4.AET1而不是RACK1A以及eIF3h直接和OsARF mRNA结合
AET1与RACK1A以及eIF3h的结合是否和mRNA相关？RIP测序（云序生物提供）帮助研究者快速的明确哪些mRNA能够和蛋白AET1结合，分析结果显示高温条件下545个mRNA分子只在野生型水稻株当中和AET1结合，而仅仅208个mRNA分子只在AET1突变植物当中和AET1蛋白结合，50个基因的mRNA分子在两个样本当中均发生结合。KEGG结果显示高温条件下野生型水稻株当中和AET1结合的mRNA的来源基因往往和光合作用以及代谢过程相关，而高温条件下只在AET1突变株当中结合的mRNA往往和氨基酸代谢通路相关。这些结果均显示AET1的功能丧失可以通过tRNA的表达分布的失衡从而影响蛋白的合成。比较有趣的是，热图提示高温条件下和植物生长素（auxin）相关的基因在野生型和突变型当中有明显的改变，OsARF基因发生了明显富集，暗示AET1基因可能是通过改变植物生长素信号通路来应对高温产生应答反应。
对RIP-seq结果进行进一步验证，RIP qPCR（云序生物可提供）结果显示OsARF19基因的上游开放阅读框（uORF）和下游主要开放阅读框（mORF）被明显富集，高温条件下的野生型和AET1突变型这两者的富集程度有所区别。之前的报道显示拟南芥当中，许多OsARF mRNA包含可以依赖eIF3h而抑制翻译的uORFs，作者推测在OsARFs基因当中的uORFs对mORFs的抑制作用也存在，通过预测，RIP-qPCR的进一步验证表明OsARF23 mRNA含有独特的“start-stop”uORF结构，AET1能够在高温环境下通过OsARF mRNA来调控auxin信号通路。最终结果证明，是AET1，而不是RACK1A或者eIF3h广泛的结合OsARF mRNA来调控OsARF mRNA的翻译过程。
图4. AET1与生长素响应因子的mRNA结合
5.AET1和RACK1A以及eIF3h共同调控OsARF mRNA的翻译效率
高温条件下OsARF19和OsARF23翻译效率均下降，通过CRISPR/Cas9对RACK1A eIF3h基因进行突变发现，相关基因有明显下降，植物的生长出现明显的缺陷，比如高度下降、种子产率低等等问题。AET1、eIF3h、RACK1A蛋白表达水平和mRNA转录水平保持一致，结果表明AET1蛋白可以明显的降低OsARF23蛋白的翻译效率，同时RACK1A以及eIF3h的敲除均能够引起OsARF23的表达下降。AET1突变水稻株对于外源性的auxin并不敏感，并且AET1基因使水稻对于高温有更好的适应能力。
图5. AET1与RACK1A和eIF3h一起调节OsARF mRNA的翻译效率
总结：
植物是无梗生物，因此进化出许多适应环境温度变化的策略。在本研究中，作者发现了一种名为AET1的鸟苷酰转移酶，它可以结合ER(内质网)中的RACK1A和elF3h蛋白，并与OsARF
mRNAs紧密结合，从而调控相应的蛋白的翻译，使水稻对于高温有更好的适应能力。
