照高效液相色谱法(通则0512)测定。
供试品溶液取本品约50mg,精密称定,置50ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,精密量取5ml,置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀对照品溶液取灰黄霉素对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液。系统适用性溶液取灰黄霉素对照品适量,加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液乙腈-甲醇(57:38:5)(用磷酸调节pH值至3.7±0.2)为流动相;检测波长为254nm;进样体积10l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,去氢灰黄霉素峰(相对保留时间约为1.1)与灰黄霉素峰间的分离度应符合要求测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算。
