病毒感染细胞实验
病毒感染细胞实验可以用于：（1）将目的基因整合到大多数真核细胞。（2）将目的基因包装成病毒来感染细胞，从而得到表达满足实验需求。实验方法原理病毒包装的原理质粒DNA为能转录出慢病毒遗传物质（RNA），但不能翻译出慢病毒的外壳及蛋白成分的载体质粒，其同时连有目的基因和报告基因，psPAX2为能表达慢病毒外壳的质粒，其表达产物可通过粘附机制更易穿过细胞膜， pMD2.G为慢病毒的膜蛋白质粒，通过 lipofectamine2000进行三质粒共转到靶细胞基因组中，宿主基因组在表达时，随宿主基因转录出的目的基因RNA与psPAX2、pMD2.G基因翻译出的蛋白组装为慢病毒。在上述程序中提及的“第四天”收集病毒。在第五天再用该病毒感染靶细胞，病毒进入细胞后，其遗传物质RNA反转录出DNA，该基因再整合到靶细胞的基因组中，完成转染过程，因为质粒DNA只能转录出病毒RNA和表达目的基因却不能表达出病毒的外壳和膜蛋白成分，因此其不能像普通的病毒......阅读全文
病毒感染细胞实验
病毒感染细胞实验可以用于：（1）将目的基因整合到大多数真核细胞。（2）将目的基因包装成病毒来感染细胞，从而得到表达满足实验需求。实验方法原理病毒包装的原理质粒DNA为能转录出慢病毒遗传物质（RNA），但不能翻译出慢病毒的外壳及蛋白成分的载体质粒，其同时连有目的基因和报告基因，psPAX2为能表达慢病
病毒感染细胞实验
病毒感染细胞实验 实验方法原理 病毒包装的原理质粒DNA为能转录出慢病毒遗传物质（RNA），但不能翻译出慢病毒的外壳及蛋白成分的载体质粒，其同时连有目的基因和
病毒感染细胞实验（一）
实验方法原理 一、病毒的种类病毒有很多种，常见的有慢病毒和腺病毒1.1慢病毒1.1.1原理慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使
病毒感染细胞实验（二）
三、质粒DNA在大肠杆菌里转化连接上目的基因的质粒转化大肠杆菌是为了让目的基因在大肠杆菌里扩增，然后提取质粒，以下是质粒DNA在大肠杆菌里转化的三步骤。3.1大肠杆菌感受态细胞的制备1）从大肠杆菌平板上挑取一个单菌落于3mlLB培养基的试管中，37℃振荡培养过夜。2）取0.4ml菌液转接到40mlL
慢病毒感染目的细胞实验步骤
1. 感染预实验以 24 孔培养板为例，同时进行目的细胞和工具细胞的感染预实验。工具细胞可选择 293T（人胚肾上皮细胞）、H1299（人肺癌细胞）或其它细胞。实验材料：培养基、24 孔培养板，移液枪，枪头， EP 管，细胞计数板、冰盒、废液缸等。（根据目的细胞情况，可酌情使用 Polybrene）
有什么方法可以提高病毒感染细胞实验效率
1.提前一天细胞铺板提前一天将细胞种植在24孔板中，以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度)。2.感染⑴将2ul的EnvirusTM-LV用25μl无血清稀释液稀释，充分混匀，制成EnvirusTM-LV稀释液。4℃静置5分钟。注：感染悬浮细胞，建议增大En
病毒感染的实验室诊断
四、特异性抗体的检测特异性抗体的检测病毒感染后通常诱发针对病毒一种或多种抗原免疫应答，特异性抗体效价升高或lgM抗体出现有辅助临床诊断的价值。(一)补体结合试验(CF) CF分二个阶段：1.抗原与抗体(一个为已知，一个为待检)混合，加入定量补体，若抗原与抗体相对应，则补体被消耗；2.在上述混合物
Science揭开致命病毒感染细胞之谜
由来自荷兰癌症研究所、哈佛医学院、德国基尔大学和美国陆军传染病医学研究所(USAMRIID)的科学家们组成的一个国际研究小组，阐明了在西非流行的一种致命病毒：沙拉沙病毒（lassa virus）感染细胞的机制，他们发现拉沙病毒利用了出乎意料的两步过程来进入细胞。发表在《科学》（Science）杂
巨细胞病毒感染诊断方案
巨细胞病毒感染诊断方案 中华医学会儿科学分会感染消化学组 (1998年11月，湖北宜昌) 巨细胞病毒感染( cytomegalovirus infection )是由人巨细胞病毒( human cytomegalovirus，CMV )引起的人类感染性疾病。CMV感染
昆虫细胞--高MOI杆病毒感染
高MOI（ Multiplicity Of Infection，等于用于感染的病毒数目与细胞数目的比值）感染是生产蛋白的最好方法。这有两个原因。一是不用考虑DIP（Defective Interfering Particles，即只包装入部分基因组的病毒颗粒）的形成，因为关心的是细胞或者培养液中的蛋