关于高效液相色谱的设备高压泵的介绍
HPLC使用的色谱柱是很细的(1~6 mm)，所用固定相的粒度也非常小（几μm到几十μm)，所以流动相在柱中流动受到的阻力很大，在常压下，流动相流速十分缓慢，柱效低且费时。为了达到快速、高效分离，必须给流动相施加很大的压力，以加快其在柱中的流动速度。为此，须用高压泵进行高压输液。高压、高速是高效液相色谱的特点之一。HPLC使用的高压泵应满足下列条件： a. 流量恒定，无脉动，并有较大的调节范围（一般为1~10 mL/min)； b. 能抗溶剂腐蚀； c. 有较高的输液压力；对一般分离，60×10^5Pa的压力就满足了，对高效分离，要求达到150~300×10^5Pa。 ⑴往复式柱塞泵 当柱塞推入缸体时，泵头出口（上部）的单向阀打开，同时，流动相进入的单向阀（下部）关闭，这时就输出少量的流体。反之，当柱塞向外拉时，流动相入口的单向阀打开，出口的单向阀同时关闭，一定量的流动相就由其储液器吸入缸体中。这种泵的特点是不受整......阅读全文
高效液相色谱的测量方式
色谱柱的填料和流动相的组分应按各品种项下的规定.常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶很常用辛基键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检
高效液相色谱柱子的分类
高效液相色谱柱分类：1、吸附色谱；2、分配色谱；3、离子色谱；4、分子排阻色谱法/凝胶色谱；5、键合相色谱；6、亲和色谱
高效液相色谱柱的保养
色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。我们在对色谱柱使用
高效液相色谱柱子的分类
高效液相色谱柱分类：1、吸附色谱；2、分配色谱；3、离子色谱；4、分子排阻色谱法/凝胶色谱；5、键合相色谱；6、亲和色谱
高效液相色谱柱子的分类
高效液相色谱柱分类：1、吸附色谱；2、分配色谱；3、离子色谱；4、分子排阻色谱法/凝胶色谱；5、键合相色谱；6、亲和色谱
高效液相色谱柱的选择
1 硅胶基质填料正相色谱：正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相
关于高效液相色谱分析法的类型—吸附色谱的介绍
在吸附色谱中，样品的极性官能团牢固地保留在填料的吸附活性中心上，非极性烃基几乎不予保留。所以，要清楚地辨别极性功能团的种类、数量和位置。通常，样品能用吸附色谱分离的应是能溶解于有机溶剂并是非离子型的，强离子样品是不适宜的。 吸附色谱所使用的流动相以正己烷、三氯甲烷、二氯甲烷作为基础，按照样品的
液相色谱系统对高压泵的基本要求
1 耐高压 耐高压是HPLC系统对高压泵的基本要求之一。目前国际上商品液相色谱仪泵的zui高工作压力一般为41.36MPa（6000psi）左右， 2 稳定性好、脉动小 输液高压泵的稳定性和脉动大小，会直接影响HPLC系统的稳定性、影响系统的噪声、降低灵敏度； 3 流量连续可调、流量范围宽
高效液相色谱流动相选择
流动相选择1）由强到弱：一般先用90％的乙腈（或甲醇）／水（或缓冲溶液）进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。2）三倍规则：每减少10％的有机溶剂（甲醇或乙腈）的量，保留因子约增加３倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意观察
高效液相色谱流动相选择
流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 流动相选择 1：由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况
高效液相色谱法使用的仪器高压泵的介绍
HPLC使用的色谱柱是很细的(1~6 mm)，所用固定相的粒度也非常小（几μm到几十μm)，所以流动相在柱中流动受到的阻力很大，在常压下，流动相流速十分缓慢，柱效低且费时。为了达到快速、高效分离，必须给流动相施加很大的压力，以加快其在柱中的流动速度。为此，须用高压泵进行高压输液。高压、高速是高效
高效液相色谱流动相的选择原则
高效液相色谱仪分析时流动相的选择原则：1 选择色谱醇的溶剂作为流动相不要随意加满溶剂瓶。作为分析流动相，应避免不必要的浪费，防止污染环境，危害身体健康。应该根据样哦数量，计算需要使用的溶剂体积，添加适量流动相到试剂瓶中作为流动相。因为有些有机溶剂长期放置易变质，比如四氢呋喃在光照下就容易变质，甲醇或
高效液相色谱的流动相选择方法
流动相溶剂的选择1）所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2）溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3）在制备分离中，溶剂应当易于除去，不干扰
高效液相色谱的流动相如何选择
由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲和力，并参与固定相对组分的竞争。因此，正确选择流动相直接影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是：（1）溶剂对于待测样品，必须具有合适的极性和良好的选择性。（2）溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器，应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的
高效液相色谱对流动相的脱气
高效液相色谱对流动相的脱气脱气方式：在线脱气机脱气，前期流动超声波超声脱气； 系统中气泡的产生：流动相本身存在，梯度淋洗混合后放出气泡； 气泡的影响：存在于管路中，系统压力不稳定，实验结果有偏差；存在于单向阀中，易造成液体回流，流量不准确，甚至是不吸液；存在于检测器中，出现鬼峰，影响检测准确性。
色谱技术方法高效液相色谱
高效液相色谱 （HPLC）是目前应用最多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，
高效液相色谱的液固分离简介
流动相为液体，固定相为吸附剂（如硅胶、氧化铝等）。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是：当试样进入色谱柱时，溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附（未进样时，所有的吸附剂活性中心吸附的是S)，可表示如下：Xm nSa ====== Xa nSm 式中
高效液相色谱与凝胶色谱的区别
高效凝胶色谱是一种液相色谱,高效液相色谱（High performance液相色谱,高效液相色谱），又称“高压液相色谱”，使用液体作为流动相，采用高压输液系统将不同极性的单一溶剂或流动相，如不同比例的混合溶剂和缓冲液，泵入装有固定相的色谱柱中。色谱柱中的组分分离后，进入检测器进行检测，从而实
关于高效液相层析的适应范围介绍
气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子
关于高效液相层析法的基本介绍
高效液相层析法（HPLC）是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上，引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。由于HPLC分离能力强、测定灵敏度高，可在室温下进行，应用范围极广，无论是极性还是非极性，小分子还是大分子，热稳定还是不稳定的化合物均可用此法测定。对蛋
关于高效液相色谱面积归一化法测定介绍
测定供试品（或经衍生化处理的供试品）中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和，并求出占总峰面积的百分率。但溶剂峰不计算在内。色谱图的记录时间应根据各品种所含杂质的保留时间决定，除另有规定外可为该品种项下主成分保留时间的倍数。
高效液相色谱的外标法的相关介绍
按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和供试品，配制成溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品和供试品待测成分的峰面积（或峰高），按下式计算含量： A 含量(mx)=mr×-Ar式中各符号意义同上 由于微量注射器不易精确控制进样量，当采用外标法测定供试品中某杂质或主成分含量
简述高效液相色谱分析的正反色谱的介绍
正相色谱法 采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。 反相色谱法 一般用非极性固定相（如
关于高效液相色谱分析法的历史发展介绍
1903年俄国植物化学家茨维特（Tswett）首次提出“色谱法”（Chromatography）和“色谱图”（Chromatogram）的概念。茨维特使用色谱法 chromatography （来自希腊字， chroma 意思是颜色， graphy 意思是记录 -直译为颜色记录）来描述他的彩色
关于高效液相色色谱仪的主要功能介绍
高效液相色色谱仪是一种用于环境科学技术及资源科学技术领域的分析仪器，于2005年6月14日启用。 1、高效液相色色谱仪的技术指标：高压、高效、高速、灵敏度高、适用范围宽。 2、高效液相色色谱仪的主要功能： 高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压
关于分析兼制备型高效液相色谱的指标和功能介绍
分析兼制备型高效液相色谱是一种用于基础医学、药学、中医学与中药学领域的分析仪器，于2011年2月14日启用。 一、分析兼制备型高效液相色谱的技术指标： 1、工作条件：电压AC220V 50HZ；温度15－35度； 湿度30-70％。 2、全自动双泵系统: 流速：0.50-150.00ml/
高效液相色谱故障排除
注意：在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离子的形式存在，因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。 如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。 色谱柱的维护 1．使用预柱保护分析柱（
高效排阻液相色谱
实验材料 nrhTNF 试剂、试剂盒 氯化钠 PB 仪器、耗材
反相高效液相色谱2
方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱试剂、试剂盒甲醇n-丙醇反相硅胶TFA 乙腈溶剂体系仪器、耗材水浴超声波仪色谱加样器层析柱玻璃料末端接口环氧树脂流动池正向光学扫描检测器加热枪加样器液相色谱柱填充泵微柱聚丙烯离心管聚硅酸盐管蓝宝石切刀信号数据收集装置硅胶隔膜Teflon接头UV检测器实验步骤一
高效液相色谱使用步骤
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)． 过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)． 打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)． 进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)． 有一段时间没用