HPLC在食品检测中的应用

　　摘要：HPLC在食品检测领域发挥着越来越重要的作用，本文对高效液相色谱层析进行简单概述，并对其在检测食品添加剂、食品污染物、转基因食物等方面的应用进行介绍，希望人们对HPLC在食品检测中的应用有更深入的认识。
　　引言
　　随着社会的发展，人们生活水平的不断提高，人们对食品安全性的关注度也越来越高，但是近几年，食品安全问题却层出不穷，屡见报端。要想打消民众对对食品安全的顾虑，就需要精确地分析技术来对食品安全性进行分析。
　　一、高效液相色谱层析概述
　　高效液相色谱法（HPLC）是在气相色谱法和液相色谱法的基础上发展而来的，它运用高压输液的方式将所需的不同的流动相挤进色谱柱进行分离，然后利用检测器对分离后的试样进行分析。与其他方法相比，高效液相色谱法优势明显：由于HPLC的流动相是液体，不需要将流动相进行气化，极大的拓宽了高效液相色谱层析的使用范围；此外，HPLC还配备有各种高精度硬件与自动化软件，使得检测结果灵敏度高，回收率高，固液相的分离效果好，分析结果的精确度较高等等。鉴于高效液相色谱法（HPLC）的种种优势，在其出现的短短30年间，应用范围已经扩展到农学、食品、商检、化学和工业等学科领域中，成为这些学科的必不可少的分离分析技术。
　　二、高效液相色谱层析法在食品检测中的应用
　　1、高效液相色谱(HPLC)在食品添加剂检测中的应用
　　食品添加剂可以提升食品的色、香、味，延长食物的保藏期限，为我们的日常生活带来了很多乐趣和方便。但是不合理的使用食品添加剂不仅降低食品质量，甚至损害人体健康，如苏丹红鸭蛋事件。目前我国对食品添加剂的使用种类、数量有着严格的限制，严禁添加危害人体健康的添加剂。
　　1.1甜味剂
　　甜味剂可以使被添加食物的甜度增加。一般来说，人工添加的甜味剂都是没有营养的，最常用的有乙酰磺胺酸钾(安塞蜜)、环己氨基磺酸钠(甜蜜素)、糖精钠等，其中尤以低价格的糖精钠使用范围较广。少量添加甜味剂对人体没有副作用，但是，添加过量的话会危害人体健康。丁芳林等采用气、液相色谱联用技术, 定量检测果冻等食品中果冻等食品中安赛蜜、糖精钠和甜蜜素含量等甜味剂的含有量，结果加样回收率为93.19% -100.90%,相关标准偏差(RSD)为1.05% -2.04%。这种气、液相色谱联用技术，不仅能够在短时间内，对果冻中的甜味剂进行定性、定量分析，而且也同样适用于检测饮料中的甜味剂的含有量。
　　1.2、防腐剂
　　防腐剂能够延长食物的保藏时间，有效阻止细菌等微生物的滋生。比较常用的防腐剂有山梨酸、苯甲酸和他们的钠盐等。当前，我国食品企业向食品中添加的防腐剂大都是人工合成的，使用过量会损害身体健康。赵质创等人采用了甲醇、氨化甲醇、水、80%甲醇和20%甲醇提取糕点中的防腐剂，提取液经C18色谱柱进行分离，用甲醇-乙酸铵溶液进行梯度洗脱，在波长为220 nm处进行检测。检测结果表明：苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、富马酸二甲酯这四种常见防腐剂完全分离开来，且分离效果良好，回收率为 84%～106%，变异系数小于4.54。该方法能够同时检测出4种防腐剂，相比于其他分离检测方法，步骤简单、操作简便，可以在日常的食品检测中广泛使用。
　　1.3、食用色素
　　食用色素属于色素的一种，可以改善食物的感官性质，使其颜色亮丽、诱人，增加人的食欲。依据其来源，食用色素可以分为两种：天然色素和人工色素。食品添加剂中大多使用的是人工合成的食用色素，过量食用人工色素会致癌。柠檬黄、苋菜红、胭脂红和日落黄是常用的人工色素。陈再洁等人采用HPLC方法对饮料中的食用色素进行检测，同时分离出六种食用色素：柠檬黄、览菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝1和亮蓝2，且检测限较低，检测结果的准确度和精密度均较高，达到了日常食品中食用色素的检测要求。
　　2、HPLC在食品污染物检测中的应用
　　2.1、对食品中的农药、兽药残留物检测
　　食品中的农药、兽药残留物严重影响食品的安全性，残留量过大的话会引起癌变。农药易于残留于植物食品中，而兽药易于残留于动物食品中。要想提高人们的生活质量，就必须及时、精确检测出食品中的农药、兽药残留物，是人们吃到放心食物。无论是农药残留物，还是兽药残留物，都具有不稳定、难挥发性的特征，而高效液相色谱法能有效定性、定量的分离、分析出这些化合物。
　　目前，全世界应用比较广泛的新型农药是烟碱类杀虫剂，其中尤以啶虫脒为代表。尹建吉等人建立了高效液相色谱对蔬菜中的农药进行检测的方法，以西红柿为例，采用乙腈提取、盐析、 LC-NH2小柱净化的样品处理方法，检测其中的啶虫脒含量，结果证实这种方法样品需要量少、回收效率高、相对标准偏差小，且方法简便、 准确地实现蔬菜样品的检测，足以满足常规农药残留物检测需求。
　　邬晨阳[1]等人用HPLC对牛奶中的残留兽药进行了检测，结果表明此高效液相色谱分析方法能同时测定牛奶中11种兽药的残留量，其中包含7种磺胺类药物和4种氟喹诺酮类药物，且灵敏度高、重现性好、准确度高,可满足动物源性食品中磺胺和氟喹诺酮类药物的残留分析，有很好的实际应用价值。
　　2.2、对食品微生物及其代谢产物检测
　　食品在生产的过程中难免会产生微生物及其代谢产物，而其中相当一部分会损害人体健康，如寄生曲霉新陈代谢过程中产生的次生代谢产物黄曲霉毒素能诱发癌症等。而以大米、玉米为主原料生产的食品，生产环节不当的话，极易产生黄曲霉毒素，威胁人们身体健康。高效液相色谱法能根据微生物的化学结构和代谢产物的不一样，检测食品中微生物的数量和对人体的危害程度。
　　高志杰采用带有荧光检测器的HPLC法来对食品中容易出现的四种黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2进行定性定量的检测。结果表明，四种黄曲霉毒素在0-100范围内线性关系良好，样品检出限低，能检测出0.05μg/kg水平的黄曲霉素。该种检测方法不仅准确度高、灵敏性强，而且重复性好，适用于常规食品中对4种黄曲霉毒素含量的检测。
　　3、利用高效液相色谱法在转基因食物检测中的应用
　　目前，我国食品市场中流通着很多转基因食品如：转基因大豆，转基因玉米，转基因水稻等，转基因食品已经广泛渗入到我们的日常生活中。但是转基因食品并不是绝对安全的，一些学者认为转基因食品能增加人体对抗生素的耐药性，在人体内积累微量毒素并且可能引起过敏反应，并且转基因食品的营养均衡可能受到破坏。所以，我们需要建立一种能够检测转基因食品中的潜在危险的方法。高效液相色谱除应用于常规食物的检测外，也可以应用于转基因食物检测中。
　　蔗糖-1－果糖基转移酶能够转化甘蔗的果聚糖种类和含量，武媛丽[2]等人建立了高效液相色谱法( HPLC) 测定果糖、葡萄糖、蔗糖及低聚果糖含量的方法，来测定转基因甘蔗中的蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖三种低聚果糖来验证转移酶的转化情况。这种方法能够用此方法也可以蔗糖-1 -果糖基转移酶的催化产物蔗果三糖( GF2) ，并较为准确地检测甘蔗茎杆节间其他糖类的组分及含量，可以用于甘蔗中糖类的定性和定量检测，且该方法操作简便，成本较低，结果准确。
　　三、结语
　　高效液相色谱法以其高精确度、高灵敏度和高回收率、重复性好等优点独领食品检测技术的风骚，目前，HPLC技术与其他技术的联用成为食品检测技术的发展的趋势，也使得HPLC在食品领域的应用范围越加广阔。
　　参考文献：
　　[1]邬晨阳,韩小江.HPLC法同时测定牛奶中7种磺胺类药物和4种氟喹诺酮类兽药[J].中国卫生检验杂志，2012,21（02）：353-355.
　　[2] 武媛丽,杨本鹏,蔡文伟,张树珍. 利用高效液相色谱法测定转基因甘蔗中的低聚果糖[J].热带生物学报，2011,02（02）：101-106.
　　作者简介：
　　李子云（1982-），男，云南云龙人，职称：助理工程师，学历：本科，主要研究方向：产品质量检验。