新型高效液相色谱法(HPLC)在食品质量安全检测中的应用

摘 要：随着人们对食品安全的关注以及食品质量安全问题的多发,人们愈发关注食品添加剂残留问题，而配套的检测技术也越来越重要。食品添加剂按照来源可以分为天然食品添加剂和化学合成添加剂。下面本文现就几种常见的添加剂予以描述。 
　　1 高效液相色谱法（HPLC）在食品微生物及微生物代谢物检测中的应用 
　　食品中含有大量的微生物以及微生物的代谢物，其中很多比如黄曲霉素等对人体是有害的，当食品中的这些代谢物超标就会影响到人们的食品安全。 
　　高效液相色谱法在食品微生物的检测中有着较广泛的应用，其原理就是依据不同微生物的化学组成或其产生的代谢产物，利用高效液相色谱法检测可直接分析各种体液中的各种细菌代谢产物，确定病原微生物的特异性化学组分，进从而确定被检测食品中是否存在微生物超标的情况以及是否威胁到人们的健康等。 
　　 
　　2 高效液相色谱法（HPLC）在食品中的各种添加物质检测中的应用 
　　食品添加剂，指为改善食品品质和色、香、味以及为防腐、保鲜和加工工艺的需要而加入食品的人工合成或者天然物质。 
　　高效液相色谱具有超低的检测限制，超高的灵敏度，以及同时可以检测多种食品添加剂等特点，已被越来越多的应用于食品检测领域，同时，它的出现也极大地保证了人们的食品安全。 
　　2.1 甜味剂 
　　甜味剂是指赋予食品或饲料以甜味的食物添加剂。甜味剂有几种不同的分类方法：按其来源可分为天然甜味剂和人工合成甜味剂；按其营养价值分为营养性甜味剂和非营养性甜味剂；按其化学结构和性质分为糖类和非糖类甜味剂。而糖精钠价格便宜使用方便而被大量的添加于各种食物当中，但是糖精钠过量则会给人的身体造成伤害。 
　　学者赵笑虹等人利用高效液相色谱技术，以及荧光检测器或荧光检测器与紫外检测器相结合的手段来检测食品中的糖精钠。这种方法与其他传统的方法相比，避免了因食品组分多而导致的前期难以处理问题，而且具有重现性好、灵敏度高以及回收率高等特点。选择样品进行加标回收实验，平均回收率达99.71%，相关系数大于5个9，相对标准偏差为0.65%。 
　　2.2 食用级色素 
　　食用色素是色素的一种，即能被人适量食用又可使食物在一定程度上改变原有颜色的食品添加剂。 
　　食用色素也同食用香精一样，分为天然和人工合成两种。天然食用色素是直接从动植物组织中提取的，一般来说对人体是无害的。人工合成食用色素，是用从煤焦油中分离出来的苯胺染料为原料制成的，故又称煤焦油色素或苯胺色素。 
　　人工合成色素易诱发中毒、泻泄甚至癌症等，对人体有着巨大的危害。因此检测食品当中的人工合成色素含量就变得至关重要。 
　　学者王红梅等建立了高速同步测定肉类食品当中柠檬黄、苋菜红、胭脂红和日落黄的方法。 
　　首先将肉制品脱去脂类物质，然后按乙醇∶氨水体积比为7∶3的比例，用超声波超声后提取过滤，再采用安捷伦的1100系统以20 mmol/L 乙酸铵和甲醇梯度洗脱，经二极管阵列CAD检测，外标法标定峰面积结果，结果显示4种人工合成的食用色素回收率在91.5%～99.3%之间，相对标准偏差小于1.5%。 
　　 
　　3 高效液相色谱法(HPLC)在食品中农药与兽药残留检测中的应用 
　　食品药物残留的危害巨大，已引起世界各国政府的高度重视，成为亟待解决的问题之一。动物性食品中，药物残留是指当饲养过程中的动物用药后，原来的药物产 
　　生的残留或者是代谢物。植物性药物残留，是指在食用性植物在生产过程中使用的农药等的残留或者是降解产物的残留。分析食品中尤其是水果和蔬菜中的农药残留十分重要，因为它与人类的生活息息相关。 
　　高效液相色谱法是分离分析热不稳定和难挥发性化合物的有效方法。学者饶钦雄等人采用高效液相色谱法测定了蔬菜水果中多菌灵、噻菌灵和苯菌灵的含量。样品经过乙腈提取后，采用HPLC法测定，以乙醇-水做为流动相1 ml/min等度洗脱,在0.1～20 ug/ml的范围内，多菌灵和噻菌灵的峰面积与浓度呈线性，R大于4个9，检出限为25ug/kg，回收率在91%～103.5%之间。 
　　 
　　4 高效液相色谱法在联合检测当中的应用 
　　随着人们对检测技术要求的提高，往往需要多种添加剂同时检测，以达到更高效和更灵敏的检测效果。学者王静等人选择了一种简单、方便、灵敏度高、重现性好的添加剂检测方法。 
　　他们采用冰醋酸作为沉淀剂，AgilentE2clip se XDB-C18柱（5μm 416mm×250mm）液相色谱柱分离，乙酸铵缓冲溶液-甲醇（体积比95：5）作为流动相，二级管阵列为检测器，反相色谱法同时测定食品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠的含量。结果得到了样品加标回收率为90.12%～108.15%；安赛蜜LOD为0.10020 g/ml；苯甲酸LOD为0.10020g/ml；山梨酸LOD为0.10020g/ml；糖精钠LOD 为0.10040 g/ml。 
　　5 在食品加工储存过程中产生的有毒物质分析检测应用 
　　一些食品在加工、储存过程中会产生化学变化，生成对人体有害的物质，而对这类有毒物质的分析检测也是食品安全检测中的重要内容。 
　　研究表明：多种谷物经高温加工后可产生丙烯酰胺，具有潜在的神经毒性、遗传毒性及致癌性。文献[4]等 
　　采用ACQUITY UPLC BEH C18柱（1.7mm，2.1×100mm），以甲醇-0.1% 甲酸水溶液为流动相建立了高温烘焙食品中丙烯酰胺的UPLC-MS/MS 检测方法，2min 内可完成分析，加标回收率为95%～120%，RSD＜ 5.0%，检出限为0.1mg/kg，可满足食品中丙烯酰胺的痕量分析需求。 
　　单端孢霉烯族B类毒素是最为普遍存在的污染真菌，农作物极易遭受这类真菌的污染。文献[4]等建立了同时测定玉米中多种霉菌的UPLC-MS/MS法，该法采用ACQUITY UPLC HSS T3柱（1.7 mm，2.1×100 mm），以0.2%氨水-乙腈/甲醇（90:10 v/v）为流动相梯度洗脱，质谱检测器（ESI--MRM-MS/MS）检测，10 min 内10 种霉菌完全分离，方法加标回收率为75.8%～106.5%，RSD为1.7%～9.6%，检出限为0.09～ 8.48mg/kg，满足欧盟限量标准。 
　　 
　　6 结语 
　　目前，高效液相色谱法技术在食品安全中起着越来越重要的作用，为人们的食品安全带来了保障。高效液相色谱法技术与其他技术的联用也越来越受到研究者的欢迎，相信在不久的将来，食品检测技术将越来越精细，越来越高效。 
　　 
　　参考文献 
　　[1]GB/T5009.33- 2003，食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定[S]. 
　　[2]乔坤云.HPLC 分析测定葡萄籽油中的维生素A 和维生素E[J].仪器仪表与分析监测，2002,（3）：22-23. 
　　[3]杨大进，赵凯，方从进.防腐剂和甜味剂检测技术进展[J].中国卫生检验杂志，2008,18（7）：1460-1462. 
　　[4]于村,韩铮，潘红锋，等. 采用同位素稀释法串联质谱的方法同时测定玉米中的多种霉菌毒素[J].中国卫生检验杂，2009,19（5）:979-986. 
　　[5]陈砚朦，钟淑婷，尹艳梅，等. 超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法测定高温烘烤食品中丙烯酰胺的方法研究[J].中国卫生检验杂志，2008，18(6): 972-974.