淋病是由淋病奈瑟氏菌引起的最常见的性传播疾病,准确、及时诊断淋病对治疗和预防控制该病传播均重要意义。虽然淋病的实验室检测方法有培养法、免疫学方法和分子生物学方法等,但培养法仍是迄今为止最可靠的并可做为常规实验和药敏测定的方法[1]。而淋病奈瑟氏菌营养要求较高,一般不易培养,而且对外环境耐受性差,极易死亡。因此,选择敏感和特异性较好又可行的培养方法,尽可能地提高该菌的分离率是急需解决和探讨的问题。为此,我们从1998年5月~11月同时使用3种培养基对79份临床诊断为淋病的妇女子宫内膜拭子作分离培养,现报告如下。
1 材料和方法
1.1 培养基 桂敏淋球菌由广西壮族自治区皮肤病防治研究所提供,营养琼脂购自浙江省军区后勤部卫生防疫检验所。按传统方法用牛肉汤、兔血分别制成巧克力平板和血平板。
1.2 采样、细菌分离及鉴定 按文献[2]要求进行。取样后立即将标本同时接种桂敏培养基、血平板、巧克力平板,放置潮湿烛缸内,35℃培养24小时,取无色透明的菌落做革兰氏染色。镜检并做氧化酶试验,如为氧化酶阳性的革兰氏阴性双球菌,则再做糖发酵试验进行鉴定。
2 结果
2.1 淋病奈瑟氏菌检出情况 79份样品中从桂敏培养基分离到46株淋病奈瑟氏菌,检出率为58.2%;而血平板、巧克力平板则检出率一致,均为51.9%(41/79),前者稍高于后二者,但三者无显著差异。(P>0.05),按下表检出情况进行统计比较,显示血平板、巧克力平板与桂敏培养基符合率达83.5%。
3种培养基检出淋病奈瑟氏菌的情况比较
桂敏培养基 |
合计 |
|||
+ |
- |
|||
巧克力血平板 |
+ |
37 |
4 |
41 |
- |
9 |
29 |
38 |
|
合计 |
46 |
33 |
79 |
2.2 3种培养基具体分离情况 79份标本中有37份在桂敏、巧克力和血平板上均分离出淋病奈瑟氏菌,有9份标本只在桂敏培养基上分离出该菌,而在巧克力和血平板上均为阴性结果;另有4份在巧克力、血平板上培养出该菌,而在桂敏培养基上却为阴性。因此,用这3种培养基,79份标本实际有50份检出了淋病奈瑟氏菌,总检出率为63.3%。
3 讨论
本实验结果表明单用桂敏培养基,淋病奈瑟氏菌检出率为58.2%;稍高于巧克力和血平板(51.9%)。但均低于联合(桂敏+血平板或巧克力)培养检出率63.3%。实验室检测时也发现淋病奈瑟氏菌在血平板或巧克力平板上的菌落有较明显特点,易于辩认,菌体经染色后具有比较典型的奈瑟氏菌形态特征。因此,我们认为对临床诊断为淋病的患者取样培养,应同时使用两种培养基(如桂敏+血平板或巧克力平板)进行分离培养,不仅可以提高检出率,而且可比较快速又准确地发出临床三级检验报告,对及时诊治患者,防止淋病传播均有重要意义。
同时我们在实验检测中也发现该菌的检出率除与使用不同种类培养基有关外,还与样品的采集有较大关系,采样时应注意:(1)清洗尿道口,只能用生理盐水或温无菌水,不能用消毒剂和润滑剂;(2)所采的拭子最好直接接种在预温过的培养基上;③在运送标本过程中不能以冰排(块)保存。
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