发布时间:2020-05-22 16:16 原文链接: 溶藻弧菌核酸检测的原理是什么

  溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)为海水中常见嗜盐性弧菌,1973年开始明确对人类致病,易污染食物,引起腹泻及创伤部位感染。溶藻弧菌可导致食物中毒,其主要症状为不同程度的头晕、乏力和腹痛、腹泻等消化道症状。也可导致肠道外感染,如经伤口感染可导致人体引起蜂窝组织炎,游泳者为中耳炎,严重者可致脓毒症。

  【检验原理】

  等温核酸体外扩增技术有多种形式,包括链置换扩增(Strand Displacement Amplification,SDA)、转录介导扩增(Transcription-mediated Amplification,TMA)、环介导扩增(Loop-mediated Isothermal Amplification, LAMP)、滚环扩增(Rolling Circles Amplification, RCA)和依赖解旋酶扩增(Helicase-Dependent Amplification, HDA),重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)等。 实时荧光核酸恒温扩增检测技术是将新一代的核酸恒温扩增技术和实时荧光检测技术相结合的一种新型核酸检测技术。该技术具有高灵敏度、高特异性、低污染、反应稳定等优点。

  采用恒温扩增技术,通过体温扩增荧光检测技术(Enhanced Recombinase Amplification, ERA),根据溶藻弧菌gyr B基因序列,设计一套引物,设计引物和荧光探针建立的检测溶藻弧菌的核酸荧光定量扩增方法。大量扩增后的产物能够与带有荧光标记的探针相结合,从而产生特定的荧光。该荧光信号可由荧光检测仪器实时捕获,直观反映扩增循环情况。 样品中如果具有微量的溶藻弧菌DNA存在时,则能够通过大量扩增后激发荧光信号,样本显示为阳性;如果样本中不含有溶藻弧菌,仪器会判读为阴性。

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