影响有机溶剂沉淀法的因素分析
(一) 有机溶剂沉淀法的因素— 有机溶剂的选择 在实际生产中,常用的有机溶剂有乙醇、丙酮、异丙醇、氯仿等。丙酮的介电常数小,沉淀能力强;而乙醇无毒,广泛应用于药品生产中。 (二) 有机溶剂沉淀法的因素— 温度的控制 有机溶剂沉淀时,温度是重要的控制指标。根据沉淀对象不同,采用的温度不同,为防止生物大分子在较高温度时发生变性,一般要求在低温下进行,同时还要考虑有机溶剂与水混合时的放热现象。 (三) 有机溶剂沉淀法的因素— pH值 等电点时,蛋白质的溶解度最低。在有机溶剂沉淀时,应选择pH值在等电点附近,但是pH值的控制还必须考虑目的药物的稳定性条件,一般生产中常用缓冲液来控制溶液的pH值。 (四) 有机溶剂沉淀法的因素— 离子强度 在有机溶剂和水的混合液中离子强度是一个特别重要的因素。因为盐在一定的浓度范围内能增加蛋白质或酶在有机溶剂中的溶解度,使有机溶剂沉淀收......阅读全文
放射免疫沉淀法的方法特点
中文名称放射免疫沉淀法英文名称radioimmunoprecipitation定 义以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
放射免疫沉淀法的技术特点
中文名称放射免疫沉淀法英文名称radioimmunoprecipitation定 义以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
聚丙烯酸沉淀法制备溶菌酶的介绍
聚丙烯酸沉淀法为将提取过滤后含酶洗脱液,首先经过吸附步骤,即将过滤后的澄清溶液用20%的NaOH溶液调pH至6.0,在调pH值的过程中不停的搅拌。有少量的乳白色沉淀析出,然后加入15%聚丙烯酸,立即有白色沉淀析出,加至pH值为3.0为止,静置17个小时进行静析,得到粘附于底部的乳白色胶状物。第二
无水乙醇沉淀法提取脑磷脂的方法介绍
无水乙醇沉淀经丙酮萃洗后的精制磷脂,主要由卵磷脂、脑磷脂和肌醇磷脂三大部分组成。由于卵磷脂在脂肪醇中的溶解度比脑磷脂和肌醇磷脂高,可以通过脂肪醇的多次萃洗使卵磷脂富集于醇溶剂中,而脑磷脂和肌醇磷脂则留在滤饼中。准确称取一定量大豆精制磷脂,置于三口烧瓶中,加入一定比例无水乙醇,开动搅拌器,控制在所需萃
聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA实验
实验方法原理 这种方法最早由 Richaed Treisman ( 英国,伦敦,ICRF) 参照 Lis 的工作而设计。Lis 是最早用聚乙二醇(PEG ) 分离不同大小 DNA 的人。Treisman 法被广泛用于碱裂解法制备的质粒 DNA
聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA实验
这种方法最早由 Richaed Treisman ( 英国,伦敦,ICRF) 参照 Lis 的工作而设计。Lis 是最早用聚乙二醇(PEG ) 分离不同大小 DNA 的人。Treisman 法被广泛用于碱裂解法制备的质粒 DNA 的纯化。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理这
关于四氧化三铁的超声沉淀法介绍
超声能在溶剂中产生空化效应,产生的空化气泡在10~11秒的极短时间内塌陷,泡内产生5000K左右的高温。该系列空化作用与传统搅拌技术相比更容易实现介观均匀混合,消除局部浓度不均,提高反应速度,刺激新相的形成,而且对团聚还可以起到剪切作用,有利于微小颗粒的形成。超声波技术的应用对体系的性质没有特殊
关于化学沉淀法的应用和常用方法介绍
应用 化学沉淀法经常用于处理含有汞、铅、铜、锌、六价铬、硫、氰、氟、砷等有毒化合物的废水。利用向废水中投加氢氧化物、硫化物、碳酸盐、卤化物等生成金属盐沉淀可以去除废水中的金属离子,向废水中投加钡盐可用于处理含六价铬的工业废水生成铬酸盐沉淀,向废水中投加石灰生成氟化钙沉淀可以去除水中的氟化物。
酪蛋白的制备实验_等电点沉淀法
实验方法原理牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调到4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。实验材料牛乳试剂、试剂盒乙醇 无水乙醚 醋酸 醋酸钠 乙醇 乙醚仪
聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA实验
实验方法原理 这种方法最早由 Richaed Treisman ( 英国,伦敦,ICRF) 参照 Lis 的工作而设计。Lis 是最早用聚乙二醇(PEG ) 分离不同大小 DNA 的人。Treisman 法被广泛用于碱裂解法制备的质粒 DNA 的纯化。实验材料 粗制质粒试剂、试剂盒 氯仿乙醇异丙醇L
含镍废水处理之化学沉淀法
治理含镍废水可以用化学沉淀法,化学沉淀法它是往水中加入化学药剂,使其中重金从可溶性化合物生成不溶性化合物继而淀分离的一种方法,这种方法是用碳酸钠或氢氧化钠溶液等将废水中的镍离子沉淀出来,反应如下: 2NiSO4Na2CO32H2O===Ni(OH)·NiCO32NaHSO4 为了便于液固分离
染色质免疫沉淀法(Chromatin-immunoprecitation,ChIP)
染色质免疫沉淀法(Chromatin immunoprecitation,ChIP)是研究体内DNA与蛋白质相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA片段的结合情况,还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰,如乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等,这些
四氧化三铁共沉淀法的反应原理
共沉淀法在含有多种阳离子的溶液中加入沉淀剂,让所有离子完全沉淀。为了获得均匀的沉淀,通常将含有多种阳离子的盐溶液慢慢加入到过量的沉淀剂中进行搅拌,使所有离子的浓度大大超过沉淀的平衡浓度,尽量使各组分按比例同时析出来。 其原理是Fe2++2Fe3++8OH-→Fe3O4+4H2O。 沉淀法制备
有机溶剂沉淀法浓缩蛋白质实验
有机溶剂沉淀法 实验方法原理 将有机溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白质溶液时,和高浓度盐类似产生沉淀,这是因为它们能够降低蛋白质的溶解度。在温度为 10 ℃ 左
关于化学沉淀法的注意事项的介绍
(1)增加沉淀剂的使用量,可以提高废水中离子的去除率,但沉淀剂的用量也不宜加得过多,否则会导致相反的作用,一般不要超过理论用量的20%~50%。 (2)采用化学沉淀法处理工业废水时,产生的沉淀物一般不会形成带电荷的胶体,因此沉淀过程会变得简单,采用普通的平流式沉淀或竖流式沉淀即可,而且停留时间
有机溶剂沉淀法浓缩蛋白质实验
实验方法原理 将有机溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白质溶液时,和高浓度盐类似产生沉淀,这是因为它们能够降低蛋白质的溶解度。在温度为 10 ℃ 左右时蛋白质在有机溶剂中容易变性,所以在沉淀时必须特别注意冷却溶液和离心转头(0 ℃~4 ℃ 为佳),建议离子强度为 0.05~0.2 mol/L。有机溶剂
磷酸钙沉淀法的方法和应该特点
磷酸钙-DNA 共沉淀法(calcium phosphate-DNA coprecipitation),简称磷酸沉淀法,能把外源基因与入噬菌体DNA 的重组子导人大肠杆菌和哺乳动物细胞。磷酸钙沉淀法因为试剂易取得、价格便宜而被广泛用于瞬时转染和稳定转染的研究,先将DNA和CaCl2混合,然后加入到P
关于染色质免疫沉淀法的基本介绍
染色质免疫沉淀法(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)是研究体内DNA与蛋白质相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA片段的结合情况,还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。 核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰,如乙酰化、甲基化、磷酸化、泛
制造固体催化剂的方法之一沉淀法
precipitation: 制造固体催化剂的方法之一,即将金属盐水溶液和沉淀剂分别加入搅拌罐中,生成固体沉淀的方法。生成的沉淀须经洗涤、过滤、干燥、煅烧才能制得成品。有将沉淀剂加到金属盐溶液的正加法,及与此相反的倒加法。选择不同的盐和沉淀剂,可以制得不同的催化剂前驱。为了使沉淀均匀,陆续发展了
IgG的分离与提纯:硫酸铵沉淀法
以抗原免疫动物来制备的抗血清是一个非常复杂的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特异性结合的抗体则主要是血清中的免疫球蛋白组分。通常用于制备酶标抗体或荧光抗体的免疫球蛋白必须高度纯化并具有特异性,不应含有非抗体的血清蛋白。因此,为了浓缩和提高抗体的效价,或为制备免疫球蛋白特异性抗体时,通常也需要分
关于分步沉淀法铜和镍的分离的介绍
除铁后液中还含有大量的铜和镍,根据镍和铜溶度积的不同,可先对铜进行分离.但在实践过程中,要想完全分离两种金属离子却很难。若将铜完全沉淀,则有大量的镍也沉淀出来,将会大大地降低碳酸铜的纯度;而要想将镍尽量少地沉淀到碳酸铜中,溶液中的铜又不能完全沉下来.通过多年的实践,根据现场实际灵活调整操作。
关于染色质免疫沉淀法改变分析介绍
是研究转录调控蛋白和相应核苷酸序列结合的常用方法,但是由于许多转录调控蛋白有相似或相同的DNA结合位点,这种体外分析获取的结果不一定能真实地反映体内转录调控蛋白和DNA结合的状况。染色质免疫沉淀分析(ChIP)是基于体内分析发展起来的方法,它能真实、完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是确定
纳米氧化铝的制备方法沉淀法的介绍
沉淀法是向含有一种或者多种离子的金属盐溶液中加入合适的沉淀剂,与金属阳离子生成不可溶性的氢氧化物、水合氧化物或者是盐类等,然后经过过滤、洗涤等过程除去杂质及其多余的离子,进而经过干燥、热分解等过程既可以得到纳米粒子。 直接沉淀法是向通过添加适当的沉淀剂直接和金属盐溶液发生反应产生沉淀,沉淀经过
聚乙二醇沉淀法浓缩蛋白质实验
聚乙二醇法 实验方法原理 聚乙二醇(PEG)是一个非离子水溶性多聚体,使用 PEG 沉淀蛋甶质时,只在个别浓度下才使蛋白质稍有变性。由于 PEG 溶解时散
沉淀法制备脂肪酸直链淀粉的试验研究
直链淀粉的单螺旋链结构内腔疏水而外侧亲水,与环糊精的结构类似,因此能够作为一种主体分子,通过疏水相互作用与不同的疏水性客体分子形成包结络合物。 脂质能靠疏水间相互作用进入淀粉螺旋结构内部,并最终形成稳定淀粉-脂质复合物。在食品中,这些现象也是常见的。 面粉中天然存在直链淀粉-脂类包结络合物
沉淀法和粉浆法制造真空电子器件
沉淀法 黑白显像管、示波管常用沉淀法涂屏。先将玻屏清洗干净,注入含硅酸钾的工作液,再注入含荧光质的悬浮液。经过一定时间的静置沉淀后倒出残液,通入60左右的热空气流,同时用红外灯或热空气均匀地从外部加热,使之干燥。在400~450下焙烧,以去除涂敷过程中引入的有机杂质。 粉浆法 彩色显像管荧
硫酸铵沉淀法浓缩蛋白质实验
硫酸铵沉淀法 实验方法原理 当高浓度盐存在时,蛋白质往往凝聚并析出沉淀。这一技术称为「盐析」。不同的蛋白质在不同浓度的盐中形成沉淀,所以盐析常用于蛋白质的分离
IgG的分离与提纯:硫酸铵沉淀法
以抗原免疫动物来制备的抗血清是一个非常复杂的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特异性结合的抗体则主要是血清中的免疫球蛋白组分。通常用于制备酶标抗体或荧光抗体的免疫球蛋白必须高度纯化并具有特异性,不应含有非抗体的血清蛋白。因此,为了浓缩和提高抗体的效价,或为制备免疫球蛋白特异性抗体时,通常也需要分
聚乙二醇沉淀法浓缩蛋白质实验
实验方法原理 聚乙二醇(PEG)是一个非离子水溶性多聚体,使用 PEG 沉淀蛋甶质时,只在个别浓度下才使蛋白质稍有变性。由于 PEG 溶解时散热低,形成沉淀的子衡时间短等特点,使它在蛋白质的组分分离以及结晶中成为一个有用的试剂。通常 PEG 终浓度达 30% 时,蛋白质就能够达到最大量沉淀。
关于等电点沉淀法的注意事项介绍
1.不同的蛋白质,具有不同的等电点。在生产过程中应根据分离要求,除去目的产物之外的杂蛋白;若目的产物也是蛋白质,且等电点较高时,可先除去低于等电点的杂蛋白,如细胞色素C [1]的等电点为10.7,在细胞色素C的提取纯化过程中,调pH=6.0除去酸性蛋白,调pH=7.5~8.0,除去碱性蛋白。