QuEChERS样品前处理_液相_省略_中66种有机磷农药残留量方法评估

摘要: 比较了两种版本QuEChERS 方法( 即发表于2003 年未加缓冲盐的原创QuEChERS 方法及加乙酸盐缓冲液的AOAC 2007. 01 方法) 提取蔬菜中66 种有机磷农药( OPPS) 的有效性; 考察了乙二胺-N-丙基硅烷( PSA) 及C18 吸附剂对66 种OPPS 的吸附作用; 以提取后添加法评估了青花菜、番茄、枝豆、萝卜、大葱基质中各目标物液相色谱-串联质谱( LC-MS /MS) 分析的基质效应。结果表明，加入乙酸盐缓冲液的QuEChERS 方法对一些OPPS 有较高及较稳定的回收率; PSA 及C18 吸附剂可吸附二溴磷，QuEChERS 样品前处理方法不适于二溴磷分析; 5 种样品基质中青花菜的基质效应最大。据此采用AOAC 2007. 01 方法并优化LC-MS /MS 分析参数，一次进样监测132 对离子对( 每个化合物2 对离子对) 分析蔬菜中66 种OPPS 残留量，除二溴磷外， 65 种OPPS 在5 种基质( 青花菜、番茄、枝豆、萝卜、大葱) 、3 个添加水平( 10、40、80 μg /kg) 的回收率为55%～ 122%，相对标准偏差为1. 6%～ 18%，定量限( 以信噪比( S /N) ≥10 计) 为0. 1 ～ 8 μg /kg。以上结果说明该法有效、耐用、灵敏，符合法规残留限量监测要求。

    有机磷农药因具有广谱、高效、降解快等特点而成为世界上应用最广泛的农药之一，其主要作用机制为抑制乙酰胆碱酯酶的活性，具有神经毒性; 一些有机磷农药还有致突变、致癌等毒性［1］。世界各国均制定了食品中有机磷农药残留限量法规［2］; 对于未制定最大残留限量的农业化学品及未注册的农药，日本及欧盟所设定的最大残留限量为10 μg /kg或更低［2，3］。
蔬菜中有机磷农药的多残留测定方法有气相色谱法( GC) ［1，4，5］、气相色谱-质谱法( GC-MS) ［6，7］、气相色谱-串联质谱法( GC-MS /MS) ［3，8，9］、液相色谱-串联质谱法( LC-MS /MS) ［3，7， 10 －15］。有机磷农药品种多，各个农药的物理化学性质差别很大［16］，一些化合物的相对分子质量小、极性强、热稳定性差，不宜采用GC 分析。Mol 等［10］采用LC-MS /MS 测定
果蔬中6 种不适于GC 分析的有机磷农药，文献［3，7， 11 －13］采用LC-MS /MS 测定果蔬中各类农药多残留，其中包含的有机磷农药最多为22 种。
    GB /T 20769-2008［14］虽包含所有有机磷农药，但有13 种只能定性而未能定量，有20 种检出限高于10μg /kg。叶瑞洪等［15］采用LC-MS /MS 测定果蔬及其他基质中61 种有机磷农药多残留，需2 次进样分析，增加了仪器分析时间及仪器污染。
    果蔬中农药多残留检测样品前处理的传统方法为乙腈提取、NaCl 盐析分层、固相萃取小柱净化［14］。QuEChERS 样品前处理方法于2003 年由Anastassiades 等［17］提出，与传统方法不同的是，采用MgSO4盐析分层和分散固相萃取( DSPE) 净化;2005 年该方法又进行了修改，针对一些酸碱敏感农药，引入了乙酸缓冲盐提取体系［18］，该修改后的方法于2007 年成为美国官方分析方法( AOAC2007. 01) ［7］; 之后，欧盟又于2008 年发布了其官方分析方法EN15662，该QuEChERS 方法采用了较弱酸性的柠檬酸缓冲盐为提取体系［19］。基质效应是LC-MS /MS 多残留分析可靠定量的最大难题，又称为LC-MS /MS 定量方法的“Achilles heel”［20， 21］，减小样品的基质效应对获得准确的回收率至关重要。对基质效应进行评估，可指导方法改进并采取有效的基质效应补偿措施，但目前评估基质效应的文献较少，仅查阅到两篇( 文献［3， 19］) 。
    本文比较了两种QuEChERS 样品前处理方法提取蔬菜中66 种有机磷农药的有效性，即未加入缓冲盐的原创QuEChERS 方法［17］及加入乙酸盐缓冲液的AOAC 2007. 01 方法［7］; 考察了乙二胺-N-丙基硅烷( PSA) 及C18 吸附剂对66 种有机磷农药的吸附作用; 以提取后添加法［20， 21］考察了青花菜、番茄、枝豆、萝卜、大葱基质中各目标物LC-MS /MS 分析的基质效应。通过优化LC-MS /MS 分析参数以提高灵敏度，应用仪器工作软件以按时间表的多反应监测( Scheduled MRM) 采集模式，一次进样即可完成66 种化合物的定性定量分析。