发布时间:2022-04-22 09:17 原文链接: westernblot跑不出条带,是什么原因

  转膜的问题,膜和胶之间有气泡等。
  Westernblot法即是一种将电泳与KIJSA结合起来的技术,可分为电泳、转印、酶免疫测定3个阶段。Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性,是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。
  生物大分子印迹法实际上是凝胶电泳技术、固定化技术及分子亲和技术三者融为一体的综合性技术,其核心在于把凝胶电泳已分离的区带转移并印迹于固定化纸上。
  生物大分子印迹法始创于1975年,内苏格兰爱丁堡大学E.M.Southern首先提出。他将限制酶切后的DNA片段先进行琼脂糖凝胶电泳,把一张硝酸纤维素纸放在凝胶上,利用毛细作用原位凝胶中的DNA八片段转移到硝酸纤维素纸上使之固定化。由于这种技术类似用吸干作品上的墨迹,使吸墨纸染上墨迹而被称为印迹法(blotting)。
  1979年,Towbin等人利用电洗脱装置作为印迹动力,首先把Westernblot法用于抗原捡出,并称之为免疫印迹法(immunoblotting)。对应于Southern(DNA分子杂交)、NoHhern(RNA分子杂交)。
  1981年Burnette把免疫印迹法称为Western blotting即蛋白质印迹法-Westernblot法。

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