Apogee纳米流式在益生菌全球标杆企业新成果计数分析的应用
随着益生菌相关前沿研究快速发展，人们生活水平显著提升，益生菌消费市场发展速度极快。实现益生菌快速精准计数，对于增长迅速的益生菌市场需求，严格监控益生菌产品质量，赢得消费者信任，至关重要。
近日杜邦美国威斯康星州的麦迪逊工厂营养与生物科技业务部发表益生菌精准计数前沿技术研究成果[1]。
传统益生菌计数方式为平板计数法。相对来说，该方法由于计数误差大（CV：15-35%），培养周期长（2-3天），耗费人力多等问题，已很难满足益生菌类产品质量监控等分析计数需求。益生菌全球标杆企业—杜邦公司，近日发表的分析数据显示，相对平板技术法，流式分析法和数字PCR法（ddPCR）可以更快更稳定精准地完成益生菌计数分析（包括总菌，活菌和死菌计数分析），这两种方法均可在几小时内完成大量益生菌计数分析（图1和2），并且计数稳定性有显著改善，针对不同菌种大量数据分析显示，这两种计数方法变异系数基本可控制在5%以内。其中，分析单个样品速度更快（<3min/样品）的流式分析益生菌方案，采用英国Apogee
Flow公司专注纳米颗粒分析的Apogee纳米流式来完成相关分析工作，已在杜邦公司全球实验室成熟运行多年，也为益生菌相关流式分析ISO标准建立做出了积极贡献。而此次文章提出的ddPCR分析法，则进一步补充了益生菌精准计数，特异菌种精准分析的相关方案。
杜邦营养与健康事业部是全球益生菌科技、研究和生产的领导者，提供最广泛的具有临床文献支持的菌株及益生菌菌产品组合。杜邦公司此次发表的益生菌前沿精准分析相关方案，不仅再一次显示出杜邦公司在益生菌生产研究方面的领导地位，更是为行业内益生菌快速精准计数分析提供了重要参考方案。
图1，平板计数法，流式分析法，ddPCR法简要分析流程
图2，A平板计数法，B ddPCR法，C流式分析法代表数据
图3，益生菌不同计数方法，变异系数对比数据
Apogee
Flow纳米流式专注纳米颗粒精准分析，凭借极佳的70nm散射光灵敏度，极高的10nm分辨率，精准稳定的绝对计数，多色荧光标记以及高通量自动上样等，在纳米颗粒及益生菌等小颗粒分析方面处于领导地位。在微生物小颗粒分析方面，不仅为杜邦公司全球实验室提供益生菌快速精准分析方案，同样可为致病微生物，食品微生物，微生物菌群多样性等微生物分析工作提供快速精准分析方案，如美国FDA将其应用于致病微生物快速精准分析[2]，中国计量科学研究院将其应用于奶制品致病菌快速精准分析[3]。
参考资料：
1，Hansen S J Z, Tang P, Kiefer A, et al. Droplet digital PCR is an improved alternative method for high-quality enumeration of viable probiotic strains[J]. Frontiers in Microbiology, 2020, 10: 3025.
2，Williams A J, Cooper W M, Ramsaroop S, et al. Rapid Flow Cytometry Detection of a Single Viable Escherichia coli O157: H7 Cell in Raw Spinach Using a Simplified Sample Preparation Technique[J]. Frontiers in Microbiology, 2017, 8: 1493
3，Wang B, Liu S, Sui Z, et al. Rapid Flow Cytometric Detection of Single Viable Salmonella Cells in Milk Powder[J]. Foodborne Pathogens and Disease, 2020.
4，http://www.bio-gene.com.cn/NewsView.asp?id=3016
