研究开发出原位代谢靶向的功能菌筛选、培养和强化技术
环境修复与生态系统工程高度依赖于原位功能菌的挖掘和应用,但长期以来,业界普遍采用的“先养后筛”范式面临着挑战。由于缺乏有效的菌群原位功能快检方法,因此通常难以快速识别和挖掘具有潜在功能的原位菌株。此外,即使能分离出功能菌,其在纯培养条件下的代谢效能(如除磷效率)往往与其原位环境有巨大差异,经常导致环境修复失败。针对上述挑战,中国科学院青岛生物能源与过程研究所与青岛科技大学、青岛水务集团环境能源有限公司等单位合作,提出了“原位代谢靶向的功能菌筛选、培养和强化”(IMSCA)策略,利用单细胞拉曼分选仪,从环境样品中直接进行单细胞精度的原位代谢功能测量和目标原位功能菌分选。研究发现,单细胞拉曼光谱中的多聚磷酸盐峰强度可作为单细胞水平的定量生物标志物,用于评估菌株从胞外环境中去除可溶解态磷的效率,从而识别聚磷菌(PAO)。在验证IMSCA策略的有效性时,研究团队选择了污水处理这一典型场景进行测试。磷排放是水体富营养化的主要原因,而生物除......阅读全文
OsAGAP-mRNA原位杂交
实验概要本实验以OsAGAP mRNA为试材介绍了原位杂交技术,包括:原位杂交正义、反义探针制备,原位杂交探针半定量,植物材料的固定与石蜡包埋,切片与粘片,杂交和显色等过程。实验步骤1. OsAGAP原位杂交正义、反义探针制备对OsAGAP cDNA全长在GenBank中做BLAST分析,选取特
原位杂交(含FISH)
原位杂交组织化学常用试剂及处理 一、杂交前准备 (一)DEPC水是经DEPC处理过的灭菌蒸馏水。 DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylprocarbonate),可灭活各种蛋白质,是RNA酶的强抑制剂。原位杂交在杂交及其以前的各步处理中,所有液体试剂都应经DEPC处理。方法是:取市售
原位杂交技术原理
荧光,又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。 在日常
原位PCR的应用范围
组织处理的要求 处理后的标本,既要保持组织,细胞的形态结构,并增加细胞膜通透性,又要充分暴露拟扩增的目的DNA或RNA,使引物、探针能有效进入胞浆中发生反应。 应用范围 主要应用于两方面: (1)检测外源性基因片段,提高检出率,集中在病毒感染的检查上,如HIV、HPV、HBV、CMV等;
原位光电分析测试系统
原位光电分析测试系统以扫描电子显微镜为基础,集成阴极荧光谱、微纳机械臂、外部电学测量等功能,构建了一个直观、实时和原位地研究先进功能材料和器件物理性能的系统,不仅可以实现对纳米材料或器件的原位发光的检测和电学物性的测试、纳米尺度的操作和控制、以及特定纳米光电子器件的构筑,还可以实现实时原位研究
原位聚合酶链式反应(in-situ-PCR)和原位反转录
一、仪器设备英国Thermo Hybaid原位PCR仪。二、操作流程(一)原位PCR步骤1、预处理: (1)切片常规脱蜡; (2)0.2mol/L HCl处理10min; (3)5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min; (4)Nase消化组织37℃ 30min; (5)梯度酒精脱水,
荧光原位杂交(FISH)和用引物介导的原位标记(PRINS)...
荧光原位杂交(FISH)和用引物介导的原位标记(PRINS)操作规程设备 1、 医用微波炉; 2、 水浴锅; 3、 OLYMPUS BX51荧光显微镜; 4、 OLYMPUS DP11数字显微照相机。FISH试剂 (1)1×PBS:由10×PBS溶液稀释而成,储存
肝脏的代谢:蛋白质代谢
蛋白质代谢:(1)合成自身结构蛋白并合成多种血浆蛋白质,其中合成量最多的是白蛋白。(2)肝脏合成的许多凝血因子和纤维蛋白原等,在血液凝固功能上起重要作用。(3)有丰富的氨基酸代谢酶,转化和分解氨基酸。(4)经鸟氨酸循环合成尿素(尿素是血中非蛋白含氮物质主要成分)。
胆红素代谢中的肝内代谢
肝内代谢:肝脏对胆红素有摄取、转化、排泄的功能。1)摄取:胆红素随血运输到肝后,在膜上与白蛋白解离,并被肝细胞摄取。肝细胞内有Y蛋白和Z蛋白的两种色素受体蛋白。Y蛋白是肝细胞主要的胆红素转运蛋白,Z蛋白对长链脂肪酸具有很强的亲和力。Y、Z蛋白与进入胞质的胆红素结合,并将它运至内质网。2)转化:肝细胞
胆红素代谢中的肝内代谢
肝内代谢:肝脏对胆红素有摄取、转化、排泄的功能。 1)摄取: 胆红素随血运输到肝后,在膜上与白蛋白解离,并被肝细胞摄取。 肝细胞内有Y蛋白和Z蛋白的两种色素受体蛋白。Y蛋白是肝细胞主要的胆红素转运蛋白,Z蛋白对长链脂肪酸具有很强的亲和力。Y、Z蛋白与进入胞质的胆红素结合,并将它运至内质网。
α酮酸代谢的代谢过程
氨基酸脱氨后生成的 α-酮酸可进一步代谢。主要有以下三方面:1.经氨基化生成非必需氨基酸实验证明人体不能合成赖、异亮、苯丙、亮、色、缬、苏、蛋等8种氨基酸相对应的α-酮酸,因而这些氨基酸不能在体内合成,必须从食物摄取,称为营养必需氨基酸。其它十二种氨基酸则称为营养非必需氨基酸,所谓非必需氨基酸并不是
酮体代谢
由脂肪酸的β-氧化及其他代谢所产生的乙酰CoA,在一般的细胞中可进入三羧酸循环进行氧化分解,但在动物的肝脏、肾脏、脑、等组织中,尤其在饥饿、禁食。糖尿病等情形下,乙酰CoA还有另一条代谢去路。最终生成乙酸乙酯、β-羟基丁酸和丙酮,这三种产物统称为酮体。 酮体是人体利用脂肪的正现象,对于不能利用脂
酮体代谢
由脂肪酸的β-氧化及其他代谢所产生的乙酰CoA,在一般的细胞中可进入三羧酸循环进行氧化分解,但在动物的肝脏、肾脏、脑、等组织中,尤其在饥饿、禁食。糖尿病等情形下,乙酰CoA还有另一条代谢去路。最终生成乙酸乙酯、β-羟基丁酸和丙酮,这三种产物统称为酮体。 酮体是人体利用脂肪的正现象,对于不能利用脂
人胃癌裸鼠原位种植转移模型建立—细胞悬液原位种植法
实验方法原理人胃癌细胞悬殊液接种于裸鼠皮下,形成稳定传代的皮下移植瘤,将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆膜下,称为间接胃原位移植模型,并与直接用细胞悬液接种于裸鼠胃浆膜下、皮下、腹腔、尾静脉的移植瘤模型比较,观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化及细胞动力学改变等生物学特性。
报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验——原位染色技术
β-半乳糖苷酶的原位染色可应用于:(1)确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞;(2)来示踪细胞与细胞相互作用。实验方法原理β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。实验材料β-gal表达质粒转染细胞试剂、试剂盒D-PBSA染色液
CO2加氢的原位FTIR及准原位XPS/HSLEIS研究
负载型Cu/Al2O3和Cu/ZnO催化剂上CO2加氢的原位FTIR及准原位XPS/HS-LEIS研究 胡俊, 李洋洋, 郑燕萍, 陈明树*, 万惠霖铜基催化剂是工业合成甲醇中常用的催化剂,其主要包含Cu,ZnO,Al2O3三种组分,研究各组分在催化合成甲醇过程中的本质作用及其相互间的协同作用
物质代谢与能量代谢的关系
新陈代谢包括物质代谢与能量代谢。物质代谢是指生物体与外界环境之间物质的交换和生物体内物质的转变过程,能量代谢是指生物体与外界环境之间能量的交换和生物体内能量的转变过程,二者是相互联系、相互偶联的。例如,进食后能量摄人过多时,脂肪合成增加;而在饥饿时进行脂肪动员,释放出能量供机体使用。
什么是代谢途径?代谢途径的过程
习惯上把这种连续的化学反应叫作代谢途径。如酵解途径,三羧酸循环途径,戊糖磷酸途径,糖原合成途径,糖异生途径,脂肪酸合成途径等。中间代谢也称为细胞内代谢。在中间代谢过程中,机体借助于各种反应从营养素或消化产物中获得能量,以及机体构成所需要的“原材料”。整个中间代谢可以划分为两个过程,即分解代谢和合成代
糖代谢VS脂代谢:科学家找到了癌症代谢新联系
上海交通大学医学院和Albert Einstein医学院的研究人员发现了一种使肿瘤细胞迅速增殖的酶,抑制这种酶可能是缓解癌症生长的潜在策略。这项研究发表于著名学术期刊《Journal of Biological Chemistry》。 健康细胞从血液中获取脂肪酸和胆固醇用于自身细胞膜建设,然而
多项技术助力肿瘤原位成像
华东理工大学教授龙亿涛小组在单细胞内p53蛋白原位成像检测研究领域取得新进展,相关研究在线发表于《德国应用化学》。 p53是一种肿瘤抑制蛋白,具有反式激活功能和广谱的肿瘤抑制作用。在肿瘤细胞内,p53蛋白通常会发生变异,干扰细胞的正常生长调控机制。“p53蛋白一直是近年来生命科学领域的研究热点
德国研发FRP原位注塑工艺
德国工业塑料加工研究院(IKV)日前选取一种足球护胫为展品,展示了采用注塑方法加工以热塑性塑料为基体的纤维增强塑料(FRP)。 该项目将熔体浸渍工艺(可以加工织物预成型件)的优势与热塑性塑料基体的优点结合在一起。研究团队正在采用原位聚合等技术,开发一种完全自动化的高度集成工艺。该工艺将系统
原位加热台的优势分析
在扫描电镜中对样品加热在许多材料科学研究中已经成了一项必不可少的手段,使用扫描电镜原位加热台可以进行动态地观察温度变化过程中的材料微观变化及失效分析。如今被广泛应用于金属材料、液晶检测、半导体、高分子材料、流体包裹体、生物工程等众多领域。原位加热台能够使我们动态地观察样品在加热过程中的相变、再结晶、
原位PCR实验的大致过程
大致过程 实验用的标本是新鲜组织、石蜡包埋组织、脱落细胞、血细胞等。其基本方法为多聚甲醛固定组织或细胞,蛋白酶消化处理组织;在组织细胞片上滴加PCR反应液进行扩增,覆盖并加液体石蜡后,在原位PCR仪上进行PCR循环扩增,PCR扩增结束后用标记的探针进行原位杂交,最后显微镜观察结果。 实验玻片
原位PCR实验的基本方法
① 固定组织或细胞:将组织细胞固定于预先用四氟乙烯包被的玻片上,并用多聚甲醛处理,再灭活除去细胞内源性过氧化物酶。 ②蛋白酶K消化处理:用60ug/ml的蛋白酶K将固定好的组织细胞片55℃消化处理2h后,96℃2min以灭活蛋白酶K。 ③PCR扩增:在组织细胞片上,加PCR反应液,覆盖并加液
荧光原位杂交的简介
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子(reporter molecul
荧光原位杂交的应用
该技术不但可用于已知基因或序列的染色体定位,而且也可用于未克隆基因或遗传标记及染色体畸变的研究。在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。 FISH最初用于中期染色体。从正在分化的细胞核中制备的这种染色体是高度凝缩的,每条染色体都具有可识别的形态,它们染色后将显现出特征性的着丝粒位置
荧光原位杂交的原理
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术,是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。
荧光原位杂交技术简介
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术,是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。
原位压力机测定方法
测定方法:★先在墙体上开凿两条水平槽孔①上水平槽尺寸应为 240mm×250mm×70mm(深×宽×高)。②下水平槽尺寸为 240mm×250mm×140m(深×宽×高),(下槽的高度视压力机型号不同而调整)。③上下水平槽孔对齐,两槽间相隔 7 皮砖,净距约 430mm。④槽间砌体的承压面修平整。★
原位压力机测定方法
原位压力机测定方法:1、先在墙体上开凿两条水平槽孔①上水平槽尺寸应为240mm×250mm×70mm(深×宽×高)②下水平槽尺寸为240mm×250mm×140m(深×宽×高),(下槽的高度视压力机型号不同而调整)③上下水平槽孔对齐,两槽间相隔7皮砖,净距约430mm④槽间砌体的承压面修平整 2、安