关于分泌蛋白的修饰加工糖基化的介绍
这些修饰包括糖基化、羟基化、酰基化(酰化)、二硫键形成等,其中最主要的是糖基化,几乎所有内质网上合成的蛋白质最终被糖基化。糖基化的作用是: ①使蛋白质能够抵抗消化酶的作用; ②赋予蛋白质传导信号的功能; ③某些蛋白只有在糖基化之后才能正确折叠。 糖基化有两种类型: (1)糖蛋白是由寡糖连接在Asp的氨基的形成的,连接的链叫N-糖苷键。 (2)寡糖连接在Ser、Thr或羟基-lys的羟基上(O-糖苷键)。N-糖苷键是在ER开始,而在高尔基体中进一步完成;O-糖苷键的形成仅发生在高尔基体中。 N-糖基化可分为3步,各种N-连接的寡糖都是在ER中开始加上的,途径也相同。一个寡糖含有2个N-乙酰-糖胺,9个苷露糖和3个葡萄糖,在一种特异的脂一多萜醇上形成,多萜醇磷酸酯即是携带糖的载体。多萜醇是一种高度疏水的酯,位于ER膜中,其活性基团面向着ER腔,寡糖是由单个的糖连接而构成,它通过焦磷酸和多萜醇连接。寡糖作为一个单位在......阅读全文
ADP核糖基化因子的功能介绍
中文名称ADP-核糖基化因子英文名称ADP-ribosylation factor;ARF定 义一类在真核细胞中广泛存在的高丰度N-豆蔻酰化的单体GTP结合蛋白。可激活ADP-核糖基化转移酶,介导网格蛋白和COPⅠ有被小泡与高尔基体膜的结合。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生理(二级学科)
单抗糖基化调控之控制参数篇(上)
关键质量参数是单抗仿制药研发的标杆,包括糖基化修饰、聚体、电荷异质性等,其中如糖基化修饰对单抗的生物活性、免疫原性、药物代谢动力学、构象、稳定性及溶解度具有重要的影响。细胞培养过程中细胞所处环境,如pH、温度、渗透压、溶氧等参数会影响到单抗糖基化表现,本文就文献中对渗透压、培养时间和溶氧等培养
为何要关注抗体药物的糖基化修饰?
在众多的蛋白质翻译后修饰中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,也是评价抗体的关键质量属性之一。单抗药物功能的实现与其糖基化修饰密切相关,糖基化修饰会影响蛋白的性能,如构象、稳定性、溶解度、药物代谢动力学、活性及免疫原性。本文中,笔者就糖基化及其对抗体药物的稳定性/半衰期、安全性及生物活性进
研究抗体药物的糖基化修饰为何重要?
在众多的蛋白质翻译后修饰中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,也是评价抗体的关键质量属性之一。单抗药物功能的实现与其糖基化修饰密切相关,糖基化修饰会影响蛋白的性能,如构象、稳定性、溶解度、药物代谢动力学、活性及免疫原性。本文中,笔者就糖基化及其对抗体药物的稳定性/半衰期、安全性及生物活性进行
蛋白质糖基化位点检测实验步骤
用酶或化学脱糖基化、通过选择性标记或通过凝集素亲和层析法是检测蛋白糖基化常用方法。 一、用 PNGaseF(N-多糖酶)处理。 1. 以 0.1 mol/L 磷酸钠(或 Tris-HCl,而不用柠檬酸)缓冲液,pH 7.4 ( 7.0~8.0 ) 配制高达 2 mg/ml 的蛋白溶液,并含 5
大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA检测法
大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 AGEs 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 AGEs与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠AGEs,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧
O连接的糖基化的基本概念
O-连接的糖基化是将糖链转移到多肽链的丝氨酸、苏氨酸或羟赖氨酸的羟基的氧原子上。O-连接的糖基化是由不同的糖基转移酶催化的, 每次加上一个单糖。同复杂的N-连接的糖基化一样, 最后一步是加上唾液酸残基,这一反应发生在高尔基体反面膜囊和TGN中。
高尔基体蛋白质糖基化的介绍
N-连接的糖链合成起始于内质网,完成于高尔基体。在内质网形成的糖蛋白具有相似的糖链,由Cis面进入高尔基体后,在各膜囊之间的转运过程中,发生了一系列有序的加工和修饰,原来糖链中的大部分甘露糖被切除,但又被多种糖基转移酶依次加上了不同类型的糖分子,形成了结构各异的寡糖链。糖蛋白的空间结构决定了它可
【干货分享】四大类糖基化修饰
相对于磷酸化、乙酰化修饰等相对较为简单的PTM来讲,糖基化修饰稍显复杂和多样,各位看官对糖基化修饰的知识了解多少呢?是否又对O糖、N糖傻傻分不清楚呢?没关系,今天小编带您一起走进糖的世界,一起揭开糖基化修饰的神秘面纱。 糖基化修饰主要发生在内质网和高尔基体。主要过程是将糖基在糖基转移酶作用下将
关于分泌蛋白的修饰加工糖基化的介绍
这些修饰包括糖基化、羟基化、酰基化(酰化)、二硫键形成等,其中最主要的是糖基化,几乎所有内质网上合成的蛋白质最终被糖基化。糖基化的作用是: ①使蛋白质能够抵抗消化酶的作用; ②赋予蛋白质传导信号的功能; ③某些蛋白只有在糖基化之后才能正确折叠。 糖基化有两种类型: (1)糖蛋白是由寡糖
高尔基复合体的蛋白质糖基化
N-连接的糖链合成起始于内质网,完成于高尔基体。在内质网形成的糖蛋白具有相似的糖链,由Cis面进入高尔基体后,在各膜囊之间的转运过程中,发生了一系列有序的加工和修饰,原来糖链中的大部分甘露糖被切除,但又被多种糖基转移酶依次加上了不同类型的糖分子,形成了结构各异的寡糖链。糖蛋白的空间结构决定了它可
大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)酶联免疫分析
大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中晚期糖基化终末产物(AGEs)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)水平。用纯化的大鼠晚期糖基化终末
大鼠晚期糖基化终末产物受体(AGER)ELISA检测法
大鼠晚期糖基化终末产物受体(AGER)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 AGER 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 AGER与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠AGER,形成免疫复合物连接在板上,辣根
耶鲁大学开发出糖基化的新方法
许多治疗药物和生化探针的生产都离不开糖基化的过程,也就是在蛋白质或脂类上面附加糖类的过程。不过,此过程具有高度特异性,因此这些化合物的大规模生产相当困难。 耶鲁大学的研究人员近日在《Nature Chemistry》上发表了一篇题为“Rapid phenolic O-glycosylation
关于糖基化血红蛋白的研究背景介绍
1958年,Huisman 和 Meyering用色谱柱首次将糖基化血红蛋白与其它形式的血红蛋白分离开来。1968年Bookchin 和 Gallop,首次描绘了糖蛋白的特性。1969年,Samuel Rahbar和他的同事首次在糖尿病人中现发糖基化血红蛋白增加。1975年,Bunn和他的同事描
人晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒
人晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 AGEs 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 AGEs与单抗结合,加入生物素化的抗人AGEs,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶
新技术-|-可识别特定糖基化的新工具EXoO
约翰霍普金斯大学医学院的研究人员开发出一种他们称为EXoO的新分子工具,它可以解码蛋白质上的特定的糖的附着位点,而这种改变可能是由疾病导致的。该研究发表在Molecular systems Biology(《分子系统生物学》)上,介绍了该工具的开发过程及其在人体血液、肿瘤和免疫细胞上的成功应用。
Cell:不同生物的N糖基化修饰途径
蛋白质翻译后修饰是指蛋白质在翻译后的化学修饰,它包含磷酸化、乙酰化、泛素化和甲基化等类型, 在调节蛋白质活性、结构和功能等方面发挥着重要的作用, 其重要性已被人们广泛认知。 随着许多新的翻译后修饰类型的出现, 蛋白质翻译后修饰这一研究领域变得越来越复杂而有趣。其中糖类的翻译后修饰能帮助蛋白定位
植物蛋白质组学和糖基化(二)
4. 注释( 1 ) 每个实验均使用新鲜的 3 mol/L 甲醇- HCl 和硅烷化试剂。( 2 ) 要仔细识别蛋白质印迹,因为 WGA 既能识别 N-糖苷的 GlcNAc,也能识别 O-GlcNAc。( 3 ) 用于在硝酸纤维素印迹膜上封闭结合位点的溶液应避免糖蛋白污染。所以我们建议在这一步骤中使
植物蛋白质组学和糖基化(一)
1. 前言与其他真核细胞一样,植物细胞中,糖基化通常发生在分泌蛋白质上,虽然在细胞质蛋白和核蛋白上也发现一些糖基化反应。根据寡糖部分和蛋白质骨架之间的连接方式,可将糖基化分为两种类型:N -糖基化和 O-糖基化。植物中 N-糖基化研究最多。1.1 N-糖基化与其他真核细胞一样,在植物细胞中,N-糖
陆豪杰:蛋白质糖基化的质谱解析
分析测试百科网讯 2020年9月14日,由中国质谱学会(中国物理学会质谱分会)主办,分析测试百科网和中国质谱学会网承办的2020年中国质谱学会质谱网络研讨会(2020 CMSS)正式开幕。本届质谱网络研讨会正值中国质谱学会成立40周年,按报告内容涉及领域包括生命科学与组学、药物药理毒理分析、元素
植物蛋白质组学和糖基化实验
实验材料链霉亲和素-过氧化物酶 牛胰核糖核酸酶 B
人糖基化终末产物-(AGE)酶联免疫分析(ELISA)
人糖基化终末产物 (AGE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中糖基化终末产物 (AGE)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人糖基化终末产物 (AGE)水平。用纯化的人糖基化终末产物 (A
高糖饮食新罪证!糖基化竟加速老年痴呆
近日,一个来自英国巴斯大学的科学家团队报道发现和建立了血糖与阿尔茨海默症之间的“临界点”分子连接。他们已经表明,过量的血液葡萄糖水平会对一种与早期阿尔茨海默症炎症反应密切相关的酶造成一定损害。 该研究对应的文章发表于最新上线的Scientific Reports杂志。 众所周知,高血糖是糖尿
人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)ELISA试剂盒
人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 RAGE 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 RAGE与单抗结合,加入生物素化的抗人RAGE,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化
植物蛋白质组学和糖基化实验(五)
1. 含高甘露糖型 N-糖苷糖蛋白的鉴定本方法是我们实验室以油菜籽为实验材料建立的,本方法也适用于其他植物材料。( 1 ) 将 6 g 植物材料放入 4°C 预冷的研钵中,加入 50 ml 预冷的 TBS 缓冲液,研磨萃取蛋白质(见注释 13),接着 10000 g 离心萃取物 30 min,去
关于糖基化血红蛋白的基本信息介绍
糖基化血红蛋白,英文名为Glycosylated hemoglobin or glycated hemoglobin(GHb),是血红蛋白的一种形式,用于反映一段时间(4~8周)前的平均血浆葡萄糖浓度。因其中以HA1c含量最多,故有时被缩写成A1C作其代名词,糖基化血红蛋白以非酶糖化形成。血红蛋
蛋白质和脂质,RNA都可以糖基化
众所周知,糖基化是在各种酶的作用下将糖添加到蛋白质或脂质中的过程。这个过程开始于内质网,结束于高尔基体。例如,糖在糖基转移酶的作用下转移到蛋白质上,与蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键,最终形成糖蛋白。最近,一项名为“Small RNAs are modified with N-glycans an
大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 AGEs 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 AGEs与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠AGEs,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测
先天性糖蛋白糖基化缺陷导致的疾病
先天性糖蛋白糖基化缺陷(congenital disorders of glycosylation, CDG)是一组由常染色体隐性遗传引起的糖蛋白合成缺陷而导致的疾病,可引起一系 列临床表现[1]。糖蛋白的蛋白糖基化修饰是一个极 其复杂的过程,参与其中的酶种类繁多。糖蛋白糖 基化缺陷可累及多个脏