原理
植物的组织中有一种淀粉磷酸化酶,能利用1—磷酸葡萄糖合成淀粉,生成的淀粉可用I2 —KI染色检出。
仪器药品
水浴锅 研钵
移液管 1%1—磷酸葡萄糖
0.1mol/L柠檬酸 0.2mol/L磷酸缓冲液,pH6.5,(见附表2)。
I2 —KI溶液:溶解1.5g KI于少量蒸馏水中,加入结晶碘0.3g,待溶解后,稀释成100ml。
操作步骤
1.取马铃薯块茎一个,削去皮,切成小块,称取10g,于研钵中加石英砂少许,用10ml 0.1mol/L柠檬酸—0.2mol/L磷酸缓冲溶液研磨成匀浆。
2.用纱布滤取汁液,于3500r/min离心15分钟,以除去淀粉,即为粗制酶液。
3.取小试管2支,分别加入1%1椓姿崞咸烟—1ml,再于1管中加入1ml粗制酶液,另1管中加入已经煮沸15分钟的粗制酶液。摇匀试管,立即各吸取1滴于白瓷板上,分别加1滴I2 —KI溶液,测试有无淀粉存在。
4.以后每隔10分钟,取试管中混合液1滴,检查淀粉的生成。比较煮沸能否使酶失活?
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