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顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验

试剂、试剂盒ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物仪器、耗材磁铁链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液(见第 1 步)10X ATEN 缓冲液(见方案 1 的配方)聚乙烯乙二醇 (30%PEG,1.5mol/L 氯化钠)T5E5 缓冲液(见方案 1 的配方)2. 酶和酶缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A3. 核酸和寡核苷酸5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物4. 专用设备磁铁链霉抗生物素蛋白珠子(强烈推荐使用 Genoviskm 公司的产品)二、方法1. 用 5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物扩增目标片段。PCR 后,按方案 1 所......阅读全文

顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验

试剂、试剂盒ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物仪器、耗材磁铁链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液(见第 1

顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验

            试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液 聚乙烯乙二醇 T5E5 缓冲液 Dpn I 蛋白酶 K

顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验

试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物仪器、耗材 磁铁链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液(见第

标记的链霉卵白素-生物素法(LSAB)

标记的链霉卵白素-生物素法(LSAB法)是标记的卵白素技术,20世纪80年代开始采用。基本试剂:① 第一抗体;② 生物素化第二抗体;③ 辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素。实验方法:1. 将固定后的标本用PBS漂洗;2. 于室温下用1%H2O2或1%H2

生物素姊妹篇-链霉亲和素及其衍生物的应用(一)

       上一期我们给大家介绍了目前在生化实验中被广泛使用的生物素-链霉亲和素结合系统,以及其中的第一个成员——生物素及其衍生物以及他们的一些常规的应用,今天给大家带来了该系统中另外一个重要的成员——链霉亲和素及其衍生物,与生物素类似,链霉亲和素分子本

生物素姊妹篇-链霉亲和素及其衍生物的应用(二)

        HeLa细胞中α-微管蛋白的免疫荧光染色:将固定和透化的HeLa细胞中的α-tubulin与兔抗tubulin一抗一起孵育,然后与生物素化的山羊抗兔IgG(H&L)(Cat# 16794)进行孵育,然后加入iFluor™647

生物素-链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(一)

       生物素-链霉亲和素结合系统的广泛采用主要是由于两个因素。第一个是生物素和链霉亲和素分子本身相对较小,它可以与生物活性大分子(例如抗体)广泛结合,而不会对其功能(即抗体的结合位点)产生抗性。第二个是生物素和链霉亲和素彼此结合的特异性,以及后续键

生物素-链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(二)

       注意:        Ext. Coeff. = 在其最大吸收波长处的摩尔消光系数(单位= cm -1 M -1)。       FQY = 在水性缓冲液(

链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法

SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二

帽子转换 RACE 实验

这里介绍的方法,是用一个生物素化的引物来帮助纯化第一链产物。这些纯化技术是可以互换的。与之类似,使用这里所介绍的基于寡核苷酸-(dT) 的引物,在反转录的起始阶段使用的基因特异性引物(如上所述)也是可以互换的。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒寡核苷酸引物cD