发布时间:2009-02-25 00:00 原文链接: BDInflux流式细胞分选仪

BD Influx流式细胞分选仪
BD Influx流式细胞分选仪
美国BD公司
BD








  灵活开放的模块化结构,7激光24参数同时检测,每秒20万事件的强大分析能力,每秒7万事件的超高速分选

  提供偏振光、小颗粒、光谱分析等特殊检测模块及6路分选、比例分选、位置分选等特殊分选功能,不断挑战未知,开拓流式新方法、新应用

  着眼细胞治疗等前沿领域,声学耦合喷嘴增强分选活性,全套可更换管路杜绝交叉污染,HEPA安全柜保护样本及操作者


灵活的BD Influx 分选系统可以适应各种科研应用及环境要求。其模块化的结构,手动操控,支持多达10激光,可更换光路检测,高通量,以及六路分选的特点,使得这套系统可以根据高端研究中独特的需求而进行灵活的设置。此外,BD FACS? Sortware分选软件帮助研究者实现全方位的控制,从机器配置,补偿设置,获取,分选到分析过程,全部轻松掌控。


创新的液流设计

BD Influx 液流系统的特色是其独有的声学耦合喷嘴组件,能可靠形成用于分选的液滴,同时确保即使在高鞘液压力下有较低的剪切力,保证高细胞活性。为了支持无菌分选,液流管路能很容易地被取下,并用选配的可更换液流套件来替换。


Fluidics Overview

喷嘴组件和喷嘴尺寸

BD Influx系统的核心技术之一是其独有的声学耦合喷嘴构件,能确保在液滴形成时得到高信噪比。这种独特的设计在液滴形成过程中最大限度地减小噪音,从而可以在高频的液滴振荡下使用相对较小的鞘液压力。

此外,这种喷嘴组件的形状使细胞能够平稳加速到激光检测点,提高即便是最脆弱细胞的活性和功能性。一系列不同尺寸的喷嘴选择,方便用户研究不同的细胞和颗粒类型。

样品站和液流控制台

样品站和液流控制台控制样品的流动、样品管路的反冲、助推和不同的上样压力。气泡监测器可以在样品管跑空的时候停止上样,从而避免气泡到达喷嘴。

不锈钢桶

内加压的不锈钢鞘液桶可以让用户使用不同的清洁程序,以适应不同的应用需求。

可更换的液路

Parsley 1 Image - Fluidics Nozzle

在细胞分选中的一个非常重要的问题是交叉污染,无论是样品间或是与外源的物质,比如细菌、病毒或DNA。为了避免交叉感染的风险,研究人员可以在几分钟内更换样品管路。样品管路直接进入喷嘴头,使细胞与任何非更换部件接触的可能性降至最低。为实现更严格的控制,从鞘液桶到喷嘴的整个液流系统均可以被更换。BD Influx液流系统独特的设计使得任何与样品有可能接触的部分都能被快速更换,避免交叉污染的担心。

不锈钢鞘液桶和废液桶


光路系统

000.png

直观的光路调节

光路系统将激光直接照射到检测点,操作方便、直观、可适用性强。可配置多达10个激光光路。可选的激光器波长包括:355-nm,405-nm,445-nm,457-nm,488-nm,515-nm,532-nm,552-nm,561-nm,594-nm,640-nm和785-nm。系统还可配置一系列标准检测模块以满足不同应用需求。


Optics Features - Focus Lens

快速简单的光路调节过程

10个激光光路和7个针孔的光学收集系统支持24个参数同时检测和24×24矩阵补偿。配置5个或以下激光器的系统支持16个参数同时检测和16×16矩阵补偿。

对于每个激光器,光线通过单独的光路成型,最后通过一个专用透镜进行调整和聚焦,透镜将光线从不同角度引导到液流上。对于10激光系统,激光以共线的形式通过引导光路和聚焦透镜,但和液流相交在7个独立的空间点。荧光经由一个高数值孔径的物镜收集并聚焦在独立的镜面针孔,可降低激光器之间的干扰。BD Influx光学系统采用模块化设计,当研究需求改变时,激光器可以很容易地进行升级。此外,可适用的激光器的广泛选择也在不断拓展,与先进的研究需求保持同步。

这种获得专利的光路设计使用一个特殊的针孔摄像机对液流和针孔同时成像,大大简化了光路调节过程。在针孔摄像机的辅助下,只需片刻就可将光路调整到近乎最佳的状态而不需要使用微球。

针孔摄像机观察

收集镜头、针孔摄像机和镜面针孔示意图

Individual laser positioners

分选系统

000.jpg

TBD Influx™系统具备两路、四路和六路分选,以及微孔板分选功能。BD Influx电子系统支持高速分选,而且BD Accudrop技术有助于简化分选的优化调节。


Multi-way sorting

Isolating multiple populations at once saves time and makes efficient use of sample. Whether sorting one subpopulation or six, the BD Influx sorter can be quickly configured to best fit researchers’ application requirements. A wide range of standard collection options supports two-, four-, and six-way sorting. Tube holders include sizes from microtubes, to 12 x 75-mm tubes, to 15-mL tubes.

电子系统

BD Influx采用平行电子处理系统,能达到每秒200,000事件的分析速度,而且不受参数数量的限制。为了确保高灵敏度和低噪声,BD Influx在信号放大的第一阶段使用模拟电路。模拟化峰值采集与保持电路的输出信号通过16位模数转换器被数字化,并传递至专利设计的平行处理数据总线上。总线处理实时补偿和其它数字化信号,包括多达8个附加脉冲的峰面积和宽度。对于分选细胞,研究人员可以通过创建多达32个分选门来选择不同亚群。包括纯度、回收率或计数准确性优先的多种分选模式都是标准选项。自定义模式可以允许研究人员针对不同的特殊应用自行优化系统参数设置。

如果不关注纯度,从理论上讲,分选速度可以与分析速度相同。在这种情况下,细胞可以被独立分选并快速富集。

I然而,在大多数分选中,纯度是研究人员关心的一个主要因素,例如液滴形成速率、上样速度和样品质量都在其中起到关键的作用。当这些因素都被考虑进去之后,回收率就可以通过Poisson统计计算出来。使用正确制备的样品,BD Influx系统可以达到>80%的Poisson预期回收率。

Accudrop技术简化液滴延迟设

BD FACS™ Accudrop 技术简化了设置过程,避免了通常所需的人工计算。精确地测定液滴延迟,即液滴从液流上分离的那一点,是非常重要的,因为其能确保仪器精确地将电量加载于包裹了目标颗粒的液滴上。

Accudrop技术有助于研究人员设置最佳的液滴延迟值。在观察BD Accudrop微球的同时即可调整液滴延迟,中心液流或侧液流中的微球均被照亮,因此不使用荧光显微镜或人工计算,研究人员就可以获得准确的液滴延迟值。

Adaptability

The BD Influx system can adapt to virtually any environment. A small footprint allows the instrument to fit into tight spaces, and a modular component design allows the instrument to be easily configured to specific needs. Footprint and modularity have made the BD Influx cell sorter the instrument of choice for marine biology applications. The BD Influx Mariner version includes pre-amp modifications for dimly fluorescent microorganisms and a brace to secure fluidics tanks for shipboard installation.

A range of standard detection modules is available to configure the system based on application needs.

Optional, exchangeable detector modules provide the capability to measure small particles, the polarization state of scatter, or fluorescence signals. This flexibility allows the user to adapt the system to the needs of routine or emerging applications.

Sorting Features - Small Particle no polarization

Small Particle Option

Optics Features - Small Particle Option

Small Particle Option with polarization

Polarization

The BD Influx system can be equipped with polarization-sensitive detectors. A unique polarization design uses two detectors mounted under Brewster angles to measure changes in parallel and perpendicular light for both scatter or fluorescence. Changes in polarization can help differentiate between organisms containing highly reflective inclusions such as diatoms, or discriminate among different populations of granulocytes.

Small Particle Option

The Small Particle Option on the BD Influx system improves forward scatter detection. This option lowers the threshold on size measurements using a special detector with a high NA microscope lens, a pinhole, and a photomultiplier tube (PMT). The pinhole reduces the amount of stray light reaching the detector and prevents saturation of the PMT. Optimized sheath fluid (0.1-micron filtered) lowers the intrinsic noise level, which enables measurement of particles as small as 200 nm.

This resolution makes the Small Particle Option particularly valuable for applications in marine biology, microbiology, and environmental biology. The Small Particle Option also allows researchers to detect fluorescence in the forward direction. This capability is used in applications such as chlorophyll detection.

Computerized Cell Deposition Unit

For precise sorting, the mechanics and speed of the XY table in the Computerized Cell Deposition Unit (CCDU) allow sorting into microtiter plates or other custom devices such as slides or petri dishes. Single-cell cloning or sorting for single-cell PCR or single-cell imaging techniques is possible with the standard CCDU.

Make exploratory cloning more efficient with index sorting

Index sorting functionality has been completely rewritten and extended to put a very powerful analytical technique in the hands of researchers. It is now possible to review the complete flow phenotype of every cell sorted into a multiposition sort device, such as a 96-well tray. Index sort mode creates an FCS file containing all the sort deposition information and tray position information on an event-by-event basis. Each sorted event in the file is “indexed” one-by-one according to the X and Y coordinates of the sort collection device. Post-sorting results can be precisely traced back to the flow characteristics of the specific cell or combinations of cells sorted.

Flexible collection formats

Cell Deposition Unit - Large

In addition to sorting into tubes, the BD Influx sorter supports an endless variety of slides, plates, and custom devices. Predefined trays and slides include 384-, 96-, 24-, and 6-well plates, coarse and fine calibration slides, and 4 x 12 slides.

软件

BD FACS Sortware 分选软件: 从获取到分选和分析

BD FACS™ Sortware 分选软件提供对细胞分选仪的全面控制,从仪器设置到实验获取的补偿调节、分选和分析,方便客户根据特定应用来定制仪器。


BD FACS Sortware 从根本上改善了细胞仪软件对细胞分选的支持。软件通过获取一个事件的所有信息,如时间、在分选液滴中的位置、与其它事件的相对位置、固件分类器状态等等,使其可满足研究人员用于质量控制或分选后分析的需求。

软件采用工业标准协议,管理成百个系统参数,从而让研究人员能更好的控制和使用仪器,来支持前沿研究应用。

为获得最大限度的可重复性和加速研究,研究人员可保存和调用以前的工作区、配置、仪器状态和参数设置。多任务处理能力允许研究人员从样品中分选细胞、将信息保存在数据文件、分析之前的数据文件 — 全部同时进行。

软件向导和控制程序可协助研究人员进行细胞群分类、补偿操作、分选监控和结果分析。

从属设门工具使细胞群的分类更加简单直观。

自动补偿向导 可基于使用者所选择的对照群创建一个溢出矩阵,并自动计算补偿矩阵来调整分群。

分选控制和事件计数器 监控分选,能独立或同时暂停、恢复、重置和停止每个分选液流。

数据和分选分析工具 提供可靠的细胞群统计和单个细胞水平的分选质量控制。

为了支持分析,BD FACS Sortware允许研究人员通过丰富多样的输出格式来观察实验数据,包括直方图、叠加直方图、散点图、密度图和等高线图,而且全部提供线性、对数和双指数(Logicle)等比例选择。由于对标准软件协议的支持,研究人员能将图形数据及文本导入至常用工作软件(如Microsoft® Office®),用于演讲或发表。结果也可以FCS数据文件的形式输出和导入至其它应用软件。

直观的工作流程

BD FACS Sortware具有一个简单、直观的工作流程,它熟悉的Microsoft® Windows®界面使得研究人员能更关注于实验而非操作命令和对话框。研究人员可以逐步执行细胞仪设置、补偿、数据获取、设门、分析和分选,还可以选择返回之前的任何步骤做即时调整。

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细胞仪设置

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采集、分析和分选

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补偿


 

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设门和分析

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分选

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Index Sorting 索引分选



  zei大分选速度:70,000细胞/秒

  所有的激光器和荧光检测系统都采用模块化设计,用户可灵活配置

  可检测散射光或荧光信号的偏振现象,区分特殊生物体

  配备有小颗粒散射光检测模块,可准确检测小颗粒散射光,灵敏度达200nm

  全光谱分析功能,记录每个微粒的所有光谱信息,相当于具备荧光光度计功能

  独特的声学耦合的喷嘴设计,保证低压高频的液滴成形模式,维持分选过程的细胞活性

  多种分选模式,两路,三路,四路和六路分选,多孔板分选等

  液路管路可2分钟快速更换,确保分选过程的无菌化

  可选配高效微粒空气过滤仓

  可选配气溶胶控制系统


参考招标参数:

项目名称:流式细胞分选仪

项目编号:QSZB-H-A18268ZJUZ


1、激光配置:配置488nm、640nm、405nm、355nm和561nm 五根激光器,可检测19个荧光参数和两个散射角参数;

2、激光独立光斑数:7个;

3、荧光通道:488nm激光器,激发3个荧光通道;640nm激光器,激发3个荧光通道;405nm激光器,激发6个荧光通道;355nm激光器,激发2个荧光通道;561nm激光器,激发5个荧光通道。

4、升级能力:可同时搭载10根不同波长的激光器,拓展应用范围。

5、光激发系统:侧旋浮空气激发技术保证喷嘴液流在最短时间内和激发光正交。

6、光路调节:激光光路相互独立,通过针孔摄像机对液流和激光光斑同时成像,能在短时间内调整到最佳光路状态,无需使用微球;

7、液滴断点调节:具备全自动实时液滴延迟校准系统,不需要借助荧光显微镜等其它外部设备或人工读取荧光微球数等方式来进行辅助校准;

8、★检测灵敏度:≤100MESF(FITC),≤100MESF(PE);

9、最小检测颗粒大小:0.2um;

10、分析速度:最大分析速度为≥200000细胞/秒;

11、分选速度:最大分选速度为≥70000细胞/秒;

12、分选纯度和得率:纯度:≥98%,得率:≥80%泊松分布;

13、分选活性:采用声学耦合技术,确保在液滴形成时的最高信噪比,保证在高速分选时较低的鞘液压力,最大程度保证分选细胞的活性和功能性;

14、分选通路:6路分选;

15、分选精度设定:液滴16等分的分选精度设定;

16、分选模式:Yield、purity、single   cell、ratio sorting、position   sorting;

17、分选喷嘴选择:70um、86um、100um、140um和200um,可定制任何大小喷嘴;

18、液流管路设计:曲线型设计,减少细胞在管路中撞击管壁;

19、可选择配置特殊检测器适用于支持测量小颗粒,偏振态的散射或荧光信号的检测和进行荧光光谱检测;

20、可更换式液流管路:管路设计采用卡夹式方法,管路可完全更换,完全避免分选样本间的交叉污染;

21、分选收集仓带有紫外杀菌装置。

22、★配置温度控制系统和气溶胶过滤装置,确保分选过程温度可控以及避免气溶胶对环境和实验人员的损害。

23、电子处理及软件系统:配置数据获取和分析软件,支持24色全矩阵荧光补偿,配备完善的CS&T系统,能够实时检测仪器状态,保证仪器处于最佳的状态。

24、配置清单:

24.1、流式细胞分选仪主机一套,配置5激光19色荧光参数(488nm激光器3色、640nm激光器3色、405nm激光器6色、561nm激光器5色、355nm激光器2色);

24.2、数据处理工作站含数据获取和分析软件(Intel® 处理器,3.06 GHz 或以上。Windows 7或以上操作系统,4 GB RAM,500GB Hard drives,16 X DVD RW)一套;

24.3、温度控制系统一套;

24.4、气溶胶过滤系统一套;

24.5、空气压缩机一套;

24.6、管路两套;

24.7、喷嘴4个。

24.8、稳压电源一套。






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