是对差异显示技术(DD)实验和基因表达系列分析实验中实验方案A和B的补充实验
现代神经科学研究技术
作者:U.Windhorst & H. Johansson 翻译:赵志奇 陈军
试剂、试剂盒 | 溶液与缓冲液LoTEcDNA标签连接酶 |
---|
实验步骤 | 实验方案 A 和 B1.将切下并纯化的双标签连接为串联体:
2.在 16t℃ 下孵育 2 h。 3.将双标签串联体上取样于 8% 的聚丙稀酰胺凝胶的一个泳道,用 100bpladder 作为分子量标准,在室温、80℃ 电泳 3 h。 4.EB 染色。 5.将含有 400bp 或更大串联体的凝胶区切下。 6.如同实验方案 8 所描述的那样,从切下的凝胶片段中纯化 DNA 以分离双标签片段。但不要在 37°C 而是在 65℃ 下孵育,离心前不需干冰/乙醇冰浴。 7.沉淀后,用 70% 乙醇冲洗沉淀物 2 次,晾干后重新溶于 40ul 的 LoTE 中 展开 |
---|