elisa试剂盒试剂的配方配比说明

各种ELISA配置方法汇总如下：

(1) ELISA实验包被缓冲液(2) ELISA实验洗涤缓冲液(3) ELISA实验稀释液;(4)ELISA实验终止液(5)ELISA底物缓冲液(6)ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液（7）标准品稀释液。
(1) ELISA实验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
NaHCO3    1.59克
NaHCO3  2.93克
加蒸馏水至1000ml
(2) ELISA实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS)：0.15M
KH2PO4         0.2克
Na2HPO4·12H2O  2.9克
NaCl          8.0克
KCl         0.2克
Tween-20 0.05%   0.5ml
加蒸馏水至1000ml
(3) ELISA实验稀释液：
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。
(4) ELISA实验终止液(2M H2SO4)：
蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
(5) ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
0.1M 柠檬酸(19.2克/L)      24.3ml
加蒸馏水50ml。
(6) ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇)   0.5ml
底物缓冲液(PH5.5)      10ml
0.75%H2O2                           32μl
标准品稀释液：
PBS 1L配方pH7.2-7.4.浓度0.01mol/L：
磷酸二氢钾(KH2PO4)：0.27g，
磷酸氢二钠(Na2HPO4)：1.42g，
氯化钠(NaCl)：8g，
KCl 0.2g，
加去离子水约800mL充分搅拌溶解，然后加入浓盐酸或者氢氧化钠调pH至7.2-7.4，后定容到1L.浓度为10mmol/L
(8)ELISA实验封闭液：
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗涤缓冲液至100ml。
值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉，不适合长期保存。
为了保证ELISA实验的准确性，实验操作中加入的缓冲液和各组分一定要精确，将洗涤液加入酶标板中的时候防止加入的试剂混入另外一个酶标孔，严防交叉污染。