荧光素在药物研发中的作用?
1. 药物标记和追踪 荧光素可以用来标记药物分子,帮助研究人员观察药物在生物体内的分布、代谢和排泄过程。例如,通过将荧光素与药物结合,可以直观地观察到药物在细胞或组织中的定位,以及随时间的动态变化。 2. 动力学研究 荧光素标记的药物可以帮助研究人员进行药物动力学研究,包括吸收、分布、代谢和排泄(ADME)。这些研究对于理解药物的生物可用性、作用时效和潜在的毒性至关重要。 3. 高通量筛选 在药物发现阶段,荧光素常用于高通量筛选(HTS)实验,以快速鉴定出对特定疾病靶标具有潜在治疗效果的化合物。荧光检测技术可以迅速读取荧光信号的变化,从而评估化合物的活性。 4. 作用机制研究 荧光素也被用于探究药物的作用机制。例如,通过观察荧光标记的药物与其靶标的相互作用,可以更深入地了解药物如何影响其靶标,以及这一过程如何最终影响疾病的进程。 5. 光学成像 在临床前研究中,荧光素可用于小动物光学成像,帮助研究人员在完整......阅读全文
什么是双荧光素酶
荧光素酶(Luciferase)是催化莹光素氧合而发光的蛋白酶即[让萤火虫尾部荧光素发出荧光的蛋白质]莹光素+ATP+O2-->氧合莹光素+AMP+PPi+荧光
荧光素的结构和种类
荧光素又名荧光黄、荧光生、荧光红。有两种变体:稳定的红色变体B及黄色变体A。分子式为C20H12O5,分子量为332.31。B为红色带绿色荧光的结晶粉末。熔点314~316*C(分解)。溶于热醇、热苯胺、热丙酮、热甲酸,稍溶于水、醇、醚、乙酸,不溶于石油醚。A为黄色无定形粉末熔点314~316℃。
二乙酸荧光素的用途
用途 FDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低,因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488 nm和530 nm。
什么是双荧光素酶
荧光素酶(Luciferase)是催化莹光素氧合而发光的蛋白酶即[让萤火虫尾部荧光素发出荧光的蛋白质]莹光素+ATP+O2-->氧合莹光素+AMP+PPi+荧光
角膜荧光素染色的概述
角膜荧光素染色法,是一种了解角膜上皮有无缺损及角膜混浊是否为溃疡等的检查方法,可用1%~ 2%荧光素钠滴于下穹窿结膜囊内,1~2分钟后观察,角膜上皮缺损的部位有黄绿着色。 亦作泪膜破裂时间 (BUT) 的测定。
异硫氰酸荧光素的性状
黄色粉末。有吸湿性。能与各种抗体蛋白结合,结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性,并在碱性溶液中仍有强烈绿色荧光,加酸后析出沉淀,荧光消失,微溶于丙酮、乙醚和石油醚。物理参数熔点:>360 °C
荧光素的合成方法
将间苯二酚加热至150℃,使之全部熔融,边搅拌边加入理论量的邻苯二甲酸酐,混匀并熔融后升温至185℃,保温半小时,然后慢慢加入适量新焙烧的无水氯化锌,当完全溶解后,逐渐升温至210~215℃,整个过程均需不停地搅拌,当反应液开始变稠时,停止搅拌,继续在此温度下加热至完全固化,研碎后得粉状粗品。将粉状
双荧光素luc不表达
双荧光素luc不表达有多种原因,实验过程中的每一个步骤都可能导致双荧光素luc不表达。如果目的基因载体没有成功转移到受体细胞,或者受体细胞没有成活,以及实验过程中出现其他物质抑制了双荧光素luc的表达等等,都有可能导致双荧光素luc不表达。基于荧光素酶(Luciferase)的发光原理,形成了双荧光
荧光素的合成方法
将间苯二酚加热至150℃,使之全部熔融,边搅拌边加入理论量的邻苯二甲酸酐,混匀并熔融后升温至185℃,保温半小时,然后慢慢加入适量新焙烧的无水氯化锌,当完全溶解后,逐渐升温至210~215℃,整个过程均需不停地搅拌,当反应液开始变稠时,停止搅拌,继续在此温度下加热至完全固化,研碎后得粉状粗品。将粉状
荧光素钠的检查方法
碱度取本品0.20g,加水10ml使溶解,依法测定(通则0631),pH值应为7.0~9.0有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定溶剂乙腈水(15:85)。供试品溶液取本品适量,精密称定,加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置200m量瓶中,
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
异硫氰酸荧光素的概念
异硫氰酸荧光橙红,异硫氰酸荧光黄,异硫氰酸荧光红,异硫氰酸荧光素异构体I,5-异硫氰酸荧光素。其形态为黄色粉末,有吸湿性,是一种生化试剂,也是医学诊断药物,可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。并且它能与各种抗体蛋白结合,结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性,并在碱性溶液中仍有强烈绿色
荧光素钠的含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品约25mg,精密称定,置50m1量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取荧光素钠对照品约25mg,精密称定,置5oml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置00ml
荧光素酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 荧光素 4-单氧酶(ATP-水解)提取于萤火虫,Photinus Pyralis。荧光素+ATP+O2→氧和虫荧光素+PPi+H2O+
荧光素酶检测(Luciferase-assay)
Introduction Luciferase can be used as a reporter gene to measure the activity of promoters, and/or the transfection efficiency. Aims You will be prov
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
荧光素的定义和特征
荧光素又名荧光黄、荧光生、荧光红。有两种变体:稳定的红色变体B及黄色变体A。分子式为C20H12O5,分子量为332.31。B为红色带绿色荧光的结晶粉末。熔点314~316*C(分解)。溶于热醇、热苯胺、热丙酮、热甲酸,稍溶于水、醇、醚、乙酸,不溶于石油醚。A为黄色无定形粉末熔点314~316℃。溶
什么是双荧光素酶
荧光素酶(Luciferase)是催化莹光素氧合而发光的蛋白酶即[让萤火虫尾部荧光素发出荧光的蛋白质]莹光素+ATP+O2-->氧合莹光素+AMP+PPi+荧光
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
双荧光素luc不表达
双荧光素luc不表达有多种原因,实验过程中的每一个步骤都可能导致双荧光素luc不表达。如果目的基因载体没有成功转移到受体细胞,或者受体细胞没有成活,以及实验过程中出现其他物质抑制了双荧光素luc的表达等等,都有可能导致双荧光素luc不表达。基于荧光素酶(Luciferase)的发光原理,形成了双荧光
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
荧光素酶的测定实验
实验方法原理荧光素 4-单氧酶(ATP-水解)提取于萤火虫,Photinus Pyralis。荧光素+ATP+O2→氧和虫荧光素+PPi+H2O+光光密度 I 是和 Michaelis-Menten 等式相关的式中,H 是 Planck 常量;v 是发射光的频率。当 ATP 浓度非常低([ATP]<
荧光素酶互补(Luc)实验
【导入】基于荧光素酶(Luciferase)的发光原理,形成了双荧光素酶报告基因检测系统。该系统包括萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)和海参荧光素酶(Renilla luciferase)。两者可与各自的底物发生氧化作用产生生物荧光,产生的荧光值即表示两种酶的表达量多少。图片来源
D荧光素钾盐及D荧光素使用中的常见问题
1、D-荧光素适合做哪些实验? D-荧光素钾盐和5-氟-荧光素,作为Luciferase的作用底物,常用于以下实验:报告基因分析2. In vivo imaging (动物活体成像)3. In vitro imaging (细胞体外分析)4. ATP测定5. 其它luciferase及其基因相关的分
关于荧光素免疫荧光层析技术的简介
荧光素是指具有荧光特性的有机染料。1942年Coons等首次报道了异氰酸荧光素标记抗体用于检测鼠组织切片中肺炎球菌抗原分布的研究,由此出了免疫荧光技术。后来,为了改进异氰酸荧光素的性能,Ruggas等合成了性质稳定、毒性较低的异硫氰酸荧光素。自Marshall等改良了荧光抗体标记技术后,荧光免疫
免疫荧光技术的常见荧光素的特性介绍
常见荧光素的特性1)FITC:黄色结晶粉末,吸收光:490~495nm,发射光:520~530nm,明亮的黄绿色荧光。2)RB200:橘红色粉末,吸收光570nm,发射光595~600nm,橘红色荧光。3)TRITC:紫红色粉末,吸收550nm,发射光620nm,橙红色荧光。4)镧系:Eu、Tb5)
分子荧光光度法测定二氯荧光素
分子荧光光度法测定二氯荧光素实验实验中修改部分一、实验目的:1、(书) 2、掌握荧光分光光度计的结构及基本使用方法 3、熟悉荧光分光光度计的应用二、方法原理:(书)三、仪器和试剂:仪器:Cary/Eclipse荧光分光光度计。该仪器使用氙弧灯作为激发光源。在190
荧光素酶和腔肠素Coelenterazine的选择及使用
荧光素酶 自然界中的荧光素酶:是自然界中能够产生荧光的酶的系统,如发光真菌,发光海星,发光鱼,发光节虫,发光甲虫等。 萤火虫荧光素酶:目前常用的萤火虫荧光素酶来源于北美萤火虫(Photinus pyralis),是一个61KDa的单体酶,无需表达后修饰,直接具有完全酶活性,反应需要底物荧光素以及
异硫氰酸荧光素的功能介绍
异硫氰酸荧光橙红,异硫氰酸荧光黄,异硫氰酸荧光红,异硫氰酸荧光素异构体I,5-异硫氰酸荧光素。其形态为黄色粉末,有吸湿性,是一种生化试剂,也是医学诊断药物,可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。