研究揭示骨骼肌兴奋收缩偶联过程原位结构基础

中国科学院生物物理研究所孙飞研究组和大连化学物理研究所李国辉研究组共同揭示了高等哺乳动物骨骼肌三联体介导兴奋-收缩偶联过程的原位结构基础。相关论文3月20日发表于《先进科学》。在生物体内,骨骼肌的收缩与舒张是受神经系统控制的。神经系统传递来的化学信号经过一系列的转变与传递过程最后形成肌肉的机械收缩行为,这个过程被称为兴奋-收缩偶联。在这一过程中,三联体上的RyR1是整个兴奋-收缩偶联过程中传递兴奋信号的重要元件。然而,尽管 RyR1的高分辨率结构已经被解析,仍有一系列关于 RyR1功能的重要科学问题未被解决。在该研究中,孙飞研究组基于前期工作基础,进一步结合组织原位制样方法和冷冻电子断层三维重构技术,系统性地表征了骨骼肌中三联体的精细原位结构。其中包括:解析了RyR1在骨骼肌16.7 ?分辨率的原位结构,发现在原位环境下RyR1与FKBP12和钙调蛋白(Calmodulin,CaM)紧密结合;解析了RyR1-DHPR超级复合体的......阅读全文

原位杂交技术原理

  荧光,又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。  在日常

RNA原位杂交实验

            实验方法原理 原位杂交的原理是含有互补序列(探针)的被标记的单链 DNA 或 RNA 片段在适当 的条件下与细胞的 DNA 或 RNA 杂交形成稳定的杂交体。无论是 DNA( dsDNA、寡核苷酸和 ssDNA ) 或是 RNA( SSC

原位合成的应用范围

复合材料制备传统复合材料制备方法有粉末冶金法、喷射成型法和各种铸造技术即模压铸造、流变铸造和混砂铸造等。所有这些方法是将事先制备好的增强相加入处于熔融状态或粉末状态的基体材料中,于是传统的增强相被称为外加的。外加法制备的复合材料存在增强体颗粒尺寸粗大、热力学不稳定、界面结合强度低等缺点。为了克服这些

原位电镜气相反应

气相反应气相反应因其在多领域的应用引起人们的广泛关注。很多化学反应是在催化剂辅助下,气相条件下发生的。对于纳米材料和生物分子,在实验条件下原位观察可以得到更多重要的信息。因此,原子尺度下原位研究气相反应,特别是气固界面的反应,可以帮助研究者们进一步理解材料的合成,性能及用途。文章总结了原位电镜在气相

RNA原位杂交实验

原位杂交(msituhybridization,ISH),也称作杂交组织化学或细胞学的杂交,是一种能够从形态学上证明特异性的 DNA 或 RNA 序列存在于制备的个别细胞、组织部分、单细胞或染色体中的技术。原位杂交是研究异质细胞群中 DNA 和 RNA 序列的细胞定位的唯一方法。本实验来源「RNA

RNA原位杂交实验

实验方法原理 原位杂交的原理是含有互补序列(探针)的被标记的单链 DNA 或 RNA 片段在适当 的条件下与细胞的 DNA 或 RNA 杂交形成稳定的杂交体。无论是 DNA( dsDNA、寡核苷酸和 ssDNA ) 或是 RNA( SSC RNA) 探针均能用于定位 DNA 和 mRNA,并

RNA荧光原位杂交

原位杂交:在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DAN或 RNA

荧光原位杂交(FISH)和用引物介导的原位标记(PRINS)...

荧光原位杂交(FISH)和用引物介导的原位标记(PRINS)操作规程设备    1、 医用微波炉;     2、 水浴锅;     3、 OLYMPUS BX51荧光显微镜;     4、 OLYMPUS DP11数字显微照相机。FISH试剂    (1)1×PBS:由10×PBS溶液稀释而成,储存

原位聚合酶链式反应(in-situ-PCR)和原位反转录

一、仪器设备英国Thermo Hybaid原位PCR仪。二、操作流程(一)原位PCR步骤1、预处理:  (1)切片常规脱蜡;  (2)0.2mol/L HCl处理10min;  (3)5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min;  (4)Nase消化组织37℃ 30min;  (5)梯度酒精脱水,

人胃癌裸鼠原位种植转移模型建立—细胞悬液原位种植法

实验方法原理人胃癌细胞悬殊液接种于裸鼠皮下,形成稳定传代的皮下移植瘤,将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆膜下,称为间接胃原位移植模型,并与直接用细胞悬液接种于裸鼠胃浆膜下、皮下、腹腔、尾静脉的移植瘤模型比较,观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化及细胞动力学改变等生物学特性。

CO2加氢的原位FTIR及准原位XPS/HSLEIS研究

  负载型Cu/Al2O3和Cu/ZnO催化剂上CO2加氢的原位FTIR及准原位XPS/HS-LEIS研究  胡俊, 李洋洋, 郑燕萍, 陈明树*, 万惠霖铜基催化剂是工业合成甲醇中常用的催化剂,其主要包含Cu,ZnO,Al2O3三种组分,研究各组分在催化合成甲醇过程中的本质作用及其相互间的协同作用

报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验——原位染色技术

β-半乳糖苷酶的原位染色可应用于:(1)确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞;(2)来示踪细胞与细胞相互作用。实验方法原理β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。实验材料β-gal表达质粒转染细胞试剂、试剂盒D-PBSA染色液

技术产品-原位分子杂交

原位分子杂交选实验技术服务,还在上海斯信。您的选择,就是对我们公司的肯定。相信斯信,相信自己,我们有太多优势,让您在众多信息流中独具慧眼的找到我们。一,斯信的服务与态度公司的宗旨是以更高的品质、更低的价格、更快的供货、更优质的服务的“四更”要求为国内广大科研实验工作者提供更为完善的产品供应渠道和售后

原位杂交操作规程

 (一)、仪器设备      医用微波炉; 水浴锅。     (二)、试剂      0.2mol/L HCl:HCl 8.2ml,H20 定容0.5L。0.1mol/L三乙醇胺(pH8.0):三乙醇胺 5.33ml,H20 定容0.4L。.5ml/L醋酸-2.5ml/L醋酸酐:三乙醇胺 13.2m

原位PCR实验的基本方法

  ① 固定组织或细胞:将组织细胞固定于预先用四氟乙烯包被的玻片上,并用多聚甲醛处理,再灭活除去细胞内源性过氧化物酶。  ②蛋白酶K消化处理:用60ug/ml的蛋白酶K将固定好的组织细胞片55℃消化处理2h后,96℃2min以灭活蛋白酶K。  ③PCR扩增:在组织细胞片上,加PCR反应液,覆盖并加液

德国研发FRP原位注塑工艺

  德国工业塑料加工研究院(IKV)日前选取一种足球护胫为展品,展示了采用注塑方法加工以热塑性塑料为基体的纤维增强塑料(FRP)。   该项目将熔体浸渍工艺(可以加工织物预成型件)的优势与热塑性塑料基体的优点结合在一起。研究团队正在采用原位聚合等技术,开发一种完全自动化的高度集成工艺。该工艺将系统

原位杂交的技术应用

①细胞特异性mRNA转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;②感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类乳头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;④基因在染色体上的定位;⑤检测染色体的变化,如染色体数

荧光原位杂交的概念

荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术,是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。

原位压力机测定方法

测定方法:★先在墙体上开凿两条水平槽孔①上水平槽尺寸应为 240mm×250mm×70mm(深×宽×高)。②下水平槽尺寸为 240mm×250mm×140m(深×宽×高),(下槽的高度视压力机型号不同而调整)。③上下水平槽孔对齐,两槽间相隔 7 皮砖,净距约 430mm。④槽间砌体的承压面修平整。★

荧光原位杂交的应用

  该技术不但可用于已知基因或序列的染色体定位,而且也可用于未克隆基因或遗传标记及染色体畸变的研究。在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。  FISH最初用于中期染色体。从正在分化的细胞核中制备的这种染色体是高度凝缩的,每条染色体都具有可识别的形态,它们染色后将显现出特征性的着丝粒位置

原位PCR的优势和不足

  PCR虽然能扩增包括福尔马林固定、石蜡包埋组织的各种标本的DNA,但扩增的DNA或RNA产物不能在组织细胞中定位,因而不能直接与特定的组织细胞特征相联系,这是该技术一个局限性。原位杂交虽具有良好的定位能力,但由于其敏感性问题,尤其是在石蜡切片中,尚不能检测出低含量的DNA或RNA序列。而原位PC

原位杂交的技术应用

①细胞特异性mRNA转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;②感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类乳头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;④基因在染色体上的定位;⑤检测染色体的变化,如染色体数

电镜原位杂交技术实验

            实验方法原理 从理论上讲,前包埋原位杂交技术的敏感性高于后包埋原位杂交技术,因为前者可观察到来自整个切片厚度的信号。但是,探针并不一定能穿透整个切片厚度,特别是用较长的探针。为了增加穿透性,经常应用冻融法或者蛋白酶和去污剂处理,而这样做会导致

荧光原位杂交的特点

  原位杂交的探针按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用同位素标记的放射性探针优势在于对制备样品的要求不高,可以通过延长曝光时间加强信号强度,故较灵敏。缺点是探针不稳定、自显影时间长、放射线的散射使得空间分辨率不高、及同位素操作较繁琐等。采用荧光标记系统则可克服这些不足,这就是FISH技术。

原位加热台的优势分析

在扫描电镜中对样品加热在许多材料科学研究中已经成了一项必不可少的手段,使用扫描电镜原位加热台可以进行动态地观察温度变化过程中的材料微观变化及失效分析。如今被广泛应用于金属材料、液晶检测、半导体、高分子材料、流体包裹体、生物工程等众多领域。原位加热台能够使我们动态地观察样品在加热过程中的相变、再结晶、

原位压力机测定方法

原位压力机测定方法:1、先在墙体上开凿两条水平槽孔①上水平槽尺寸应为240mm×250mm×70mm(深×宽×高)②下水平槽尺寸为240mm×250mm×140m(深×宽×高),(下槽的高度视压力机型号不同而调整)③上下水平槽孔对齐,两槽间相隔7皮砖,净距约430mm④槽间砌体的承压面修平整 2、安

原位PCR实验的大致过程

  大致过程  实验用的标本是新鲜组织、石蜡包埋组织、脱落细胞、血细胞等。其基本方法为多聚甲醛固定组织或细胞,蛋白酶消化处理组织;在组织细胞片上滴加PCR反应液进行扩增,覆盖并加液体石蜡后,在原位PCR仪上进行PCR循环扩增,PCR扩增结束后用标记的探针进行原位杂交,最后显微镜观察结果。  实验玻片

什么叫原位测试法

概念:在岩土层原来所处的位置,基本保持的天然结构,天然含水量以及天然应力状态下,测定岩土的工程力学性质指标。原位测试包括静力触探、动力触探、标准贯入试验、十字板剪切、旁压试验、静载试验、扁板侧胀试验、应力铲试验、现场直剪试验、岩体应力试验、岩土波速测试等

原位杂交的主要程序

1、使用地高辛标记的核酸探针进行石蜡切片的RNA原位杂交第一天1) 二甲苯于37℃脱蜡2次,每次15分钟;2) 无水乙醇浸泡2次,每次3分钟;3) 95%乙醇浸泡2次,每次3分钟;4) PBS清洗3分钟;5) 2%焦碳酸二乙酯室温下浸泡10分钟;6) PBS清洗10分钟;7) 加入胃蛋白酶25ul/

电镜原位杂交技术实验

实验方法原理 从理论上讲,前包埋原位杂交技术的敏感性高于后包埋原位杂交技术,因为前者可观察到来自整个切片厚度的信号。但是,探针并不一定能穿透整个切片厚度,特别是用较长的探针。为了增加穿透性,经常应用冻融法或者蛋白酶和去污剂处理,而这样做会导致一些胞内成分如核糖体的丢失,严重时会造成超微结构的形态改变