成相差显微镜下可见的细胞质颗粒或包涵体。这些由表达蛋白聚集成的包涵体很容易与可溶性蛋白和膜结合蛋白分离。高水平表达外源蛋白的细菌经离心浓缩后,可通过机械法、超声处理法或溶菌酶加去污剂的方法进行裂解。包涵体经离心沉淀后,可用Triton X-100
尿素在包涵体复性中的作用
①包涵体就是蛋白的变性聚集后的产物,6M盐酸胍及8M尿素是作为溶解包涵体的溶剂。②复性的过程是逐步去除盐酸胍或者尿素,从而使得蛋白天然构象逐步形成。所以一般如果起始使用的是6M盐酸胍进行包涵体溶解,这个过程中逐步降低的是盐酸胍的浓度。
尿羟脯氨酸检查过程
1、临床常用测量方法有24小尿羟脯氨酸与空腹2小时尿羟脯氨酸,以及尿羟脯氨酸与肌酐比值。 2、饮食中的胶原含量对24小时尿羟脯氨酸含量影响较大。因此在测试时应让患者进素食2~3天。 3、空腹2小时尿羟脯氨酸排出量不受饮食的影响,故更能反映病人的基础代谢状况。 4、尿羟脯氨酸(HYP)是骨吸
尿白蛋白清除率的检查过程
测定尿中两种大小悬殊的蛋白质,以其相对清除率对数与分子量对数绘制的斜率θ角来表示。通常先代入直线方程,求出直线斜率K,查三解函数表或计算θ角。如K=(logC1-logC2)/(logX1-logX2),C1转铁蛋白清除率,C2IgM清除率,X1转铁蛋白的分子量,X2 IgM的分子量。θ>64°
尿三杯试验的检查过程
检查方法:尿检 检查步骤:清洗外阴及尿道口后,将最初10~20毫升尿液留于第一杯中,中间30~40毫升尿液留在第二杯中,终末5~10毫升留在第三杯中。送到医院的指定的检验窗口。
尿促卵泡成熟素的检查过程
尿液FSH提取:A.丙酮沉淀,取尿液5ml置圆锥型离心管内,加提取缓冲液1ml,轻轻旋转混合。B.加入冷丙酮20ml,盖紧来回翻转混合10次以上。C.在-10℃冰箱内放置过夜或72h。D.离心(1500×g)30min,可见少许沉淀物。E.吸去上清液并用氮气吹干沉淀物(约30min),此操作应在
尿co2测定的检查过程
血HCO3-水平可呈碱性或者酸性。24h尿HCO4-仅可滴定酸正常,尿钙可增高或者正常(测尿PCO2时可灌注NaHC03使尿液碱化,当尿pH>血pH时,尿PCO2>血PCO2,2.66kPa或者更多则有诊断意义)。
巨细胞包涵体病的诊断及病理学检查
诊断 确诊CID包括临床表现及实验室确诊的证据,仅有实验室检测证据无临床表现称为CMV感染.不能诊断为CID。以下情况提示有CID的可能性:新生儿有黄疸、肝脾肿大、皮肤粘膜有出血点、周围血异常淋巴细胞增多,但血清嗜异性凝集反应阴性。 病理学检查 1、组织病理学检查活检或尸解组织病理切片,用
包涵体蛋白的纯化和复性实验过程(二)
A、过柱前的注意事项:a、样品必须澄清、无颗粒物,否则会堵塞柱子、缩短其使用寿命;b、包含体洗涤的最后一步及溶解时所用的Buffer中不能含EDTA、DTT、2ME;c、确保样品及Binding Buffer中有适量的NaCl,以防止杂离子与Ni离子竞争;B、过Ni柱的操作步骤:①用DDW洗涤,洗去
包涵体蛋白的纯化和复性实验过程(一)
一.菌体的收集和破碎用50 ml离心管分别收集诱导表达后的培养物,8000 rpm 4℃离心10 min。沉淀用适量的超声破菌缓冲液重悬。【备注】超声破菌缓冲液(20 mmol/L Tris-HCl pH8.0、0.5 mol/L NaCl、1 mmol/L EDTA、1 mg/mL溶菌酶)重悬后的
尿酮体检查(KET)的注意事项及检查过程
注意事项 检查时注意:做该检查时应尽量采用新鲜晨尿。随机留取的尿液以中段尿为宜。 检查过程 检查过程:与常规尿检一样,使用清洁干燥的容器,以医院提供的一次性尿杯和尿试管为好。取10毫升左右尿液,送到医院的指定的检验窗口。
尿动力学检查的注意事项及检查过程
注意事项 检测前注意事项: 检查前一个小时,请患者喝 500ml 开水,胀膀胱等尿急时,才开始做检查以测尿流速及量,然后将检查用的细管放入膀胱先测残余尿量后,再测得膀胱之压力及容积,并配合肌电图活动性,看是否有逼尿肌─括约肌不协调,因为此现象会造成排尿困难或尿急且排尿不顺畅。最后做完排尿期的
包涵体的纯化
关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器
包涵体的简介
基因工程定义:在某些生长条件下,大肠杆菌能积累某种特殊的生物大分子,它们致密地集聚在细胞内,或被膜包裹或形成无膜裸露结构,这种水不溶性的结构称为包涵体(Inclusion Bodies,IB)。病毒在增殖的过程中,常使寄主细胞内形成一种蛋白质性质的病变结构,在光学显微镜下可见。多为圆形、卵圆形或不定
包涵体的纯化
关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器
尿中红细胞检查的相关分析
显微镜下红细胞表现为无核、光滑、两面凹陷、适度的折光性、暗淡的圆盘状,直径一般为7 μm。根据显微镜下红细胞形态,可将尿红细胞分为均一型(形态与正常血液红细胞相似,大小一致)、多形型(红细胞形态大小不一)和二者约占50%的混合型以及影红细胞(红细胞内没有血红蛋白)。红细胞表面“带刺”,大小一致,
关于染色体核型分析检查的检查过程介绍
染色体检查是用外周血在细胞生长刺激因子—植物凝集素(PHA)作用下经37℃,72小时培养,获得大量分裂细胞,然后加入秋水仙素使进行分裂的细胞停止于分裂中期,以便染色体的观察;再经低渗膨胀细胞,减少染色体间的相互缠绕和重叠,最后用甲醇和冰醋酸将细胞固定于载玻片上,在显微镜下观察染色体的结构和数量。
关于先天性巨细胞包涵体病的检查方法介绍
1、血象及肝功能 可有贫血及血小板减少,临床上酷似传染性单核细胞增多症的患儿,外周血涂片上可见较多的异常淋巴细胞,黄疸患儿血清胆红素增高,并伴有血清转氨酶上升,用病毒学和血清学检查可明确诊断。 2、病原学 (1)检测CMV:用尿,支气管肺泡洗液,唾液,肝活体组织或咽分泌物接种到人胚肺纤维母细
临床化学检查方法介绍血红蛋白H包涵体介绍
血红蛋白H包涵体介绍: 不稳定血红蛋白、血红蛋白H等异常血红蛋白在红细胞内可发生沉淀,形成变性珠蛋白小体,呈颗粒状,弥漫而均匀分散在红细胞内。经过特殊处理后,可提高其检出率。在显微镜油镜下观察500-1000个红细胞,计算血红蛋白H包涵体阳性红细胞的百分率。血红蛋白H包涵体正常值: 正常值:
膀胱逼尿肌功能检查的注意事项及检查过程
注意事项 检查前禁忌: 保持正常的饮食及睡眠。 检查时要求:患者积极配合医生,医生耐心操作,仔细观察结果,以确保结果准确。 检查过程 (一)充盈期膀胱内压测定,用液体或气体(二氧化碳)注入膀胱,在膀胱充盈过程中测定膀胱内压,并绘出膀胱内压曲线,以了解其与容量的关系。 (二)排尿期膀胱内
孕尿雌三醇测定的检查过程
检查过程:与常规尿检一样,使用清洁干燥的容器,以医院提供的一次性尿杯和尿试管为好。取10毫升左右尿液,送到医院的指定的检验窗口,用染色法检查。
关于尿苯丙酸试验的检查过程介绍
一、检查过程 (1)尿4ml加沉淀剂1ml,混匀,静置片刻,用滤纸或离心法除去沉淀得澄清尿。 (2)澄清尿加浓盐酸2~3滴,三氯化铁液2~3滴,每加1滴,混匀,立即观察结果。 二、不适宜人群 一般无禁忌人群。 三、不良反应与风险 暂无。
尿三氯化铁试验的检查过程
将三氯化铁滴入尿液,如立即出现绿色反应,则为阳性,表明尿中苯丙氨酸浓度增高。此外,二硝基苯肼试验也可以测尿中苯丙氨酸,黄色沉淀为阳性。
尿游离皮质醇(UFC)的检查过程
1、尿样品测定:取万分之一的24h混合尿,用蒸馏水稀释至0.5ml,于10ml抽提管中,加二氯甲烷5ml和0.1mol/L NaOH 0.2ml,抽提5min,静止片刻弃去上层液,下层二氯甲烷抽提液用水洗2次,每次1ml,摇1min,离心1500r/min 3min,弃去水层,取二氯甲烷提取液双
关于尿溶菌酶测定(ULYSO)的检查过程介绍
1、注意事项 检查时注意:做该检查时应尽量采用新鲜晨尿。随机留取的尿液以中段尿为宜。 不适宜人群:月经期女性 2、检查过程 检查过程:与常规尿检一样,使用清洁干燥的容器,以医院提供的一次性尿杯和尿试管为好。取10毫升左右尿液,送到医院的指定的检验窗口。检查方法是用显微镜对尿进行检查。
关于尿羟脯氨酸的检查过程
临床常用测量方法有24小尿羟脯氨酸与空腹2小时尿羟脯氨酸,以及尿羟脯氨酸与肌酐比值。 饮食中的胶原含量对24小时尿羟脯氨酸含量影响较大。因此在测试时应让患者进素食2~3天。 空腹2小时尿羟脯氨酸排出量不受饮食的影响,故更能反映病人的基础代谢状况。 尿羟脯氨酸(HYP)是骨吸收的主要生化指标
尿浓缩与稀释功能试验的检查过程
尿浓缩稀释实验有两种试验方法:(1)Mosenthal法:试验时正常进食,每餐含水量不宜超过500-600ml。除正常饮食外不再饮任何液体。上午八点排尿弃去,白天12小时内,每2小时留尿一次,共6次。在收集夜间12小时尿。(2)Vol Hard法:上午8点排尿弃去,以后每3小时留尿样样本一次,共
尿磷的注意事项及检查过程
注意事项 检查前:禁止剧烈运动,保持良好的饮食和作息,检查前一周停用雄激素、合成类激素及某些利尿药物。检查前3天禁饮酒。 检查时:即先排出一部分尿弃去,以冲掉留在尿道口及前尿道的细菌,然后将中段尿留取送检。 检查过程 收集受检测者的尿液,用化学法检测。
尿含铁血黄素定性试验的检查过程
1、 取混匀的新鲜尿液15ml(以2000r/min时间5分钟)离心,倾去上清液。 2 、在沉渣中加入新鲜配制的2%亚铁氰化钾试剂及3%盐酸各2ml,充分混匀,室温静止10分钟。 3 、再离心沉淀,取沉淀物涂片,加盖片后用高倍镜检查(必要时用油镜)。 4 、如见有分散或成堆蓝色闪光颗粒(直
尿酚红排泄试验(psp)的检查过程
医生收集患者的尿液,通过检验科对尿液的分离检查,测定尿液测定酚红在尿中排出量(酚红排泄率),可作为判断近端小管排泄功能的粗略指标。检查时医生小心操作,以免出错。