中间做过strip吗？是不是strip的太剧烈了，把膜上的蛋白完全都剥掉了。
尝试用一些温和的剥脱方法，降低温度，降低SDS浓度和处理时间可能会有改善。
另外如果膜上蛋白敏感，有降解等因素，也可能会导致检测不到。需要确认一下。
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