液相色谱仪流动相溶剂的选择

液相色谱仪分析选择流动相时，溶剂极性是选择的重要依据。

一、溶剂强度：

溶剂强度表示溶剂对样品的洗脱能力，决定于溶剂与溶质分子之间的作用力，是描述色谱性能的主要指标。目前还没有一个统一标准来描述不同类型液相色谱体系中的溶剂强度，而是采用相对极性和溶解度等参数作为溶剂强度指标。

分子之间的相互作用有静电作用、诱导作用、色散作用和氢键作用。某一溶质与其它分子相互作用的大小程度可以用极性大小表示。溶质极性越大，与其它分子的作用力越大。极性溶剂容易吸收和溶解极性物质。

溶剂强度与流动相和固定相的极性有关。在正相色谱中，溶剂极性越大，洗脱能力越大。在反相色谱中，溶剂极性越大，洗脱能力越小。

一般来说，改变溶剂比例可以调节流动相的极性，从而使组分的容量因子在合适的范围内。

二、流动相的优化：

流动相的优化主要是考察流动相组成对保留时间、分离因子和分离度等参数的影响。

使用混合溶剂zui大优点是可以获得zui佳分离选择性，保持流动相低粘度，从而保证高柱效。

吸附色谱中混合溶剂的选择原则是混合溶剂中极性强的组分含量大或小时有zui大α值，能与溶质发生氢键作用的溶剂有较好的分离选择性。

三、流动相的选择步骤：

  1、选择具有合适物理性质的溶剂，如沸点、粘度和紫外截止波长等。

  2、选择合适洗脱强度的溶剂。对于简单样品，2≤k≤5。对于复杂样品，0.5≤k≤20。

  3、改变溶剂的选择性，使被分离组分具有较高α值。

四、选择流动相时应注意的问题：

  1、尽量使用高纯度溶剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。不纯的溶剂会引起基线不稳，产生伪峰。

  2、避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降和损坏色谱柱，如使固定液溶解流失和酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。

  3、样品在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。

  4、流动相粘度低（粘度适中）。若使用高粘度溶剂，会增高压力，不利于分离。常用低粘度溶剂有丙酮、甲醇和乙腈等。但粘度过低的溶剂也不宜采用，如戊烷等，它们容易在色谱柱和检测器内形成气泡，影响分离。

  5、化学稳定性好。

  6、流动相应满足检测器的要求。

对于紫外吸收检测器，应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长长。所谓溶剂的紫外截止波长是指当小于截止波长的辐射通过溶剂时，溶剂对此辐射产生强烈吸收，此时溶剂被看作是光学不透明的，会严重干扰组分的吸收测量。

对于示差折光检测器，要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相，以达到zui高灵敏度。