微生物果胶酶的酶学性质

国内外科学家利用层析、电泳等手段对果胶酶的酶学性质进行了研究,明确了一些果胶酶的分子量、动力学性质及其影响因素。常用果胶酶纯化方法有:硫酸铵沉淀、丙酮沉淀、离子交换层析以及凝胶过滤色谱等。果胶酶分子量一般在20kD~60kD之间,单体存在,个别以多聚体形式存在,如海栖热袍菌果胶酸裂解酶分子量为115.2kD,结构为四聚体。通常果胶酶活性范围在pH3.0~9.0,等电点pH4.0~9.0。其中,最适pH4.0~6.5的为水解酶,其作用不需要Ca2+参与。而裂解酶的作用需要Ca2+参与,最适pH为8.0~10.0。不同菌种所产果胶酶性质有所不同。Alana等人[18]采用了半固体和液体发酵两种不同的培养方式,采取凝胶过滤色谱和层析聚焦两种生化手段对Penicillium italicum生产果胶酶进行研究,发现两种培养方式产生的酶分子量、等电点、Km都相同,分别为22kD、8.6、3.2mg/ml。最适作用温度 50℃,最适pH6.......阅读全文

限制酶特点

限制酶是识别特定的核苷酸序列,并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子,限制性内切酶可分为两大类,即I类酶和Ⅱ酶。最早从大肠杆菌中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。其分子量较大;反应过程中除需Mg2+外,还需要S-腺苷-L甲硫

酯酶染色

酯酶是分解各种酯类的水解酶,根据机制的不同,分为非特异性酯酶和特异性酯酶,非特异性酯酶易水解像acetate和butyrate之类具有短链的酯类,特异性酯酶易水解像naphthol AS‐D cholroaceteta之类的具有长链的酯类。单核‐巨噬细胞类为非特异性酯酶反应染色,中性粒细胞类

脂蛋白脂肪酶(LpL)酶联免疫分析

脂蛋白脂肪酶(LpL)酶联免疫分析说明书实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中脂蛋白脂肪酶(LpL)水平。用纯化的脂蛋白脂肪酶(LpL)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入脂蛋白脂肪酶(LpL),再与HRP标记的脂蛋白脂肪酶(LpL)抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物

生物酶的分类脂肪酶的内容

  脂肪酶能将脂肪水解成甘油和脂肪酸,脂肪酸进一步进行B一氧化,每次脱下一个C2物,生成乙酰COA(N—环己基辛基胺),进入TCA(三羧酸)环彻底氧化或进入乙醛酸环合成糖类。  脂肪酶(EC3.2.2.3,甘油酯水解酶)是分解天然油脂的酶,其在纺织加工中主要用于绢纺原料脱脂处理;同时,只没在羊毛洗毛

替代的还原酶和氧化酶简介

  许多真核生物的电子传递链中的酶与上述研究较多的哺乳动物有所不同。例如,植物有替代的NADH氧化酶,可以不在线粒体基质而在细胞质中氧化NADH,并将这些电子传递到泛醌池。这些酶不传送子,可在不改变跨膜电化学梯度时还原泛醌。  分岔电子传递链的另一个例子是“替代氧化酶”,存在于植物、一些真菌及原生生

酶免疫技术对酶的要求是什么?

  酶的要求:一个酶蛋白分子每分钟可催化103~104个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合:  1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。  2.易与抗体或抗原偶联,标记后酶活性保持稳定,且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。  3.作用专一性强,酶活性不受样品中其他成分的影响,受检组织或

大鼠乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析

大鼠乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠乳酸脱氢酶(LDH)水平。用纯化的大鼠乳酸脱氢酶(LDH)抗体包被微孔板,制成固相

木瓜蛋白酶的酶活性的测定

本方法仅适用于木瓜蛋白酶。 基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.

淀粉酶同工酶的注意事项

  1、磺-淀粉比色法:  (1)血清和肝素抗凝血浆结果一致,而EDTA-Na2、草酸盐、枸橼酸盐、氟化钠可抑制AMS活性,使结果偏低。  (2)酶活性显著升高,即测定管吸光度小于空白管吸光度一半时,因底物相对不足,应将标本加大稀释倍数,或减少标本加入量,测定结果乘以稀释倍数。  (3)唾液中AMS

生化检测项目淀粉酶同工酶介绍

淀粉酶同工酶介绍:        琼脂糖电泳法可将淀粉酶同工酶分成两型,即S型(唾液型)及P型(胰型)。淀粉酶同工酶测定对鉴别胰腺疾病等有一定帮助。淀粉酶同工酶正常值:  酶抑制法(37℃)  AMY-P (胰型):8-45U/L(尿中为主)  AMY-S(唾液型):8-70U/L(血中为主)淀粉酶

乳酸脱氢酶及其同工酶的概况

概况:分子量为135~140kD。 LD催化丙酮酸与乳酸之间氧化还原反应,是参与糖无氧酵解和糖异生的重要酶。 乳酸+NAD+→丙酮酸+NADH+H+在碱性条件下促进乳酸向丙酮酸方向的反应,而在中性条件下促进丙酮酸向乳酸的转化(逆反应)。 LD由两种亚单位组成,H亚基和M亚基。可组合成含4个亚基的5种

大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶联免疫分析

大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中胃蛋白酶(Pepsin)含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胃蛋白酶(Pepsin)水平。用纯化的大鼠胃蛋白酶(Pepsin)

大鼠钙调磷酸酶(CaN)酶联免疫分析

大鼠钙调磷酸酶(CaN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中钙调磷酸酶(CaN)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠钙调磷酸酶(CaN)水平。用纯化的大鼠钙调磷酸酶(CaN)抗体包被微孔板,制成固相抗体,

多反转录酶的多种酶活性的介绍

  ①RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。  ②RNase

关于血清酶及同工酶检查的介绍

  肝脏是人体含酶最丰富的器官,有数百种之多,而常用于临床诊断的不过10余种。如有些酶存在于肝细胞内,当肝脏损伤时,酶释放入血,使血清中这些酶活力增加,如丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、醛缩酶、乳酸脱氢酶(LDH)。有些酶是肝细胞合成,当肝病时,这些酶活性降低,如凝血酶。

单胺氧化酶同工酶临床意义

  (1)MAOⅠ升高:肝硬化、慢性肝病。  (2)MAOⅡ升高:重症肝炎、重症肝病。  (3)MAOⅢ升高:肝硬化。

酶免疫技术对酶的要求是什么?

  酶的要求:一个酶蛋白分子每分钟可催化103~104个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合:  1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。  2.易与抗体或抗原偶联,标记后酶活性保持稳定,且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。  3.作用专一性强,酶活性不受样品中其他成分的影响,受检组织或

蛋白酶的按蛋白酶作用分类

按蛋白酶作用的最适 pH 可以分为 pH2.5-5.0 的酸性蛋白酶、pH9.5-10.5 的碱性蛋白酶、pH7-8 的中性蛋白酶。根据蛋白酶的活性中心和最适反应 pH 可以分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和活性中心有两个羧基的酸性蛋白酶。

乳酸脱氢酶同工酶临床意义

  (1)、乳酸脱氢酶同工酶结果要与临床症状结合才能做出准确判断。  (2)、LDH1和LDH2升高,且LDH1/LDH2>1见于:急性心肌梗死、溶血性贫血、急性镰刀型红细胞贫血、巨幼红细胞贫血等恶性贫血。急性肾皮质坏死及各种血管内外溶血症(若无LDH1升高,可排除溶血性贫血)。  (3)、LDH5

人凝血酶(Thrombin)酶联免疫分析(ELISA)

人凝血酶(Thrombin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,组织及相关液体样本中凝血酶(Thrombin)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人凝血酶(Thrombin)水平。用纯化的人凝血酶(Thromb

酶浓度对酶促反应速度的影响

  从米门公式和酶浓度与酶促反应速度的关系图解可以看出[1]:酶促反应速度与酶分子的浓度成正比。当底物分子浓度足够时,酶分子越多,底物转化的速度越快。但事实上,当酶浓度很高时,并不保持这种关系,曲线逐渐趋向平缓。根据分析,这可能是高浓度的底物夹带有许多的抑制剂所致。

昆虫乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析

昆虫乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定昆虫血清,血浆及相关液体样本中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫乳酸脱氢酶(LDH)水平。用纯化的昆虫乳酸脱氢酶(LDH)抗体包被微孔板,制成固相

胰蛋白酶及其系列酶的制备方法

 酶是细胞产生的以蛋白质为主要成分的生物催化剂,与化学催化剂相比较,具有作用条件温和、反应专一性强、反应副产物少等优点,因而广泛应用于医药、化工、食品、日化、农业、饲料、环保等领域,应用种类及用量均逐年递增。例如蛋白酶,应用于医药工业中,作为生化药物促进食物蛋白质消化;应用在食品工业中,水解蛋白质成

人端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)

人端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中端粒酶(TE)的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人端粒酶(TE)水平。用纯化的人端粒酶(TE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微

山羊端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)

山羊端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定山羊血清,血浆及相关液体样本中端粒酶(TE)的活性。 上海裕平生物科技公司高品质ELISA试剂盒供应商,品质卓越,价格实惠,售后完善,并提供免费代检测服务。咨询热线:021-60545848-5512

T4DNA聚合酶的酶活性

⑴5′→3′的聚合酶活性⑵3 ′→ 5 ′的核酸外切酶活性。其外切酶活性要比大肠杆菌聚合酶 I 的活性高200倍。比Klenow 片段酶强100~1,000倍。因此,可以综合利用这两种活性进行取代合成反应:如果反应体系中仅存在一种dNTP或没有底物时,这时T4DNA聚合酶就会表现出3 ′→ 5 ′外

​酶的纯化与酶的固定化技术介绍

酶的纯化酶的纯化属于一种后处理工艺,包括粗制工艺与精制工艺,对超酶液进行浓缩精制是生产高质量酶制剂的重要环节。其提纯手段一般是依据酶的分析大小、形状、电荷性质、溶解度、专一结合位点等性质而建立。要得到纯酶,一般需要将各种方法联合使用。最常用的纯化方法有根据溶解度特性的沉淀法;根据电荷极性的离子交换层

豆粕中尿素酶活性的测定_尿素酶解法

将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合,在30℃保持30min后,尿素酶催化尿素水解产生氨的反应。用过量的盐酸溶液中和所产生的氨,再用氢氧化标准溶液回滴。实验材料大豆试剂、试剂盒尿素缓冲溶液盐酸氢氧化钠蒸馏水仪器、耗材样品筛酸度计恒温水浴锅试管精密计时器粉碎机分析天平移液管一、实验目的掌握测定尿素酶

生物酶学基础脂肪酶的来源

脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中。植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子,如蓖麻籽、油菜籽,当油料种子发芽时,脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类,提供种子生根发芽所必需的养料和能量;动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织,在肠液中含有少量的脂肪酶,用于补充胰脂肪酶对脂

什么是同工酶?同工酶的作用

同工酶(isozyme,isoenzyme)广义是指生物体内催化相同反应而分子结构不同的酶。按照国际生化联合会(IUB)所属生化命名委员会的建议,则只把其中因编码基因不同而产生的多种分子结构的酶称为同工酶。最典型的同工酶是乳酸脱氢酶(LDH)同工酶。 同工酶的基因先转录成同工酶的信使核糖核酸,后者再