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免疫细胞治疗DCCIK细胞的制备方法及SAFIRE功能性...(一)

免疫细胞治疗DC-CIK细胞的制备方法及SAFIRE功能性人CD3单抗摘要SAFIRE是“不含叠氮钠,极低内毒素 Sodium Azide Free Immensely Reduced Endotoxin”的简称。生产中不添加任何载体,内毒素水平低至0.01EU/ug以下,更加适用于体内及体外的功能学实验研究。BioGems SAFIRE功能性抗体介绍:BioGems世界顶级抗体研发制造公司/品牌SAFIRE功能性抗体是BioGems流式产品的一条重要的产品线,可用于激活、阻断和中和实验等,SAFIRE是“Sodium Azide Free Immensely Reduced Endotoxin”的简称,即“不含叠氮钠,极低内毒素”。生产过程中没有添加任何载体,内毒素水平低至0.01EU/ug以下,更加适用于体内及体外的功能学实验研究。其中BIoGems 05121-25-500 SAFIRE 功能性CD3单抗就是B......阅读全文

DC-CIK细胞制备方法(一)

 CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写,中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-γ、IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群, 其既

DC-CIK细胞制备方法(二)

1.外周血单个核细胞的采集  1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞80 - 100ml;   1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC);   1.3 无血清培养液洗涤

DC-CIK细胞制备方法(三)

 5.0 DC-CIK细胞的制备和质检  5.1 收集步骤4和步骤3中所获得的DC 细胞和CIK 细胞,按1:10(数目比)的比例共培养,无血清培养液中添加重组人IL-2 (300 U/ml);  5.2 每3天半量换液

DC-CIK的制备方法(一)

【背景】CIK 是「Cytokine-Induced Killer Cells」的缩写,中文全称为「细胞因子诱导的杀伤细胞」。 CIK 是单个核细胞在 CD3 单抗和多种细胞因子 (包括 IFN-γ, IL-2 等) 的作用下培养获得的一群以 CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群

CIK/DC-CIK及其在细胞治疗上的应用(一)

【背景知识】  CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写,中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-γ,IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群,其既具有

DC-CIK的制备方法(三)

2. (可选步骤)  肿瘤抗原的制备用于负载 DC 的肿瘤抗原可以是肿瘤特异性抗原肽 (Tumor-Specific  Antigens,  TSA)或肿瘤相关抗原 (Tumor-αssociated Antigens, TAA),也可以是肿瘤全细胞抗原。用 TSA

DC-CIK的制备方法(四)

4. DC 细胞的培养及鉴定4.1 步骤 3.2 中剩下的贴壁细胞 (主要是 CD14+的单核细胞),加入含重组人 GM-CSF500-1,000U/ml 和重组人 IL-4 500U/ml 的无血清培养液,37℃,5%CO2 培养箱中 培养,诱导单核细胞向 DC 细胞分化。4.2 每 3d 半量换

DC-CIK的制备方法(五)

【步骤简图】【推荐试剂】生产商产品名称产品编号产品规格使用浓度PeproTech重组人 GM-CSF (Animal Free)AF-300-0320ug/50ug/100ug/250ug/500ug1mg50-100ng/mlPeproTech重组人 IFN-g (Animal Free)AF-3

CIK/DC-CIK及其在细胞治疗上的应用(三)

【培养原理】 1.DC培养用细胞因子: 1.1 GM-CSF(粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子) GM-CSF是一种造血生长因子,在体外可刺激中性粒细胞和巨噬细胞的集落形成,并具有促进早期红巨核细胞、嗜酸性祖细胞增殖和发育的功能。 GM-CSF是最早被鉴定出来对于DC有作用的细胞因子之一。GM-CSF在

DC-CIK的制备方法(二)

2.CIK 培养用细胞因子和抗体:CD3 激发型单抗:T 细胞活化的第一信号来自于 T 细胞表面的受体,即 T 细胞抗原受体 (T cell antigen receptor,  TCR) 与 APC 提呈的抗原的特异性结合,也就是 T 细胞对抗原的特异性识别。 TCR 是由 2