cDNA浓度的测定

理论上讲，等质量是必要的。
但是就反转录结果而言，里面的成分太多，测量浓度的误差比较大。
我们实验室一般都是测量RNA的浓度，然后取等量RNA、过量oligo
dT做充分反转录，再取等量反转录体系做PCR。
另外，我看你用条带定量？这样很不准确，因为你也不知道PCR多少循环后达到饱和。比方说，组间差8倍，差异很明显了，但也不过就差3个循环而已。你说减少了PCR循环数，但是也不能保证减少到合适的程度。一组在10个循环饱和，一个在13个循环饱和，你从20个循环减少到15个循环，条带还是一样亮。
强烈建议做Real-time
PCR，用实时定量曲线去看组间有没有变化，这样就没有循环数的问题了。另外，由于内参的存在，也就没有cDNA浓度问题了。