铜绿假单胞菌外毒素A的生产、分离纯化和鉴定

摘要　通过对培养基组成、种子活化、接种量和培养条件进行优化,使铜绿假单胞菌外毒素A(PE)产量达到每毫升5～10μg 和192 小鼠LD50 ,不低于国外报道水平。经二步纯化,PE 蛋白回收率为33. 33 %(PE) 和16. 67 %(LD50 ) ,提纯系数为438. 5 (PE) 或218. 5 (LD50 ) ,SDSOPAGE 呈现一条带,相对分子质量为66 000 ,琼脂糖扩散鉴定与兔抗PE 产生一条沉淀线,小鼠半数致死量为0. 16μg , PE 对小鼠成纤维母细胞L929 有毒性作用,能被兔抗PE 血清所中和。