液相色谱检测器保养维护

液相色谱检测器保养维护。

1.检测器性质概述

检测器是液相色谱系统的“眼睛”，测量离开柱的样品的浓度或质量。光电检测器测量柱流出物的光吸收、荧光和折光率的变化。电化学和电导检测器溶液的变化。特殊的样品用特殊的检测器。不合适的检测器测得的结果也不可靠。

2.常出现的UV检测器故障

故障类型 故障率（%）

噪音 26

漂移 12

灵敏度 9

灯寿命 24

气泡 7 在检测生物样品时可能为主要故障

池污染 6

其他 8

无故障 11

3.具体故障与解决

a.灯故障主要是灯失灵或能量衰减以及灯引起基线噪音。

除EC外，检测器中灯是重要部件。灯失灵，明显地引起检测器信号总下降。多数检测器有观察孔或指示器，由此可看见灯工作的情形。但是不可以直接观察紫外灯，因为紫外线会损伤眼睛。

基线噪音这是灯失灵更普遍的故障。氘灯打开后有30分钟的zui大噪音，所以每次使用前至少预热30分钟。

换灯时要注意不能在灯上留下指痕。因为未擦去的指痕在开灯后会引起灯表面永久性的损害。请用软布或专用擦镜纸握住灯，在开灯之前用棉签蘸取甲醇擦去。新装上后至少要点燃1小时以上，才能开始定量分析。

b.池故障与解决

气泡是zui常见故障。瞬间而过的气泡会在色谱图上出现长噪音尖峰。若感觉到有气泡，当将等调整670nm左右，戴上防护眼镜便可以看到池内有一个圆环，并不是清晰地绿色图像。流动相脱气不足会产生气泡，池污染会使得故障加重。用充分脱气的流动相可以带走气泡，或用强溶剂通过系统。在正相和反向系统转换的时候一定要过渡。

检测器阻塞有下列现象：系统压力升高，松开检测器进口的接头压力降至正常水平。检测器部分易发生的地方为进口管道或热交换器、池本身和出口管道。用一般的净化的溶剂去掉阻塞可能不奏效但可以试试。若是厂家标明耐高压，可用泵打溶剂反冲，常可以去掉堵塞。压力不要超过6MPa.正常的池不可用此法，一般情况请咨询厂家的维护工程师较好。

c.池阻塞和污染

如确定是池堵塞，可用注射器回抽溶剂或用泵反冲（耐高压），一般能疏通。通常此故障较少发生，而污染是经常发生的。池污染一般是色谱图的噪音增大，灵敏度降低甚至不出峰，也提高了气泡的故障率。清洗池前向拆去柱和排空管道，准备好防护用品，如眼睛、围裙、橡胶手套等。池进出口都接上细管径的聚乙烯管。进口管上接10ml的注射器，出口管没入异丙醇中。清洗程序如下：回抽10ml异丙醇通过池去掉流动相残留。 回抽10ml蒸馏水 回抽10ml6mol/L硝酸，通过池去掉沉积物，此步应小心，要备有防止酸溢出的应急措施 回抽20ml蒸馏水 至少用100mlHPLC级别的水正向通过池。

d.池渗漏

可能发生在接头、池窗的密封垫上，也可能发生在样品池或参比池的一侧，或者是石英窗破裂。除了接头松动，池渗漏也可能是管道阻塞、流速较高、池后的阻力大，使池的横截面承受过高的压力，严重地引起池破裂。也可能组装不当、垫圈不密封造成的渗漏等。没有多大把握zui好请厂家来维护。

e.测量和参比池配合不当

正常情况下UV检测器用空气做参比，电路设计也无流动相本地。用有紫外吸收的流动相通过UV检测器，或是用示差折光检测器都要在参比池内注满流动相。如参比池中流动相不与测量池中的流动相一样，本底输出信号不为零，进样时有可能出伪峰或倒峰。从湿参比池换成空气参比池时，要清洗干净后用干燥的氮气吹干，不能留下溶剂残留，否则就出“气泡样”的故障。

f.波长方面的问题主要是次级发射效应、选择波长不正确、波长的装置差、波长校正问题、低波长测量问题和单色器等问题。

次级发射效应在可见光范围内，使用氘灯做光源可提高灵敏度，但是带来了次级发射效应。单色器能发射比设定值高一级的发射光，正好是设定值的一半。如设定值在405nm，次级发射光正好是202.5nm，三级发射光低于干扰波长之下，由于大气中的氧所吸收。次级发射光正好在紫外光范围内，即是检测器在两种波长下检测，违反了比尔定律，结果是非线性的。我们可以用钨灯在紫外范围内无次级发射，但是灵敏度下降。用氘灯在高于360nm测定，应考虑有次级发射的可能。在荧光检测器中，也有这个问题存在。

选择波长不正确可影响实验结果的精确性，如有可能应选择在干扰组分的吸收光谱平稳的范围或组分的zui高吸收处。在所选波长太靠近流动相的吸收范围，梯度洗脱时会增加基线漂移。

波长的装置差，可变波长UV检测器所采用的机械转动光栅选择波长。旋转和光栅间的传动装置由齿轮和杆组成，用久了会机械磨损，所选的波长并不真正是您选择的波长。

波长校正问题我们可以用铬酸钾在275nm校正吸收波长等方法来处理。

低波长测量问题是我们在采用低波长时，样品和流动相的变化比在高波长下更灵敏。我们要选择应选择低波长吸收较小的溶剂，通常是乙腈好于甲醇。

单色器问题主要是光栅和镜子蒙上一层污染物，一般这种情况请厂家维护较好。

g.时间常数是相应时间的设定

起着过滤噪音的作用。有些有固定的时间常数，有些需要自己设定。如果太小可能增加短噪音，时间常数太大可能出宽峰、峰拖尾和短峰。可用自己的经验估算时间常数，即选zui窄的有关峰宽的10%作为时间常数。

h.泵噪音主要引起检测器折射率的变化与流动相的组成、压力以及温度由引起的噪音。一般情况要加阻尼器，特别是RI检测器对波动十分敏感。。

I.温度的影响

主要是环境温度变化常引起基线漂移，一般情况请使用柱温箱等设施或环境温度波动的控制。

j.混合问题

主要是流动相不完全混合可出现周期性的基线变化，在示差折光检测器非常严重，如果改用手动混合相对较好。特别是比例悬殊太大时zui明显。

k.线性问题

主要因为检测器或方法上的问题，非线性响应是可能的。如仔细稀释样品、选择波长，良好的方法可以延长线性范围。检查线性要在一定的浓度范围内，用不同浓度的标准品证实线性的相关性；用几乎澄清的溶剂做流动相可扩展线性范围，用强紫外吸收的流动相检测器线性范围几乎不到零，建议用无吸收的流动相或在流动相无吸收的波长下检测。

l.信号线故障

主要是记录器和数据系统连接检测器的信号线引起的。要注意正负是否接对或线路松动、接触不良。另外就是有良好的接地装置。

m.内部自检没有通过