布鲁克：微生物鉴定技术——MAIDIBiotyper

　　微生物是一群神秘的小东西，因为你既看不见也摸不着，但是有时候它却关乎你的生命。一次术后的感染，一次吃坏东西，又或者是一次瘟疫等等，这些都有可能会要了你的小命。所以微生物的检测与控制绝不容小觑。

　　 2015年8月12日，第三届全国制药企业质量控制技术论坛在北京召开。在《微生物检测与质量控制技术》论坛上，我们看到了一款微生物鉴定的新平台——MAIDI Biotyper。

　　众所周知，布鲁克是世界MALDI-TOF技术的领跑者，早在2004年推出了MALDI Biotyper作为研究工具。到了2013年布鲁克已售出了1000台MALDI Biotyper。布鲁克的MALDI Biotyper采用的是MALDI-TOF质谱仪采集微生物的独特的蛋白分子指纹图谱，再配以布鲁克的软件、耗材和辅助产品。使得MALDI Biotyper系统已成为世界范围内临床微生物的领先解决方案，在水的检测，制药和食品检测行业也有重要影响。

布鲁克应用技术支持张欣怡博士

　　从怀疑到认可

　　“自从MALDI-TOF进入微生物领域之后，一开始大家都是持怀疑的态度，但是到现在大家已经慢慢认可了。”布鲁克应用技术支持张欣怡博士如是说。“我们今年有统计过单纯用MALDI-TOF作为微生物鉴定的在全球已经有1700多家了。”

　　MALDI Biotyper的工作流程的设计力求稳健且易于操作。将分离纯化之后的菌落挑取一点加入耙板，开始检测，MALDI Biotyper检测一个样品只需要几秒钟。之后，再与数据库中的标准指纹图谱进行比对，得出鉴定结果。整个鉴定结果到出完整的图谱只需要几分钟的时间。

　　MALDI Biotyper采用MALDI-TOF（基质辅助激光解析电离-飞行时间）质谱仪，在细菌进入质谱仪之后，激光轰击细菌，使其形成质子化，在真空飞行管中飞行，并最终打到检测器上。形成质谱图。现在测定的大多数细菌蛋白都为核糖体蛋白，是非常稳定的蛋白。

　　MALDI Biotyper配套的分析软件采用红‘红绿灯’式鉴定结果，分值大于2.000表示可信度非常高，鉴定到种的水平，为绿色；1.70-1.99之间需要通过补充方法来确认，鉴定到属的水平，为黄色；小于1.70表示鉴定结果不可靠，红色。非常清晰直观。数据库中包括革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、酵母菌、丝状真菌等。总共有菌种2371种，菌株条目5989种。后期还在继续研究开发，以适应各方面的微生物。

             

布鲁克MALDI Biotyper

　　经受住了多重考验

　　在会议上张欣怡博士总结了MALDI Biotyper在微生物鉴定中的几大优势：1、操作简单、快速，每个样品测定时间仅需20s，每小时可测150个样品；2、样品需求量少，只需约0.25ng-0.5ug的生物样品；3、更快、更准、更省钱，快速、高通量检测成本低廉，结果准确，分辨率高，简单易用，无需过多的专业知识；4、适用面广泛，可以测革兰氏阳性、阴性菌、酵母菌、丝状真菌等；5、培养条件影响甚小，不同培养基培养的细菌质谱图几乎一致；6、软件功能，清晰直观，用户可以自建库；7、重复性好，高达98.7%。

　　MALDI Biotyper几乎可以应用于任何领域的微生物鉴定。在MALDI Biotyper应用之初，Pfizer制药企业对这套仪器进行了准确性与重复性的检测考察。考察的结果是Pfizer公司购买了布鲁克的公司的MALDI Biotyper系统。英国的Quotient公司微生物实验室也大规模的评估了布鲁克的MALDI-TOF技术。评估结果是Biotyper可提供快速、可靠、高重复的鉴定结果，建议临床检验科和第三方实验室用MALDI-TOF技术取代传统方法。北美一家大型化妆品厂，面霜发生污染。所以这家公司对水源和被污染的面霜同时用布鲁克的MALDI-Biotyper和传统方法进行鉴定，最后得到的结果是API未鉴定出任何细菌，Vitek2只鉴定出被污染的面霜，RiboPrinter与Biotyper鉴定结果一致。可见布鲁克产品Biotyper的准确性。

　　目前，布鲁克MALDI Biotyper在中国最大的用户群是医院，部分为食品领域，还有第三方检测，部分药检所也将其作为微生物鉴定的手段。