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恒瑞医药5类靶向肿瘤新药获批临床新剂型推进

国家食药监总局(CFDA)网站信息显示,恒瑞医药在研5类新药盐酸伊立替康脂质体注射液申报临床的审评状态变更为制证完毕-已发批件。 伊立替康属于结肠癌治疗药物,原研厂家辉瑞全年收入约10亿美元,目前包括恒瑞医药在内,国内共3家伊立替康普通制剂的生产厂家。2012年恒瑞医药伊立替康实现销售收入3亿元,占比公司当年营业收入6%。 值得一提的是,和传统剂型相比脂质体剂型更为先进。公开资料显示,脂质体是一种人工膜,和普通剂型相比具有在生物体内可降解、无毒性和无免疫原性等特点,作为药物载体具有靶向性,能有效降低药物毒性和副作用。CFDA显示,目前国内伊立替康脂质体制剂生产企业尚处空白,除恒瑞医药外另有两家企业正在开展研发。广发证券研报预计,盐酸伊立替康脂质体注射液市场容量将达5亿元。 ......阅读全文

脂质体学的最终边界:不饱和脂类异构物的深度分析

  脂质是重要的生物分子,参与了生物体中重要的生理功能,例如细胞讯息传递、能量平衡、脏器保护,并受到生物体新陈代谢所调控。生物体的脂肪代谢失衡,将会改变细胞环境,进而连结到疾病状态,例如癌症、阿兹海默症、心血管疾病等。脂质分子的种类多样,多数的脂类分子具有疏水性长碳链,其碳链上具有数目不等的不饱和碳

如何让药物“杀敌”更精准?

   “药到病除”,这是临床上我们对良药的最好评价。如果把“病灶”——靶组织、靶细胞比喻为“敌军”,那么药物分子就好比是“杀敌勇士”,只有让药物精准到达“病灶”,才能集中兵力杀敌。为实现这个目标,临床上依托药物递送系统,给药物配上“战车”。脂质体,就是“战车”的一种。  中科院上海药物所甘勇研究团队

方案27.12 脂质体介导的瞬时转染

方案27.12 脂质体介导的瞬时转染             实验材料 靶细胞 DN

细胞转染的常见问题及注意事项

细胞转染常见问题一、转染效率低影响转染效率因素很多,主要因素有细胞培养物、血清、载体构建、DNA质量以及转染技术等。1.没有使用优化条件:优化阳离子脂质体试剂和DNA的量。2.DNA-阳离子脂质体试剂复合物在存在血清条件下形成。3.存在抑制剂:不要在用于制备DNA-阳离子脂质体复合物的培养基中使用抗

顾臻《Angewandte Chemie》解析新的药物传递方法

  目前,北卡罗拉纳州立大学和北卡罗拉纳大学教堂山分校的生物医学工程研究人员,开发出一种新的抗癌药物传递方法,基本上可在药物触发其释放之前,将其传递癌细胞中。该方法可以比作具备一个抗癌炸弹,直到它们进入癌细胞才会引爆,在那里它们将结合摧毁细胞。  本文第一作者莫然(Ran Mo),博士毕业于中国药科

细胞生物学名词解释(五)

9. 带3蛋白(band 3 protein)与血型糖蛋白一样都是红细胞的膜蛋白,因其在PAGE电泳分部时位于第三条带而得名。带3蛋白在红细胞膜中含量很高,约为红细胞膜蛋白的25%。由于带3 蛋白具有阴离子转运功能,所以带3蛋白又被称为“阴离子通道”。带3蛋白是由两个相同的亚基组成的二聚体,

细胞转染实验介绍

一、实验目的学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。二、实验原理上图所示是脂质体介导转染的示意图,它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介

脂质体介导的瞬时转染

实验材料靶细胞DNA试剂、试剂盒阳离子脂质D-PBSA缓冲盐溶液NaCl0.25%胰蛋白酶仪器、耗材细胞培养基还原的血清培养基无血清培养基多孔培养板实验步骤A . 贴壁细胞的转染1. 将 1.3X105 个细胞/孔接种到 6 孔培养板,加 3 ml 培养基。2. 于 37°C 的 CO2&

脂质体介导的瞬时转染

            实验材料 靶细胞 DNA 试剂、试剂盒 阳离子脂质

脂质体介导的瞬时转染

实验材料 靶细胞DNA试剂、试剂盒 阳离子脂质D-PBSA缓冲盐溶液NaCl 0.25%胰蛋白酶仪器、耗材 细胞培养基还原的血清培养基无血清培养基多孔培养板实验步骤 A . 贴壁细胞的转染1. 将 1.3X105 个细胞/孔接种到 6 孔培养板,加 3 ml 培养基。2

纳米颗粒跟踪分析技术以及光散射技术在表征脂...(一)

纳米颗粒跟踪分析技术以及光散射技术在表征脂质体作为药物载体中的应用及效果作者Pauline Carnell马尔文仪器公司高级应用科学家Mike Kazsuba马尔文仪器公司技术支持经理马尔文仪器公司的高级应用科学家Pauline Carnell和技术支持经理Mike Kazsuba探讨了纳米颗粒跟踪

叔丁醇在冻干制剂中的应用研究(二)

■制备多种分散体系制备脂质体 以叔丁醇作为溶剂溶解磷脂,经冻干后得到结构疏松的磷脂固体,加入水可以迅速水化制成脂质体。这种方法类似薄膜分散法,可以制得粒径较大的微米级多室脂质体,这种脂质体制备工艺已经应用于试验和规模生产。最近,沈阳药科大学的科研人员发明了一种新的脂质体制备工艺,即将相变温度低的大豆

细胞转染的途径与方法

细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术,它是研究基因表达调控,突变分析等的常规工具。细胞转染分为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上。稳定转染是指DNA整合到宿主细胞的染色体中。细胞转染途径(一) 物理介导:

转染和转染效率测定步骤

LIPOFECTAMINE 2000转染试剂转染步骤此实验步骤设计用来进行24孔板贴壁细胞的瞬时或稳定转染,其为设计用来在生长培养基中直接加入复合物。1. 转染前一天,胰酶消化细胞并计数,细胞铺板,使其在转染日密度为90%。细胞铺板在0.5ml含血清,不含抗生素的正常生长的培养基中。2. 对于每孔细

深圳先进院在超声温控给药治疗研究中取得进展

  近日,中国科学院深圳先进技术研究院医工所超声研究团队在超声给药治疗研究领域取得新进展。团队设计实现了一种超声能量可调控的热敏载药脂质体,相关成果发表于药物控释领域专业期刊Journal of Controlled Release (2016,243:333-341)。  肿瘤热疗是将肿瘤加热到稍

真核转染

     一些真核蛋白在原核宿主细胞中的表达不但行之有效而且成本低廉,然而许多在细菌中合成的真核蛋白或因折叠方式不正确,或因折叠效率低下,结果使得蛋白活性低或无活性。不仅如此,真核生物蛋白的活性往往需要翻译后加工,例如二硫键的精确形成、糖基化、磷酸化、寡聚体的

脂质体介导的细胞转染实验

实验概要学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。实验原理外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂

基因转染和实验设计原则

磷酸钙-DNA共沉淀法核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA仅有1%~5%可以进入细胞核中,其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合,在细胞中进行稳定表达,基因转导的频率大约为10-4,这项

RNA干扰的详细实验步骤

步骤包括:(一)siRNA的设计1. 在设计RNAi实验时,可以先在以下网站进行目标序列的筛选:GenesilAmbion2. RNAi目标序列的选取原则:(1)从转录本(mRNA)的AUG起始密码开始,寻找“AA”二连序列,并记下其3'端的19个碱基序列,作为潜在的siRNA靶位点。有研究

RNA干扰实验技术介绍

  通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段,加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。证据表明;一个称为Dicer

脂质体转染的几个实验方法

实验概要本实验介绍了脂质体转染的几个方法。实验原理脂质体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1:1)。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高,优于磷酸钙法,比它高5-100倍,能把DNA和RNA转染到各种细胞。用LR进行转染时,首先

RNA干扰实验技术

实验概要本文介绍了RNA干扰的原理及基本实验方法,包括了siRNA的设计、siRNA的制备和siRNA的转染等方法,及RNA干扰实验中的注意事项。实验原理近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因

RNAi的实验原理与方法

近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。一、RNA

RNA干扰(RNAi)实验原理与方法(3)

3.DEAE-葡聚糖和polybrene带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体复合物和带负电的DNA分子使得DNA可以结合在细胞表面。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克将DNA复合体导入。两种试剂都已成功用于转染。DEAE-葡聚糖仅限于瞬时转染。4.机械法转染技术也包括使用机械的方法,

RNAi的实验原理和操作实用技术(3)

3.DEAE-葡聚糖和polybrene带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体复合物和带负电的DNA分子使得DNA可以结合在细胞表面。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克将DNA复合体导入。两种试剂都已成功用于转染。DEAE-葡聚糖仅限于瞬时转染。4.机械法转染技术也包括使用机械的方法,

siRNA的转染方法

将制备好的siRNA,siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞 中的方法主要有以下几种:1.磷酸钙共沉淀将氯化钙,RNA(或DNA )和磷酸缓冲液混合,沉淀形成包含DNA 且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA 复合物粘附到细胞 膜并通过胞饮进入目的细胞 的细胞 质。沉淀物的大小和质量对

RNA干扰实验技术介绍(二)

dsRNA消化法的主要优点在于可以跳过检测和筛选有效siRNA序列的步骤,为研究人员节省时间和金钱(注意:通常用RNAse III通常比用Dicer要便宜)。不过这种方法的缺点也很明显,就是有可能引发非特异的基因沉默,特别是同源或者是密切相关的基因。现在多数的研究显示 这种情况通常不会造成影

siRNA的转染

将制备好的siRNA,siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种: 1.磷酸钙共沉淀将氯化钙,RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合,沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转

RNAi实验原理与方法

RNAi实验原理与方法近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(

细胞转染原理及常见转染方法的比较(二)

线型PEI(Line PEI,LPEI)与其衍生物用作基因转染载体的研究比分枝状PEI(Branched PEI,BPEI)要早一些,过去的研究认为在不考虑具体条件,LPEI/DNA转染复合物的细胞毒性较低,有利于细胞定位,因此与BPEI相比应该转染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有