酶标仪的选择、自检和校准

一、酶标仪的选择

面对类型如此众多的酶标仪，实验室在选择时往往有难以适从的感觉。一般来说，用于酶免疫测定比色的酶标仪可分为普通酶标仪，多功能全自动酶标仪和全自动酶免疫分析系统等，普通酶标仪的功能基本上相当于一个微孑L板比色计，而多功能全自动酶标仪除了有微孔板比色功能外，还有酶标动力学，紫外乃至凝集等多种检测功能；全自动酶免疫分析系统则有试剂“开放”和“限定”之分，所谓试剂“开放”是指不同品牌的ELISA试剂均可用于该仪器，而试剂“限定”则必须使用仪器专用的酶免测定试剂。实验室在选择酶标仪时，一般应遵循这样几条原则：

1．根据工作需要去选择。切忌刻意去求功能多，因为一则如果仪器功能过多，易出故障，二则有些功能如酶标动力学或凝集等，可能根本就用不上；如果拟购置的酶标仪主要是用于定性测定，则不必要求完美的定量所需的软件系统。至于全自动酶免疫分析系统则对工作量比较大的血站或大型医院较为适用，对于日常工作量不太大的实验室，就无必要。

2．根据酶标仪的性能去选择。反应酶标仪性能的指标主要有测定波长范围，滤光片配置，检测速度，吸光度范围，线性范围，分辨率，准确度，精密度等。

3．根据自己实验室的财力去选择。酶标仪品种类型多，由于性能不一，价格自然也就相差较大，实验室可根据自己的财力去选择性能／价格比较为合适的酶标仪。

4．根据售后服务去选择。实验室仪器买了以后，就跟我们家里使用的家用电器一样，在使用过程中及使用一段时间之后，很可能就会有保修或维修方面的问题，因此一定要选择售后服务好的公司的酶标仪。

5．根据实验室人员的外语水平去选择。进口酶标仪现有不少已使用中文人机对话，对于英语上有困难的实验室，应尽可能选用此类酶标仪。

确定了选择原则以后，就是怎样去选择了。选择的步骤首先是要获取有关酶标仪的信息资料，一般有这样几条途径：

①向已购不同酶标仪的多家实验室同行咨询访问，获取最直接的使用效果的信息；

②酶标仪销售商的信息广告及介绍；

③权威机构的仪器评估报告。

获取了尽可能多的酶标仪信息资料后，就是对不同类型的酶标仪的性能指标进行比较，选择较为适合本实验室的一种或二，三种再向销售商作进一步的详细咨询了解，以决定选择哪一种进行自检。

二、酶标仪的自检和校准从上述所获的酶标仪性能的有关信息资料，基本上可以说是间接的，有了目标以后，如果还想获得对某一酶标仪的感性认识，可以对其进行自检，主要有下述几个方面。

(一)外观

酶标仪上应有仪器名称，型号，编号，生产厂家，出厂日期和电源电压；各调节旋钮，按键和开关均能正常工作，外表面无明显机械损伤；显示文字应清楚完整。

(二)酶标仪的稳定性(漂移)

选用492nm波长，在吸光度o．0A处，测定标称值为1．0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行)，记录仪器示值或均值，10min后再次记录仪器示值或均值，前后两次测定值之差不应超过±0．005A。

(三)吸光度测定的准确度

选用405，492和620 nm波长，以空气为参比，分别测定标称值为0．5和1．0A的光谱中性玻璃滤光片，用专用测试板代替酶标板，按仪器说明连续测定3次，按下式计算准确度：AA＝1／3(A、+A。+A3)—A：(A：为标准值)。

(四)吸光度测定的重复性

波长选择同(3)，在酶标板第一排加注空白溶液，第二排加入浓度为200rig／ml的重铬酸钾溶液，重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值，取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。按下式计算重复性：

（五）酶标仪的线性

选用540nm波长，将标称值o．5，1．0A中性滤光片分别放入专用测试板样本位置中，以空气为参比，各重复测定3次；然后将以上两片中性滤光片叠加后置于专用测试板的同一孔位中，重复测定3次。线性误差：

式中A1为第一片中性滤光片吸光度均值，A：为第二片中性滤光片吸光度均值，A1，2为两片中性滤光片叠加后的吸光度均值。

(六)测定速度的检定 ．

选用492nm波长，放人96孔酶标板进行测定，用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。

酶标仪除了在选购时，应尽可能自检外，在使用中也应定期检定，以保证酶标仪测定的有效性。

附：200ttg／ml重铬酸钾溶液的配制

将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中，在105±5℃下烘2h后，置于干燥器内冷却30min，在分析天平上准确称取o．2829g，置于100ml烧杯中，用o．05mol／L稀硫酸溶解后，移入500ml容量瓶中，以少量o．05mol／L稀硫酸洗烧杯3次，洗液并入容量瓶中，用0．05mol／L稀硫酸稀释至刻度线，摇匀。