核糖体的离心分离

1)概述

生物体细胞中除极少数细胞（如精子细胞）外，几乎所有细胞都含有核糖体（ribosome）。核糖体或成群或单个地分布在胞质中或附着在某些膜上（如内质网膜）。
电镜观察到核糖体是没有包膜的电子致密颗粒，呈圆或椭圆形，平均直径200A，哺乳动物的真核细胞中核糖体沉降系数为80S，分子量为500万。在原核细胞中核糖体沉降系数为70S，分子量为380万。
核糖体的主要成分是核糖核酸（RNA）和蛋白质，构成核糖体的核酸为核糖体核糖核酸（rRNA），分子量很大，约占细胞内RNA总量的75%以上。rRNA与蛋白质结合成核糖体。核糖体中rRNA与蛋白质的含量大致相等，但在蛋白质合成中所起的作用不同。rRNA使mRNA与tRNA的相互作用稳定，而核蛋白颗粒上的蛋白质提供蛋白质合成过程中所需要的酶。
目前已经知道在真核细胞中rRNA是在核仁内合成的，核仁中含有较大的rRNA的前体分子即45S RNA。核仁的原纤维可能就是45S RNA的形态表现。45SRNA可裂解为28S RNA和18S RNA，分别与蛋白质结合成为核糖体的大，小亚基，它们是核仁区颗粒的形态基础，亚单位进入胞质后，可暂时储存在胞质中，当需要合成蛋白质时，这些亚单位就组合成核糖体。在蛋白质合成完毕后，核糖体再分解成为亚单位储存。

2）核糖体组成模式：

3）核糖体离心分离方法简介

1.分离原核细胞70S核糖体亚基：
大亚基50S
小亚基30S
转头：甩平转头日立P65ST或P56ST
梯度：10%-40%蔗糖线性梯度
方法：速度--区带密度梯度离心法
离心参数50，000rpm，2.5小时，4℃

2.分离真核细胞内80S核糖体亚基
大亚基60S
小亚基40S
转头：P40ST（6*13ml）
梯度：10%～30% 蔗糖线性梯度
方法：速率区带密度梯度离心
离心参数：40000rpm，4.5小时，4℃。

3.分离原核细胞内70S核糖体亚基
转头：P56ST
梯度：15%～40%蔗糖线性梯度。
方法：等密度离心法。
离心参数：48,000rpm，6小时，4℃