发布时间:2019-09-13 10:31 原文链接: 常见故障及维修

1.HPLC对流动相的一般要求


流动相就比如人体的血液,其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。


△应该使用HPLC级的溶剂,不能互相混溶的溶剂不可以直接切换!一般在水相和与其不混溶的溶剂切换时,使用异丙醇作为过渡溶剂。


注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的最低波长,低于该波长后,溶剂会有很强的紫外吸收,从而影响极限的稳定性、干扰对所分析物质的检测。


 HPLC所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。建议每天更换新鲜的水。长期不用时,必须把使用水的管路用有机溶剂置换,防止长霉。


仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。


仪器长期不用时,不建议使用纯乙腈封存。因为乙腈有生成聚合物的趋势。建议使用甲醇、甲醇/水或乙腈/水封存。


当有流路堵塞时,可以尝试将之反接后冲洗。污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命,并且影响泵和系统的的性能。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH 4 至7) 中尤其如此。


①过滤器

检查溶剂过滤器

查看过滤器是否变色(尤其是盛放水相的溶剂瓶)–拧开脱气机出口或比例阀入口管线,此时溶剂会因为重力流出。当脱气机或溶剂过滤头堵塞时,溶剂会流出不畅或不流出–临时取下过滤器,检查柱前压力是否正常。


②清洁溶剂过滤器

将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下,用水冲洗残留之溶剂,然后将过滤器放在装有浓硝酸(35%左右)的烧杯里浸一小时。用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器至水为中性可以把过滤器放在塑料烧杯内超声清洗。但是不可使用玻璃器皿将过滤器重新装好。


建议:定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶(可以高温灭菌),每三个月至少清洗一次


2.泵的使用要点

将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面或较高处。当在四元泵上使用盐溶液或有机溶剂时,建议将盐溶液接在下面的梯度阀口上,将有机溶剂接在上面的梯度阀口上,有机溶剂通道最好在水或盐溶液通道的正上面。建议用水定期冲洗所有MCGV通道除去可能在阀口析出的盐结晶。


操作泵之前,用至少两个体积(标准脱气机30mL,对微脱气机10mL)冲洗真空脱气机,特别是当泵关闭了一段时间后(例如,过夜),以及在通道中使用挥发性混合溶剂时,防止溶剂瓶内的玻璃滤头(过滤器)堵塞及长菌,当滤头表面有黑色或黄色污染层说明发生了堵塞,应立即清洗或更换。


定期检查排液阀的过滤白头。检