第三届全国样品制备会大会报告（二）展开多领域新应用

　　分析测试百科网讯 2017年8月24日，第三届全国样品制备学术报告会在昆明召开（相关报道：第三届全国样品制备会在春城开幕 样品处理再现新技术）。在第一天的大会报告后（相关报道：第三届全国样品制备会大会报告一 新方法层出不穷），8月25日，大会还邀请到湖南大学化学化工学院院士谭蔚泓做大会特邀报告，同时，清华大学化学系教授林金明、浙江大学工业控制技术国家重点实验室教授周建光、中国科学院化学研究所研究员陈义、中山大学化学学院教授李攻科、中粮营养健康研究院研究员杨永坛、浙江大学教授朱岩、中国科学院大连化学物理研究所研究员关亚风、江南大学教授严秀平、哈尔滨工业大学教授朱永刚、延边大学教授李东浩和深圳市龙岗区疾病预防控制中心主任技师蔡志斌等也带来精彩的大会报告。

湖南大学化学化工学院院士 谭蔚泓

　　湖南大学化学化工学院院士谭蔚泓带来了题为《分子医学的基石 疾病相关蛋白的发现和应用》的报告。

　　谭蔚泓首先介绍了分子医学与疾病相关蛋白，展示了疾病标志物的重要性，其中膜蛋白是极其重要的，但是难以发现。利用Cell-SELEX选择核酸适体能够发现疾病的标志物，核酸适体是由15-60个碱基组成的能特异识别靶分子的单链DNA/RNA，识别基础是适体结构与靶分子构象匹配。核酸适体是人工合成的“化学家的抗体”，经过对靶标进行筛选而得到，具有高亲合力、高特异性、容易重复合成、靶标的普适性等特点。

　　谭蔚泓表示获取细胞之间分子层面的差异是发现癌症相关蛋白的重要途径之一。将核酸适配体用于癌症相关蛋白的发现，能够筛选出可以识别特定细胞的核酸适配体；利用筛选得到的核酸适配体找出与之结合的细胞表面的靶分子；运用核酸适配体和靶分子获得疾病相关细胞分型的分子学基础。

　　谭蔚泓以细胞作为靶标的核酸适体筛选，发展了细胞筛选的新方法。传统的方法只能对已知靶标进行筛选，应用有限，不能筛选未知靶标体系，细胞筛选可在标志物未知条件下为靶细胞的分子识别提供全新的化学途径和方法；为发现疾病标志物提供了全新方法，可实现活体细胞的多个靶分子探针的原位筛选。

　　谭蔚泓还介绍了核酸适体应用方面的工作，包括癌症病人样品的分子分型，白血病病人样本的分子分型检测，外周血中癌症细胞的富集和分离等。

　　最后，谭蔚泓介绍了利用核酸适体寻找靶蛋白的一般策略，基于人工碱基的核酸适体筛选（Z和P碱基），疾病相关蛋白和分子识别探针，以及利用核酸适体对样品进行分离和纯化等。

清华大学化学系教授 林金明

　　清华大学化学系教授林金明带来了题为《基于微流控平台的细胞共培养及生物微环境模拟的研究》的报告。

　　林金明介绍了通用型细胞共培养微流控芯片的设计，该芯片具有六通道、六培养腔（细胞培养单元）、六进/出连接口。在芯片进/出口尺寸确定的条件下，可以任意改变细胞培养腔和微流控通道的结构与功能。林金明表示这款第一代的多通道微流控芯片-质谱联用（Chip-MS）技术和装置能够初步应用于细胞共培养研究和细胞的药物代谢研究等。

　　基于这种设计，林金明团队构建了动态培养的微流控芯片平台，模拟胶质瘤干细胞微环境；建立微流控芯片-质谱检测方法对药物代谢分子进行定量；结合RNA干扰的分子生物学方法，研究Bmi-1基因在耐药中的作用。研究结果显示，不同共培养方式胶质瘤干细胞球的对比，微流控芯片上细胞能维持干性，微流控芯片上的胶质瘤干细胞更易成球。微流控芯片上动态观察SU3-GSCs向HBMECs迁移，微流控芯片能动态观察两层细胞的距离，能动态观察细胞之间的迁移。不同共培养方式血管内皮细胞的激活比较，微流控芯片上内皮激活更明显。

　　最后，林金明表示细胞微环境模拟与分析专用微流控芯片及其与质谱、光谱的联用，发展潜力显著，有望未来能够为生命分析提供一项便利的工具。

浙江大学工业控制技术国家重点实验室教授 周建光

　　浙江大学工业控制技术国家重点实验室教授周建光带来了题为《复杂体系的核酸电固相萃取技术》的报告。

　　周建光提出了一种微流控芯片技术，利用纸基芯片的优良特性，结合可变电场的调控方法，研制成本低廉、体积微小、萃取效率较高的复杂体系核酸电固相萃技术。

　　周建光介绍到其团队构建了全氟化介质修饰纸基核酸电固相萃取技术的数学建模，并应用仿真软件进行了仿真研究，分析电场对核酸萃取的作用。设计与制作了全氟化介质分离试剂修饰的纸基核酸电固相萃取芯片，并通过升压模块对电场进行调控。最终采用等温扩增技术对电固相萃取后的核酸浓度进行表征。此研究对实现基于纸基的核酸微全分析系统，实现核酸分析装置的小型化具有重要意义。

中国科学院化学研究所研究员 陈义

　　中国科学院化学研究所研究员陈义带来了题为《植物激素与昆虫信息素之提取测定》的报告。

　　陈义首先介绍了昆虫样品收集方法与发展，以25mg庚氧基丁醇、25mg庚氧基丁醛、或两者相混合为诱饵，建立了GC-EAD——天牛触须检测器方法、GC-EADⅡ——花大姐触须检测器方法、GC-EAD检测松黑天牛信息素方法，并利用测得的性信息素诱捕天牛实例。

　　除了对昆虫的捕捉以外，也可以采用对植物的生长控制，所以需要检测植物激素，陈义以拟南芥为模型，简化高效提取浓缩程序，创微体积衡量赤霉素衍生法，联用LC-MS，检测拟南芥单花花器中赤霉素种类与含量的变化，结果显示其激素水平随花期而变化。

中山大学化学学院教授 李攻科

　　中山大学化学学院教授李攻科带来了题为《复杂样品高效前处理新方法研究进展》的报告。

　　针对复杂样品分析存在的样品前处理瓶颈问题，李攻科开展了分子印迹聚合物（MIP）、功能化石墨烯、金属有机骨架（MOFs）、微孔有机聚合物（MOP）、功能化葫芦脲及硼酸亲和整体材料等样品前处理介质研制以及分析新方法研究等。

　　高选择性样品前处理方法中，李攻科介绍了分子印迹固相微萃取技术，四环素MIP涂层SPME萃取涂层及应用；微波辅助磁性分子印迹微球制备及应用；分子印迹吸附萃取搅拌棒及应用。采用化学键合法合成磁性羟基葫芦脲，研究了磁性固相萃取-UPLC-MS/MS 联用测定植物中超痕量细胞分裂素分析方法。衍生化前处理/色谱分析面粉及面制品中残留氨基脲。

　　高灵敏度样品前处理方法中，李攻科介绍到功能化石墨烯材料具有超高的比表面积和丰富的π-π静电作用，是良好的样品前处理介质。采用层层化学键合法制备了石墨烯 SPME 涂层、溶胶-凝胶法制备了ZnO/石墨烯 SPME 涂层及原位电化学聚合法制备了磺化石墨烯/聚吡咯（SG/PPy）SPME 涂层。采用表面化学键合法制备了磁性 MOF-5 固相萃取材料，建立了磁固相萃取-GC/MS 联用测定海藻、罗非鱼中多环芳烃（PAHs）、磁固相萃取-LC-MS/MS 联用测定植物中赤霉素的分析方法。采用层层化学键合法实现了微孔有机聚合物MOP 颗粒在石英纤维表面的可控固载，制备了对苯系物及其衍生物、多环芳烃以及游离脂肪酸（FFAs）有良好富集能力的 MOP 涂层，建立了 MOP SPME-GC/MS 在线测定茶叶、烟丝气味中 FFAs 的分析方法。

　　在线样品前处理方法中，李攻科介绍了分子印迹聚合物、石墨烯、金属有机骨架、微孔有机聚合物及硼酸亲和材料等新型在线样品前处理介质，分别发展了填充式毛细管在线微萃取柱及整体毛细管在线微萃柱，与色谱分析技术联用发展了在线分离分析方法，实现了生物、食品和环境等复杂样品中痕量组分的在线分离分析。

中粮营养健康研究院研究员 杨永坛

　　中粮营养健康研究院研究员杨永坛带来了题为《保障食品企业食品质量与安全中的样品前处理技术与应用》的报告。

　　杨永坛介绍到采用色谱、色谱-质谱技术进行检测，构建了中粮集团食品安全检测指标的技术体系并在集团相关业务单元示范、推广，为保障集团产品质量安全提供技术支撑。主要内容如下：

　　建立高效样品前处理技术平台。基于分散固相萃取技术原理，采用分散固相萃取法、固相萃取法（免疫亲和柱色谱法和多功能净化柱）、凝胶渗透色谱法和化学处理法（磺化法、酸水解法和蒸馏法）等进行净化。列举了茶叶中农残检测、番茄制品中农药残留的检测、黄曲霉毒素（M1/G1/B1/G2/B2）的检测、辣椒油等含油调味品中邻苯二甲酸酯类物质风险防控及监管措施研究。

　　在高效液相色谱法检测豆制品中丙酸钙中，采用蒸馏法进行前处理，具有杂质干扰小，结果准确的特点，但是速度慢、效率低。最后，杨永坛还介绍了粮食重金属快速检测技术应用与示范等。

浙江大学教授 朱岩

　　浙江大学教授朱岩带来了题为《在线膜蒸馏-离子色谱技术》的报告。

　　朱岩建立了一种在线膜蒸馏联用离子色谱法用于分析复杂样品中的离子态化合物。在线膜蒸馏-离子色谱系统由样品池、自制膜组件及离子色谱仪三个部分组成。疏水聚四氟乙烯中空纤维膜构建的膜组件可直接用于消除复杂基质干扰，同时达到富集目标离子的效果。本方法的一个典型应用为分析复杂生物样品（如血清、尿液）中的痕量氟离子。在最佳操作条件下，在线膜蒸馏-离子色谱法分析生物样品中的氟离子在0.01 ~ 5.0 mg/L线性范围内具有良好的线性（R²= 0.9992）。该方法的检出限和定量限分别为0.78 μg/L和2.61 μg/L。氟离子在实际生物样品中的加标回收率在97.1 ~ 101.9%之间，其相对标准偏差小于5.15%。本方法对于复杂样品中的其他挥发性离子（如铵根，有机酸等）的分析也具有很大的优势和潜力。

中国科学院大连化学物理研究所研究员 关亚风

　　中国科学院大连化学物理研究所研究员关亚风带来了题为《水中VOC 在线样品前处理技术、植物单叶中Gas空间分布定量分析》的报告。

　　关亚风介绍了一套多孔膜萃取/微捕集装置，可自动、在线、连续完成水中挥发性有机物萃取、富集、热解析，传输给气相色谱分离检测。在萃取温度60℃，萃取时间30 min，8 mL/min 吹扫气流速条件下，测定了氯仿等9 种 VOCs。方法的检出限为 0.003-0.041 µg/L，线性关系良好，满足美国EPA饮用水标准分析。目前，该装置已在国内两家自来水厂的水中 VOCs 在线监测仪上进行长期应用试验。

　　关亚风还介绍了一种基于基质固相分散的微型样品前处理方法。该方法以拟南芥为样品，将其与分散剂于离心管中一起研磨后加入溶剂浸提，然后直接离心，整个过程都在一个离心管中进行，不经过任何样品转移过程，从而最大程度地减少了样品损失，并且大部分的基质能够被分散剂除去以达到净化效果。随后，采取一种新型的季铵盐型衍生试剂对赤霉素进行衍生，使得检测灵敏度提高560-7600倍。在最佳条件下，该方法的最小检测量达10.1-72.3 amol，绝对回收率达83.9-104.6%，相对标准偏差为 0.32-10.4%。采用此方法成功检测出了 0.5mg 鲜重的拟南芥和水稻样品中的内源性赤霉素。最后，我们将此方法用于测定单片拟南芥叶中赤霉素的空间分布情况，分辨率达2×2 mm²。

江南大学教授 严秀平

　　江南大学教授严秀平带来了题为《共价有机骨架材料应用于样品预处理和色谱分离》的报告。

　　严秀平介绍到共价有机骨架材料（Covalent-Organic Frameworks, COFs）是一类由C、H、B、N、O等轻质元素通过共价键连接形成的新型多功能多孔材料，具有密度低、比表面积大、热稳定性和化学稳定性高、结构单元多元化、易功能化等优点。随后，严秀平还介绍到其团队在共价有机骨架（COFs）材料、COF涂覆固相微萃取纤维、COF核壳结构复合物、COF键合毛细管柱的制备及其在应用于样品预处理和色谱分离中的初步研究结果等。

哈尔滨工业大学教授 朱永刚

　　哈尔滨工业大学教授朱永刚带来了题为《Microchip CE based sample preparation for field detection of chemical and biological warfare agents》的报告。

　　朱永刚主要介绍了基于微流控芯片-毛细管电泳的样品制备法用于化学和生物战剂的现场检测，以及其团队研究的生物检测平台和生物与化学战剂检测等。

延边大学教授 李东浩

　　延边大学教授李东浩带来了题为《分子到颗粒物分析中的样品微处理技术》的报告。

　　蔡志斌主要介绍了气相色谱/质谱联用分析，气流吹扫微注射器萃取技术及应用；液相色谱/质谱联用分析，复杂样品组分分离技术及应用；循环肿瘤细胞分离，横向电场开管式毛细管色谱技术及展望等。

岛津企业管理（中国）有限公司市场部产品经理 崔巍

　　岛津企业管理（中国）有限公司市场部产品经理崔巍带来了题为《全自动液液萃取平台ATLAS-USIS超快速高自动化萃取尿样中毒品成分及采用三重四极液质技术进行的毒品成分定性、定量分析》的报告。

　　崔巍介绍到ATLAS-USIS自动前处理平台首次实现了尿液中毒品成分全流程自动化液液萃取，同时考察了不同底部形状的样品瓶在仪器萃取实验中萃取回收率的变化趋势，优化了萃取瓶底形状及ATLAS-USIS（全自动液液萃取平台）的萃取条件。配合岛津毒物筛查方法包实现了尿液样品中毒品成分从液液萃取到快速筛查、含量测定的全自动化操作，从样品处理到三重四极液相色谱质谱联用仪定性、半定量全流程仅需30分钟。

赛默飞世尔应用工程师 车金水

　　赛默飞世尔应用工程师车金水带来了题为《赛默飞应对环境中 SVOC 检测的解决方案》的报告。

　　车金水主要介绍了加速溶剂萃取技术、Rocket火箭蒸发器、RSH自动样品平台、SPME Arrow-优化升级的SPME等技术。

GERSTEL GmbH & Co. KG应用工程师 聂芸芸

　　GERSTEL GmbH & Co. KG应用工程师聂芸芸带来了题为《搅拌棒吸附萃取法对异味的分析》的报告。

　　聂芸芸介绍到搅拌棒吸附萃取法（SBSE）和顶空吸附萃取法（HSSE）经常成功的被应用于各种样品基质中可带来异味的超痕量化合物的分析。加之新吸附涂层‘乙二醇 -硅氧烷’（EG-Silicone）Twister®，可通过有效萃取极性氢键供体（如酚类和羧酸）来获得重要的气味和风味化合物，显着提高了此搅拌棒吸附萃取技术的用途。

　　Twister技术加上热脱附-气质联用和deconvolution软件，成为风味化学家重要的分析工具包。此法可以帮助风味化学家进行异味和恶臭的澄清，同时检测非极性和极性分析物，范围跨越各种挥发性和浓度。

深圳市龙岗区疾病预防控制中心主任技师 蔡志斌

　　深圳市龙岗区疾病预防控制中心主任技师蔡志斌带来了题为《食品中黄曲霉毒素 B 族和 G 族的测定中试样的净化技术交流》的报告。

　　蔡志斌介绍到液相色谱-串联质谱法与高效液相色谱-柱后衍生法都需要采用免疫亲和柱对样品提取液进行净化和富集。传统的手动萃取方式操作繁琐，需要人员值守，效率低，平行性差。蔡志斌利用SPE432全自动固相萃取仪（POLYTECH）开发了样品的全自动在线净化方法，样品净化平行性好，效率高，加标回收结果满意。

　　另外，岛津与普立泰科赞助了第三届全国样品制备学术报告会两天的晚宴！