黄曲霉素(Aflatoxins)
黄曲霉素存在于花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在，因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光，G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2)，还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M，其中毒性最高的M的代谢物为4－羟基化的产物Bs.
1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物，是一种毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时，可导致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黄曲霉毒素b1最为多见。其毒性和致癌性也最强。
1根据国标《GB/T 18979-2003》，使用柱后衍生方法可以在一次测定过程中，在同一荧光发射波长下同时检测出这六种黄曲霉素。(Pickering公司提供)
经过黄曲霉素免疫亲和柱净化，经过柱后后衍生荧光检测。
纯化回收率
| 基质 | B1 | B2 | G1 | G2 |
| 玉米（Alfa 10ppb，OTA 14.3ppb） | 107% | 91% | 103% | 75% |
| 大米（Alfa 10ppb，OTA 14.3ppb） | 107% | 93% | 98% | 85% |
| 麦芽（Alfa 10ppb，OTA 14.3ppb） | 98% | 99% | 97% | 70% |
| 葡萄干（Alfa 10ppb，OTA 14.3ppb） | 99% | 106% | 101% | 69% |
分析条件：
色谱柱：MYCOTOX柱，1612124。
温度：42℃
流速：1.0mL/min
流动相：MeOH,CH3CN,H2O； 22:22:56,
柱后衍生条件：
柱后衍生系统：Pinnacle PCX 1.4mL反应器
温度：95℃
试剂：I2 100mg/L 水溶液
检测：荧光检测，氙灯
激发波长：365nm 检测波长：430nm
仪器与耗材
| 货号 | 名称 | 品牌 | 规格 |
| 46300-U | 黄曲霉素混合标准品 | Supleco | 溶于苯:乙腈(98:2) 1mL×5个 |
| 46323-U | 黄曲霉素B1标准品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
| 46324-U | 黄曲霉素B2标准品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
| 46325-U | 黄曲霉素G1标准品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
| 46326-U | 黄曲霉素G2标准品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
| 12058 | 黄曲霉素免疫亲和柱 | Afla | AflaCLEAN 样品前处理柱 分析黄曲霉素- 25 columns/box |
| 1827-00110 | 玻璃纤维滤纸 | Whatman | 11cm孔径1.5um |
| 80665 | 液相进样针 | Hamilton | 100ul |
| 1153-1032 | 柱后衍生系统 | Pickering | 反应体积1.4mL |
| 1612124 | MYCOTOX反相柱 | Pickering | C18，4.6×250 mm |
| 18ECG001 | 保护柱夹套 | Pickering | 带3个保护柱 |
2. 根据国标《GB 5413.37—2010》食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定
（摘自Sigma-Alchrich 公司）
色谱柱：Ascentis Express C18, 2.7um, 2.1×100mm
柱压：230bar
流 速：0.3ml/min
柱 温：35℃
试液温度：20℃
进样量：10ul
流动相：A液，0.1%甲酸溶液； B液，乙腈-甲醇溶液（1+1）
| 时间(min) | 流动相A% | 流动相B% | 梯度变化曲线 |
| 0 | 68.0 | 32.0 | |
| 4.25 | 55.0 | 45.0 | 线性 |
| 5.00 | 0.0 | 100.0 | 线性 |
| 5.70 | 0.0 | 100.0 | 即时 |
| 6.00 | 68.0 | 32.0 | 线性 |
仪器与耗材
| 货号 | 名称 | 品牌 | 规格 |
| 46319-U | 黄曲霉素M1标准品 | Supleco | 10ug/ml, 溶于乙腈 |
| 12058 | 黄曲霉素免疫亲和柱 | Afla | AflaCLEAN 样品前处理柱 分析黄曲霉素- 25 columns/box |
| 53823-U | Ascentis Express C18 | Supleco | 2.7um, 2.1×100mm |
| AP-SE-12B | 固相萃取装置 | Ameritech | 方形12孔 |
| AVP-7120 | 真空系统 | Ameritech | 抽气速度:20L/min;真空度:200mbar |
| 532122N | 针式过滤器 | Ameritech | 水系微孔滤膜13mm 0.22um 200个 |
3 高效光化学反应法测定黄曲霉素B1（摘自LcTech）
此法检测成本低，可用等度HPLC直接测定
流动相：水/甲醇/乙腈:60/30/15 (v/v/v)
流速：1.2mL
进样量：100uL
色谱柱：RP C18
荧光检测：发射波长：365nm，接收波长：460nm
光化学衍生是一种简单、便宜、灵活的技术，可提高很多分析物质检测的灵敏度和选择性。黄曲霉素B1可在8分钟以内出峰，且检测信号明显增强
| 货号 | 名称 | 品牌 | 规格 |
| 46323-U | 黄曲霉素B1标准品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
| 12058 | 黄曲霉素免疫亲和柱 | Afla | AflaCLEAN 样品前处理柱 分析黄曲霉素- 25 columns/box |
| 1100-3348 | UVE 光化学反应器 | Pickering | 光化学反应器单元，240V |
| 10522 | 黄曲霉毒素分析柱RP C18 | Lctech | 150×4.6mm |
| 10523 | RP C18保护柱芯 | Lctech | 3个/包 |
| 10750 | 保护柱套 | Lctech | 1个 |
4根据《 GBT 17480-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定酶联免疫吸附法》
(LcTech公司提供)
LCTech AflaREAD ELISA试剂盒能够定量检测黄曲霉素B1，即使是浓度很小的黄曲霉素B1，也能够定量检测。ELISA试剂盒能够快速、容易的从多种产品中分析出黄曲霉素B1，如坚果、杏仁、大米、玉米、香料或动物饲料。AflaREAD 的检测限非常低，为0.1 ppb.
| 货号 | 名称 | 品牌 | 规格 |
| 11139 | AflaREAD ELISA试剂盒 | LcTech |
|
| 46323-U | 黄曲霉素B1标准品 | Supleco | 3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2) |
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