常规情况下,外周血中,有形的血细胞主要包括以下三种:血小板、红细胞、白细胞。其中白细胞在常规情况下,又被分为以下五种:中性粒白细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞,而检测这五个细胞的就被称之为:五分类血细胞分析仪。
那么五分类血细胞分析仪是根据什么原理来进行分类的呢?
目前主要是根据细胞的特性进行分类,例如细胞大小、核浆比例、对某些化学试剂或荧光染液的敏感程度、细胞内细胞器的复杂程度来进行区分。
根据以上五大白细胞的特性,总结出五分类血球分析仪的分类原理:
1、利用这五类细胞对不同化学试剂的溶解性质不同,并结合白细胞直方图细胞三分群的电阻抗法检测原理,将白细胞分为五类;
2、四角度照射法,90°角区分分叶核细胞和单核细胞得到两类∶中性粒细胞和嗜酸性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞及嗜碱性粒细胞﹔用90·偏振区分∶嗜酸性粒细胞和中性粒细胞﹔用o°和10°通过核质比及细胞大小,将嗜碱性粒细胞从淋巴和单核细胞群中分开;用o°根据大小区分单核细胞和淋巴细胞;
3、细胞化学体积法∶化学性溶血剂会使红细胞破坏并释放血红蛋白,也会使白细胞表面产生小孔,细胞内浆质外溢,细胞失水皱缩,细胞膜紧贴于核上。测定时细胞的体积大小是核、颗粒和膜成分的总和,白细胞种类不同、分化程度不同所含的胞浆颗粒、核结构以及大小也不同。运用V.C.S三种探针,在流式通道的某一位点,对通过的单列白细胞,进行逐个的、同时的、三重的检测,以及三维分析,以确定其亚群性质;
√-低频波( Volume ):采用低频电流准确分析细胞体积;
c-高频波(Conductivity):采样高频电流分析细胞核型;
s-激光( Scatter ) :该激光束可穿透细胞,探测细胞内核分叶状况和胞浆中颗粒情况,分析细胞的颗粒特性。
4、利用半导体激光散射和核酸荧光染色技术;前向散射光:检测细胞的大小;侧向散射光∶检测细胞内细胞内容物的复杂程度;侧向荧光:检测细胞核酸的多少。利用这三个参数将白细胞分为五类。
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