细胞融合的基本原理和方法

1.病毒诱导助融:细胞融合在自然界是存在的,细胞融合研究第一也是基于自发的细胞融合,1957年,冈田善雄意外发现仙台病毒,能诱导悬液中艾氏腹细胞融合,然后Harris、Kada等用于诱导种间细胞融合,获得成功。2.化学助融:1972年,卡尔森第一用硝酸钠进行烟草两个种的细胞原生质体的融合,1974年Kao等第一发现聚乙二醇能诱导植物细胞原生质体融合产生杂交细胞。3.1975年Pentecorvo,发现聚乙二醇亦能帮助哺乳类动物细胞的融合,1976年Davidson更进一步证实这一结果,并且认为其具有简单快速、高效率等优点。4.因而,1975年之后聚乙二醇就逐渐取代了仙台病毒.3:电融合法:电融合法是70年代未期和80年代初期发展起来的一种新的细胞融合方法。5.Senda在1970年第一应用电脉冲,通过微电极在显微镜下使植物细胞融合,奠定电融合技术基础。6.激光诱导卵细胞融合:激光诱导卵细胞融合是最新的细胞融合方法,该法为张闻迪等......阅读全文

细胞融合的基本介绍

细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备,膜蛋白的研究

细胞融合过程技术分析

细胞融合过程技术分析融合的方法很多,常用的有转动法和离心法。融合时脾细胞和骨髓瘤细胞的比例为1:1至10:1不等。3:1或5:1zui为常用。1.试剂与材料(1)供融合用的脾细胞及骨髓瘤细胞。(2)1640培养液100ml。(3)完全1640液100ml。(4)2.5%FCS-1640液50ml。(

细胞融合技术诱发融合

异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。

细胞融合技术自发融合

同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合。

动物细胞融合实验

细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的过程。在自然情况下,体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象。人工方法诱导细胞融合开始于50 年,现在这项技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫,肿瘤及细胞工程的重要手段。在诱导物(如仙台病毒,聚乙二醇)作用下,相互融合的细胞发生凝集,随后在质膜接

简述细胞融合的意义

  1、理论上说任何细胞,都有可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源。这对于种质资源的开发和利用具有深远的意义。  2、融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制的限制,为远缘物种间的遗传物质交换提供了有效途径。  3、体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统,在杂种的分裂和增殖过程中双亲的

细胞融合技术的发展

19世纪30年代,科学家们相继在肺结核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞。细胞融合19世纪70年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象,但是当时科学发展水平的限制,没有给予足够重视。1962年,日本科学家发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合的现象。1965年,英国

动物细胞融合实验

一、实验目的细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的过程。在自然情况下,体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象。人工方法诱导细胞融合开始于50年,现在这项技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫,肿瘤及细胞工程的重要手段。通过实验,了解细胞融合的原理,掌握细胞融合的基本方法。二、实验原理在诱导物

细胞融合的基本定义

有性繁殖时发生的精卵结合是正常的细胞融合,即由两个配子融合形成一个新的二倍体。而细胞融合为在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。其中人工诱导的细胞融合,在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合,也能产生种间细胞的融合

什么是细胞融合率

细胞融合率是指不同基因型的细胞或原生质体融合形成杂种细胞的融合成功率。比如100个不同基因型的细胞进行融合,如果有20个融合成了杂种细胞,则表示细胞融合率为百分之20.细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过

什么是细胞融合率

细胞融合率是指不同基因型的细胞或原生质体融合形成杂种细胞的融合成功率。比如100个不同基因型的细胞进行融合,如果有20个融合成了杂种细胞,则表示细胞融合率为百分之20.细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过

细胞融合技术的意义

⒈理论上说任何细胞,都有可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源。这对于种质资源的开发和利用具有深远的意义。⒉融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制的限制,为远缘物种间的遗传物质交换提供了有效途径。⒊体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统,在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶绿体、线粒体DN

细胞融合的应用价值

  细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体。单克隆抗体可以用作诊断试剂,治疗疾病和运载药物,具有准确,高效,简易,快速等优点。

细胞融合的融合过程

  细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个

细胞融合的发展简史

19世纪30年代,科学家们相继在肺结核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞。19世纪70年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象,但是当时科学发展水平的限制,没有给予足够重视。1962年,日本科学家发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合的现象。1965年,英国科学家进

什么是细胞融合剂?

聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1000时,呈乳白色蜡状固体,能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂,对热稳定,与许多化学药品不起作用。用作细胞融合剂的聚乙二醇一般选用分子量为4000者,常用浓度为50%,pH8.0~pH8.2(用10%NaHCO3调整

细胞融合的融合过程介绍

细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个相互

细胞融合技术的相关概述

  人工细胞融合一般都采用化学和物理因素的诱导技术。如目前化学诱导常用促融合剂聚乙二醇(PEG);物理诱导采用电融合。为了改善和提高细胞融合的有效性,植物和微生物细胞的融合必须先除去细胞壁,使其成为原生质体。因此,对于植物和微生物来讲,细胞融合常被称为原生质体融合。细胞融合技术是在20世纪60年代建

细胞融合实验的实验原理

  根据Burnet的抗体选择学说,一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的,产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在

细胞融合技术离心振动法

物理方法之一,使用离心机等机器实现细胞之间的融合。

温度与细胞融合率多少

  温度影响了膜内分子的运动速率,温度低的PEG与细胞膜融合和细胞膜与细胞膜融合慢。温度高会使得细胞受损。

CRY3细胞融合仪

CRY-3细胞融合仪用于细胞杂交、细胞融合、可在倒置显微镜下直接观察,可用于微生物学、动物医学、生物工程等方面的研究

关于细胞融合的基本介绍

  细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备,膜蛋白的

细胞融合的诱导物介绍

细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜

细胞融合技术的应用价值

细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体。单克隆抗体可以用作诊断试剂,治疗疾病和运载药物,具有准确,高效,简易,快速等优点。

细胞融合技术的实验操作

人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合;第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合;最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融合细

细胞融合技术的应用价值

细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。细胞融合另一个重要应用就是制备单克隆抗体。单克隆抗体可以用作诊断试剂,治疗疾病和运载药物,具有准确,高效,简易,快速等优点。

酵母菌细胞融合实验

实验概要学习酵母菌原生质体制备和再生技术,为了解酵母菌为材料的外源基因转移等技术奠定基础。实验原理酵母菌如酿酒酵母,在遗传学和分子生物学的研究中有很大作用,尤其是近些年来,随着科技的进步,酵母菌的遗传操作如转化、基因克隆和外源基因在酵母受体中的表达等技术都有了突破性的进展。作为受体系统的酵母菌原生质

细胞融合技术电融合法

在直流电脉冲的诱导下,细胞膜表面的氧化还原电位发生改变,使异种细胞粘合并发生质膜瞬间破裂,进而质膜开始连接,直到闭和成完整的膜,形成融合体。优点:融合率高、重复性强、对细胞伤害小;装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察融合过程;免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控性强。

细胞融合技术的发展历程

19世纪30年代,科学家们相继在肺结核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞。19世纪70年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象,但是当时科学发展水平的限制,没有给予足够重视。1962年,日本科学家发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合的现象。1965年,英国科学家进