尿液分析仪与显微镜检验尿液潜血的比较分析

　　尿液检验中，尿液潜血检查是一项必查内容，常用的检验方法有尿液分析仪潜血检验和显微镜检查尿液红细胞两种。传统方法为后者，但随着科技的进步，被尿液分析仪法逐渐以其简单、高效的特点所取代，但尿液分析仪也有其不够精确的缺点。本文通过对两种方法的切实比较，找出它们的优缺点，提出合理的使用建议。1　资料与方法1.1　一般资料　随机选取在我院进行尿检的患者尿液样本180例，男性112例，女性68例。15分钟内同时进行尿液分析仪和显微镜的检验。1.2　尿液分析仪1.2.1　仪器　DIRUIH-800型尿液化学分析仪，所用的试纸是同一公司的DIRUIH12-800，100人份/筒。1.2.2　原理　据多联试带上各模块与尿液成分发生化学反应后颜色变化的深浅来检测尿液中的某化学物质，如直接检测红细胞、白细胞的胞质内涵物，间接推断细胞的有无，这种方法叫干化学试纸法。若尿液中含有血红蛋白(Hb)，Hb中亚铁血红素所含的过氧化物酶样物便能够与试纸模块上的过氧化物产生反应分解释放新生态氧[O]，氧化底物邻甲苯胺成为邻联甲苯胺，试纸条上的模块颜色发生变化，由黄色变为草绿色，再变为深蓝色，由显色的强度可以得知尿液中Hb的浓度。1.2.3　检验方法　取10ml尿液样本，浸入尿试纸条1s后取出，在尿液分析仪上进行测定，自动打印结果。报告为：-、+/-、+、++、+++、++++。1.3　显微镜检验1.3.1　仪器　日本奥林巴斯（OLYMPUS）电镜显微镜。1.3.2原理　显微镜具有放大作用，用高倍镜观察RBC的形态并计数。直接观察尿沉渣中的红细胞，是对红细胞最真实最直观的反映[1]。1.3.3　检验方法　取10ml尿液样本，放入试管中，以1500r/min离心5min，去掉上清液，留取沉淀0.2ml。充分混匀，取约20μl滴在载玻片上，加盖玻片，制成2.0cm×2.0cm的标本在显微镜上观察。起初为避免漏掉有意义的物体，用低倍镜在教弱的光线下观察标本全貌，后用高倍镜仔细辨认细胞，寻找红细胞。镜下看到一个以上的红细胞为阳性。2　结果 
　　用显微镜和尿液分析仪同时对180分尿液样本进行潜血试验检查，结果如下：2.1　两种检验方法的阳性率比较　显微镜检验尿液样本阳性51例，阴性129例，阳性率为28.3%；尿液分析仪检验尿液样本阳性62例，阴性118例，阳性率为34.4%。具体见下表1。 
　　表1 两种检验方法的阳性率比较2.2　两种检验方法红细胞结果比较　以镜检有无红细胞作为尿液分析仪潜血检测判断结果，显微镜下观察尿沉渣中的红细胞。结果显示，尿液分析仪潜血检验的敏感度为92.16%，假阳性率为7.84%，假阴性率为11.63%。具体数据见下表2。 
　　表2 两种检验方法红细胞结果比较3　讨论3.1　显微镜检验　显微镜检验是传统的尿液检查方法。将经过离心沉淀后的尿有形成分，放在显微镜下进行镜检。这种检查方法比较落后，但准确率高。其缺点为费时费力、重复性差、不能定量、受人为因素影响大、无统一质控物、难以进行室内质控等[2]。3.2　尿液分析仪检验　尿液分析仪是一种采用光学、电子学、计算机技术等领域先进技术的组合式尿液分析装置。具体操作为对浸湿检测尿液既得结果的多联试纸发生的颜色反应进行扫描，将光信号转换成电信号，电子系统再将电信号接收，利用计算机处理并进行计算得到结果。此种利用的干化学反应原理，主要检测人体尿液中的PH值、亚硝酸盐、潜血、酮体、胆红素、尿胆素原、尿比重、白细胞、维生素、葡萄糖、蛋白质等指标。浸入尿液后的试条上的试纸块与试条筒上的标准色泽进行目测对比，能从颜色上分辨及定性。这种方法具有测定速度快、操作简便、重量轻及体积小的优点。由于操作中首先要离心，而离心速度过快，可破坏有形成分，离心速度过慢，当每毫升尿液中的红细胞在5000个以下时，沉渣中便可能根本找不到红细胞，使检验结果有误。因而在对检验结果有怀疑时，可用潜血反应证实。另外，使用尿液分析仪还有其它原因容易造成假阳性和假阴性。3.2.1　假阳性　概念：尿液分析仪潜血反应阳性，而镜检呈阴性。常见的原因有： 
　　①血红蛋白(Hb)：尿液分析仪与完整的红细胞和RBC溶解释放的Hb都能发生阳性反应，而显微镜只能观察到完整的红细胞。健康人尿中Hb含量很少几乎没有，尿液分析仪和显微镜检验都定性为阴性。而疾病时，尿中的Hb可能是发生血管内溶血，血浆Hb超过了结合珠蛋白的结合能力而产生的Hb也可能是尿路出血，红细胞在高渗或(和)低渗状态时破坏Hb逸出，此时尿液分析仪定性为阳性，而显微镜尿沉渣检验看不到完整红细胞，只有红细胞的碎片，所以定性为阴性。②肌红蛋白(Mb)：肌红蛋白(Mb)分子中含有的血红素基团具有过氧化物酶活性，尿液分析仪也能发生阳性反应。Mb主要存在于心肌和骨骼肌组织中，健康人人尿中含量甚微，不能检出，二者皆定性为阴性。而发生严重损伤心肌或骨骼肌的疾病时，血浆中Mb增高，经肾脏排泄后使尿液Mb含量增高，故尿液分析仪潜血反应呈阳性，而显微镜检红细胞仍为阴性[3]。③菌尿：泌尿系感染后，尿中存在细菌，大多数的革兰阴性菌和某些革兰阳性菌释放的过氧化物酶活性物质及繁殖过程中合成触酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶等物质，能使试带中的过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出游离氧，造成尿液分析仪检验阳性结果，而镜检红细胞为阴性。④其他物质：热不稳定酶、次氯酸盐等某些氧化性污染物，都能使试剂块发生颜色改变，出现潜血反应阳性，镜检阴性。⑤标本问题：长时间存放及高温使标本不新鲜，潜血反应阳性率可相对增高，而镜检红细胞却相应减少为阴性。有人建议尿液标本存放时间不超过4h[4]。⑥尿液分析仪：尿试纸条若过期后仍然使用、被污染、不妥善保存、操作方法不正确等，均可造成测试结果假阳性。分析仪灵敏度过高，“级差”范围太大，出现仪器测试为阳性，镜检测试红细胞为阴性，临床上又找不到任何导致血红蛋白尿原因的情况。3.2.2　假阴性　概念：显微镜检查阳性，而尿液分析仪潜血反应呈阴性。常见的原因有： 
　　①还原性物质：维生素C等大量还原性物质能竞争性夺取氧化反应产生的，抑制试纸模块的氧化反应使其不显色，尿液分析仪潜血检测阴性，而尿沉渣显微镜中可见红细胞为阳性。②高比重、高蛋白尿：使尿液分析仪试纸模块潜血检测的灵敏度降低，其潜血检测阴性，而镜检可见红细胞为阳性。③尿液中黏液成份增多：红细胞被大量黏液包裹起来,试剂接触不到Hb，使尿液分析仪潜血检测阴性，而镜检RBC阳性。 
　　总之，尿液分析仪具有无污染、快速、简便、高效、结果准确的优点，最适用于对初诊病人及健康检查使用，也可用于已确诊疾病的疗效观察，但容易产生假阳性和假阴性。而显微镜检查不但可以排除大多数的假阳性和假阴性，还可以发现各种异常RBC，是对尿液分析仪潜血检测的一个很好的补充。两者结合进行，达到对尿实验的必须指标进行全面的分析。