HPLCICPMS和HPLCAFS助力食品安全检测

　　近期，天津滨海新区召开2011年度科学技术奖励大会，隆重表彰为滨海新区科技发展作出突出贡献的单位和科技工作者。天津检验检疫局动植物与食品检测中心申报的天津检验检疫局重点科技项目《食品安全关键因子的新型检测技术研究与应用》(TK041-2009)荣获科学技术进步奖二等奖。

　　该项目针对目前使用较广泛的有机砷、有机汞兽药和有机锡农药，采用的是两种最先进的元素形态分析联用技术，方法研制成功，满足了国内及进出口检验工作需要，同时，这一高难度检验方法的研制还显示了检验检疫部门高水平的检测技术，填补了国内的技术空白。

　　课题组成员正在进行试验操作

　　微生物实验室检验人员进行食品微生物项目无菌操作

　　在现代化食品生产过程中，农、兽药，重金属、致病菌污染食品，危害人类健康。在食品安全中当前急需解决的问题有农、兽药，致病菌以及未获审批的转基因玉米的检测方法的建立。

　　随着世界贸易的快速发展和各国对食品安全问题的进一步关注，日本肯定列表中对有机砷兽药(硝苯砷酸和洛克沙砷)以及有机锡类农药(三唑锡、三环锡、三苯锡和苯丁锡)要求检测。美国FDA也要求对动物产品中的有机砷残留进行检测。二硝基苯胺类除草剂已被瑞典禁止注册，丹麦于1998年也已经禁止了氟乐灵的使用，其他国家也相应制定了二硝基苯胺类除草剂最高残留限量。而阪崎杆菌引发的脑膜炎、败血症和坏死性小肠结肠炎的病例在全球范围内相继出现，仅在2004年的上半年就召开了两次关于婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的全球及区域性会议，研讨乳品中阪崎肠杆菌的污染、污染源及检测方法等问题。

　　这些国家对未经过安全评价的转基因产品实施零允许量。因此，非常迫切需要解决食品安全中的关键因子的检测方法研究。加强食品的安全卫生检测，是保证人们健康，改善人们生活的必要手段。

　　近十年来，我国相继引进了国外较先进的仪器设备，并积极采用先进的样品前处理技术，使得我国在食品安全因子的检测技术领域发展很快，在许多方面已达到国际水准。但从整体来看，我国的相应检测技术与发达国家相比，仍然非常落后。因此，我国在相关领域的前瞻性探索以及应用性研究任重而道远，开展《食品安全关键因子的新型检测技术研究与应用》的研究工作，旨在加快食品安全因子检测的相关新技术的研究开发，增强自主创新能力，推动我国相关领域的检测水平尽早与国际接轨，适应现实的需求。

　　该项目以食品安全关键因子检测的相关新技术的研究开发为主线，针对食品中有代表性的安全因子，在有害元素、农药残留、致病菌及转基因检测4个方面建立了相应的新型检测技术。该项目在结题后实现了大量技术创新，部分技术和成果达到国际领先水平，弥补了国内技术空白。在国内外核心期刊上共发表论文9篇，申请ZL5项，制定检验检疫行业标准3项。

　　本项目针对目前使用较广泛的有机砷、有机汞兽药和有机锡农药，采用的是两种最先进的元素形态分析联用技术，方法总体水平达到国际先进水平，此课题为有关部门提供了一个可靠的检验手段和依据。另外，本研究采取的检测手段可以为其他元素形态分析方法提供参考，检测方法也可以给系统内外有关试验用以参照。研究过程中形成的标准已经成为检验检疫行业标准，这就意味着全国32个直属局及其分支局只要进行这些项目的检测就必须采用这些标准。因此其社会效益显著。

　　该项目研究建立的不对称引物恒温扩增法在灵敏度、特异性和检测范围等指标上相当于或优于PCR技术，检测成本远低于荧光定量PCR 技术，尤其适合现场快速检测的需要。实验装置简单，仅需要普通水浴锅或者其他得到稳定热源的设备即可;结果观察客观且不需使用电泳仪等设备，只需要通过试纸条的显色即可进行结果判读，简单、快速。总体而言，是一种既有PCR反应的高通量、高灵敏度，又具有免疫学检测的特异性好、操作简便又不需要任何复杂仪器的快速检测方法。从而使得有关的检测工作能在口岸快速筛查、基层或偏远经济不发达地区顺利开展，为出入境病原微生物检测方法体系的建立提供一种新的手段，为口岸快速筛查病原菌，及时发现问题解决问题提供技术支持。

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　　研究重点

　　元素形态检测。以HPLC-ICP-MS联用技术，同时检测动物源性食品中的阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量;采用酸、碱提取液提取样品中的硫柳汞，以HPLC-AFS联用技术来检测其含量。

　　农药残留检测。根据二硝基苯胺类除草剂的特性及植物源性食品中残留限量选择合适的检测方法，并结合灵敏度和多残留检测的要求对不同基质进行相应的前处理步骤的摸索，最终确立植物源性食品中二硝基苯胺类除草剂多残留检测方法。

　　致病菌及转基因检测。建立了一种新型阪崎肠杆菌快速筛选检测方法——不对称引物恒温扩增法结合免疫金标检测方法;使用一种快速简便，灵敏度高，特异性强的环介导等温扩增技术，检测转基因玉米MIR604，MON890034和3272。

　　成果创新

　　■采用了两种先进的元素形态分析联用技术(HPLC-ICP-MS和HPLC-AFS)，提高了元素形态分析的能力。

　　■改进优化了二硝基苯胺类除草剂提取、净化技术，在食品基质中建立了十二种二硝基苯胺类除草剂的同时检测方法。

　　■建立了不对称引物恒温扩增法。在灵敏度、特异性和检测范围等指标上相当于或优于PCR技术，检测成本远低于荧光定量PCR技术，尤其适合现场快速检测的需要。

　　■在检测结果观察上利用免疫金标检测技术，避免环介导等温扩增使用肉眼观察沉淀的不客观性，PCR需要电泳观察及荧光PCR对仪器的依赖，在10至15分钟内就可呈现出清晰的条带，使核酸扩增物的检测周期大大缩短。