关于等电聚焦水平板电泳法的操作介绍

(1)制胶 取A液2.5ml,pH3~10的两性电解质(或其它pH范围的两性电解质)0.35ml,水1.25ml,50%甘油0.5ml,抽气5~10分钟,加B液25μl,N,N,N’,N’-四甲基乙二胺6μl,混匀后缓慢的注入水平模具内,室温下聚合。 (2)预电泳 将已聚合的聚丙烯酰胺凝胶放到冷却板上,其间涂以液体石蜡或煤油并避免气泡的产生。用正极液与负极液分别润湿正极与负极电极条,然后分别放于阳极与阴极上,将电极对准电极条中心,加盖,在恒压法下进行测定,在起始电压200V下预电泳30分钟。 (3)对照品溶液和供试品溶液的制备 将供试品对水透析(或用其它方法)脱盐,并将蛋白或多肽含量调节至0.5~5mg/ml(如供试品蛋白或多肽浓度太低,则需采用适当方法浓缩)。对照品溶液同供试品溶液制备。 (4)电泳 将加样滤纸条以一定间隔置于凝胶上,加入供试品、对照品及等电点标准溶液5~20μl。选择恒压方式进行电泳,起始电压为20......阅读全文

免疫电泳法的注意事项

不合宜人群:无特殊要求。  检查前禁忌:禁忌暴饮暴食,特别是辛辣食物。和禁忌剧烈运动。  检查时要求:空腹抽血检测。听从医生的要求。

毛细管电泳法的特点

1、电泳柱效更高,可达105m-1~106m-1,分离速度更快,在几十秒至几十分钟内即可完成一个试样的分析。2、溶剂和试样消耗极少,试样用量仅为纳升级。3、没有高压泵输液,因此仪器成本更低。4、通过改变操作模式和缓冲溶液的成分,毛细管电泳有很大的选择性,可以对性质不同的各种分离对象进行有效的分离。毛

IEF/SDSPAGE双向电泳法

1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了IEF/SD S-PAGE双向电泳。其中IEF电泳(管柱状)为第一向,SDS-PAGE为第二向(平板)。在进行第一向IEF电泳时,电泳体系中应加入高浓度尿素、适量非离子型去污剂NP-40。蛋白质样品中除含有这两种物质外

毛细管电泳法的特点

1、电泳柱效更高,可达105m-1~106m-1,分离速度更快,在几十秒至几十分钟内即可完成一个试样的分析。2、溶剂和试样消耗极少,试样用量仅为纳升级。3、没有高压泵输液,因此仪器成本更低。4、通过改变操作模式和缓冲溶液的成分,毛细管电泳有很大的选择性,可以对性质不同的各种分离对象进行有效的分离。

毛细管电泳法的缺点

  毛细管电泳的缺点是:  (1) 由于进样量少,因而制备能力差;  (2) 由于毛细管直径小,使光路太短,用一些检测方法(如紫外吸收光谱法)时,灵敏度较低;  (3) 电渗会因样品组成而变化,进而影响分离重现性。

SDS-PAGE电泳法的实验步骤

1、清洗玻璃板一只手扣紧玻璃板,另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲,再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。2、灌胶与上样(1)玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶(操作时要使两玻璃对齐,以免漏胶)。垂直电泳槽(2) 按前面方法配10%分离胶,加入TEMED后立即摇匀即可

毛细管电泳法和液相法的区别

  毛细管电泳又称高效毛细管电泳,是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。    高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进

甲醛变性凝胶电泳鉴定RNA实验_凝胶电泳法

本实验旨在学会甲醛变性凝胶电泳鉴定RNA 的方法。琼脂糖凝胶电泳作为鉴定大分子物质经常被使用, 但含有RNase 酶活性, 因此要使RNase 变性而不使RNA 变性的, 故采用甲醛变性凝胶电泳鉴定RNA。实验方法原理琼脂糖凝胶电泳作为鉴定大分子物质经常被使用, 但含有RNase 酶活性, 因此要使

电泳分析法琼脂糖凝胶电泳涉及的步骤

  为了制备凝胶,将琼脂糖粉与电泳缓冲液混合至所需浓度,并在微波炉中加热使其熔化。  琼脂糖凝胶浓度  所用琼脂糖的百分比取决于要分离的片段的大小。  琼脂糖的浓度是指琼脂糖相对于缓冲液体积的百分比(w / v),琼脂糖凝胶通常在0.2%至3%的范围内。  琼脂糖浓度越低,DNA片段迁移越快。  通

电泳分析法琼脂糖凝胶电泳的要求/仪器

  进行琼脂糖凝胶电泳所需的设备和用品相对简单,包括:电泳仪和电源  凝胶浇铸托盘,有各种尺寸,由紫外线透明塑料制成。在浇铸凝胶时,用胶带封闭托盘的开口端,然后在电泳之前将其除去。  样品梳子,将熔融的介质倒在梳子周围,以在凝胶中形成样品孔。  电泳缓冲液,通常是Tris-acetate-EDTA(

电泳分析法琼脂糖凝胶电泳的优缺点

  琼脂糖凝胶电泳的优点  对于大多数应用,仅需要单组分琼脂糖,不需要聚合催化剂。因此,琼脂糖凝胶制备简单,快速。  凝胶易于倒入,不会使样品变性。  样品也可以回收。  琼脂糖凝胶电泳的缺点  凝胶在电泳过程中会融化。  缓冲区可能耗尽。  不同形式的遗传物质可能以不可预测的形式运行。

彗星分析法(单细胞凝胶电泳分析法)

如果我们能阻止其中的任何一个步骤,癌细胞便无法形成。因此,探测致癌物质的技术与癌细胞的及时发现就显得尤其重要!然而截至目前为止,科学家们仍无法研究出一种简易基因测试法或综合的方法来检测出可能的致癌物。因此,致癌物对DNA的作用仍是癌症研究的一个重要课题。遗传毒物学为一专门研究化学及各类物质对人体遗传

彗星分析法[单细胞凝胶电泳分析法]

治愈癌症(cancer)是一个难题,长期以来研究人员们一直在苦苦探索。我们目前知道,致癌的过程与许多因素有关,但如果我们能阻止其中的任何一个步骤,癌细胞便无法形成。因此,探测致癌物质的技术与癌细胞的及时发现就显得尤其重要!然而截至目前为止,研究人员们仍无法研究出一种简易基因测试法或综合的方法来检测出

毛细管电泳法和液相色谱法的异同

  利用高压直流电场驱动的带电粒子之间的迁移率和分配系数的差异,以毛细管为分离通道,实现了高性能无纺布的分离。这是继液相色谱(Hplc)之后的分析科学的又一重要进展,它将分析科学从微观提升到纳米级,这不仅使单细胞甚至单分子分析成为可能。蛋白质和酸性等生物物质的分析也有了一个新的转折点。与液相色谱法的

微电泳仪显微电泳法zeta电位仪的发展与选型方案

       分散体系、胶体和界面物理化学已经渗透到物理化学、高分子材料、涂料工业、环境保护、新材料、微电子、生命科学、造纸、水处理、日用化工、农业土壤、选矿、制药等诸多学科和领域,各领域中涉及胶体及各类分散体系的重要理论探讨及解决实际问题时,往往都要测定表面(界面)电性,因此表面(界面)电性的测量

毛细管电泳法的毛细管电泳的分离模式

毛细管区带电泳(Capillary Zone Electrophoresis, CZE)最常见的模式,用以分析带电溶质。样品中各个组分因为迁移率不同而分成不同的区带。为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁做化学修饰。毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis,CGE

毛细管电泳法的芯片自由流电泳分离系统介绍

  芯片自由流电泳也是芯片电泳分离蛋白质的重要方法。芯片自由流电泳是指在芯片中通过外加电场使样品随缓冲液连续流动的同时沿电场方向进行电迁移,从而按照电泳淌度不同实现分离的电泳分离模式。Raymond等采用芯片自由流电泳模式分离了人血清蛋白、缓激肽和核糖核酸酶A,其分离长度为3.1 cm,流出时间为6

高效毛细管电泳法的毛细管电泳的特点

柱效高,可达105~106/m分离速度快,几十秒~几十分钟溶剂和试样消耗极少没有高压泵,仪器成本比HPLC更低选择性强

蛋白质的单向SDS凝胶电泳实验——Laemmli凝胶电泳法

电泳可用于分离复杂的蛋白质混合物,研究蛋白质的亚基组成以及证实蛋白质的均一性等,还能纯化出蛋白质用于后续的研究工作。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶的孔径,蛋白质的电荷、大小、性质等因素共同决定了蛋白质的电泳迁移率。实验材料蛋白质试剂、试剂盒Tris·ClSDS仪器、耗材电泳仪离心机真空泵实验步骤1.

微电泳仪显微电泳法zeta电位仪的发展与选型方案

分散体系、胶体和界面物理化学已经渗透到物理化学、高分子材料、涂料工业、环境保护、新材料、微电子、生命科学、造纸、水处理、日用化工、农业土壤、选矿、制药等诸多学科和领域,各领域中涉及胶体及各类分散体系的重要理论探讨及解决实际问题时,往往都要测定表面(界面)电性,因此表面(界面)电性的测量技术就显得及其

电泳分析常用方法琼脂糖凝胶电泳法操作方法

  1.仪器装置  电泳室及直流电源同纸电泳。  2.试剂  (1) 醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0)  取冰醋酸 50ml,加水800ml混合后,用氢氧化锂调节pH**3.0,再加水**  1000ml。  (2) 甲苯胺蓝溶液  取甲苯胺蓝 0.1g,加水100ml使溶解。  3.操作法  (1)

关于乳糜微粒的火箭电泳法的简介

  ① 抗原稀释倍数与抗血清用量的选择,应以火箭峰清晰、校准曲线斜率适中并成直线为宜。本法同时测定apoA-Ⅰ与apoB,应调整两种抗血清用量,使二者峰高有区别,apoB峰高不小于1cm。  ② 不同种类来源的抗血清(如兔与羊),在等效价的情况下进行试验,结果会有差异。apoA-Ⅰ测定以兔抗血清为好

Zeta电位仪的测量方法电泳法

  对许多熟悉利用此法进行高分子分离的人来说,颗粒电泳也是一个类似现象。悬浮于介质中的颗粒被置于一电场中;如果带电他们会在电场产生流动,阳性颗粒朝负极流动,阴性颗粒朝正极流动。然而,颗粒并不是独自流动,他们周围会携带一薄层离子和溶剂。这一分离固定媒介与移动颗粒及其携带的离子和溶剂的界面叫做流体剪切面

毛细管电泳色谱法简介

  毛细管电泳色谱法(capillary electrochromatography; CEC)是毛细管电泳与液相色谱相结合形成的一种高效、快速微分离分析技术。毛细管电泳色谱法可以分离离子和中性分子。它是利用缓冲溶液的电渗流作为泵,使被分析的分子通过对其具有不同保留程度的第二相,达到分离的目的。

醋酸纤维素薄膜电泳法

仪器装置电泳室及直流电源同纸电泳。 2.试剂(1) 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥2.76g,巴比妥钠15.45g,加水溶解使成1000ml。(2) 氨基黑染色液 取0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。(3) 漂洗液 取乙醇45ml、冰醋酸5m

血清脂蛋白电泳法的操作与增速

   血清脂蛋白电泳法是近些年临床上经常采用的一种检验方法,由于其分离和显色效果均不是很满意,目前不少实验室已废弃脂蛋白电泳法,改用脂蛋白胆固醇和载脂蛋白测定。         在国外,脂蛋白电泳方法已商品化,在分析速度精度等方面均可满足常规应用。参照有关方法和技术[1,5],我们得到了一种适合于国

关于纸电泳法的操作方法介绍

  (1) 电泳缓冲液 枸橼酸盐缓冲液(pH3.0)。取枸橼酸 (C6H8O7·H2O)39.04g与枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O4.12g,加水4000ml,使溶解。  (2) 滤纸 取色谱滤纸置1mol/L甲酸溶液中浸泡过夜,次日取出,用水漂洗至洗液的pH值不低于4,置60℃烘箱烘干,

Zeta电位仪的电泳法测量方法

  对许多熟悉利用此法进行高分子分离的人来说,颗粒电泳也是一个类似现象。悬浮于介质中的颗粒被置于一电场中;如果带电他们会在电场产生流动,阳性颗粒朝负极流动,阴性颗粒朝正极流动。然而,颗粒并不是独自流动,他们周围会携带一薄层离子和溶剂。这一分离固定媒介与移动颗粒及其携带的离子和溶剂的界面叫做流体剪切面

关于电泳法缓冲液作用的介绍

  作用之一  缓冲液在电泳过程中的作用是维持合适的pH。电泳时的正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应,负极发生的是还原反应。长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,使溶液两极的pH保持基本不变。  作用之二  电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电

毛细管电泳法的特点;优点

1、电泳柱效更高,可达105m-1~106m-1,分离速度更快,在几十秒至几十分钟内即可完成一个试样的分析。2、溶剂和试样消耗极少,试样用量仅为纳升级。3、没有高压泵输液,因此仪器成本更低。4、通过改变操作模式和缓冲溶液的成分,毛细管电泳有很大的选择性,可以对性质不同的各种分离对象进行有效的分离。