徕卡荧光显微镜工作的性能特点

般显微镜的光学元件，大都采用普通光学玻璃制造。它们对3000A以上的长波紫外线和可见光能很好地透过，因此完满足一般徕卡荧光显微术的要求，只是在个别情况下，当标本必须用短波紫外线激发时，才需用石英玻璃或特种玻璃的聚光镜和反射镜，这时载玻片也必须是特制的，但在透射光显微术时，物镜和目镜只需用普通光学玻璃即可。如在反射光显微术时，则物镜必须能透过紫外光的。现就徕卡荧光显微术的特点，介绍一下徕卡荧光显微境的性能特点。

（1）徕卡反光镜其反光层以镀铝为好，因为铝对紫外光和可见光的紫蓝区吸收少，反射率达90％以上，而镀银的反射率只达70％，另外应采用外反射，以避免光线来回经过玻璃而引起损失。同时要使用平面反光镜而不使用凹面反光镜，这样使光源射来的光线基本平行。

（2）徕卡聚光器聚光器有三种；明场聚光器、暗场聚光器和相衬荧光聚光器。

①明场聚光器假如标本可用较长的光波来激发成荧光，则可用徕卡阿贝聚光镜，而微弱的荧光或须用短波紫外光作光源的话，则必须用石英玻璃和荧石玻璃等材料制作的聚光镜，否则，紫外光将会全部被普通玻璃所吸收。另外，由于徕卡油浸镜头的香柏油会自发荧光，会扰乱观察，所以不宜使用，必须使用不发荧光的化学纯甘油或檀香油等。

②徕卡暗场聚光器由于使用暗场聚光器时，激发光不直接进入物镜，而不致直接射入眼中，这样激发滤片可以大大减薄，从而显著地增大了激发光的强度，抑制滤片也可以很薄，甚至可以不用。

由于徕卡暗场荧光显微术时，它的背景是黑的，固增强了荧光图象的亮度和反衬度，这样，不仅提高了图象的质量、观察舒适，而且还能观察出明场观察时分辨不出来的细微颗粒，因此具有超显微术的意义。

（3）徕卡相称荧光聚光镜它与普通聚光器相同，只是它的透镜能透过紫外光，如与相衬物镜配合使用，则可作相衬显微术，也可作荧光显微术，在同时有两个光源（一个是汞灯作为荧光激发光，一个是白炽灯作为相衬照明）或者是一个光源通过适当安排分成两条光路。在这样的情况下，则可同时进行相衬，荧光联合观察，既能看到荧光图象，又能看到相衬图形，在某些情况下，有助于目标的定位和结果的正确判断。