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单亲二倍体的分子检测实验

实验材料样品 DNA试剂、试剂盒引物dNTP 混合物反应缓冲液Taq DNA 聚合酶丙烯酰胺甲叉丙烯酰胺TBE过硫酸铵仪器、耗材热循环仪PCR 管电泳装置实验步骤一、PCR 反应实验程序1.准备 PCR 反应混合物:根据 DNA 样本的数量来确定除了 DNA 外其他混合物的体积(额外增加一份来确保有足够的 PCR 反应混合物),将扩增每一个遗传标记并且在每一个 PCR 反应管内分 19.5uL 的反应混合物。2.在每个管子中加 0.5, 的 DNA 样本。3.如果不用带有加热盖的 PCR 仪,那么就需要在每个管子的顶部加入矿物油来防止液体蒸发。4.把管子放在 PCR 仪中,95℃加热 3 min 变性 DNA。5.95℃ 变性 40s、55℃ 引物退火 40s、72℃ 延伸 40s,循环 30-35 次。6.72℃ 终末延伸 7 min。7.把 PCR 产物和尿素上样缓冲液 1:1 混合.二、将 PCR 产物行测序胶(6% 胶,......阅读全文

DNA测序技术的现状和发展(八)

虽然这些最初的纳米孔实验并没有获得预期结果,但它们至少显示出纳米孔在单分子技术方面的应用优势,例如高度的敏感性,同时也带动了纳米孔核酸分析技术的研究热潮,并在理论及实验方面取得了一些成果。自从发现在电场力作用下,长达1000个碱基的单链DNA分子也能通过纳米孔之后,人们就更加坚信, 廉价的纳米孔

用流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas

用流式细胞仪检测细胞凋亡

  细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

险测突变的目的主要是为弄懂人类遗传性疾病的分子机制,以便有效的针对这些疾病进行预防、诊断和治疗,但更多的是用于分析不同生物体基因型与表型之间的关联。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒扩增缓冲液dNTP 混合溶液甲酰胺上样缓冲液蔗糖

流式细胞仪在细胞凋亡检测应用

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪 检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。下面是一幅凋亡过程图。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体

流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas

试管婴儿植入前遗传学诊断单细胞PCR的方法(2)

7.等位基因特异性扩增 在设计引物时,根据已知突变位点的特征,在引物3’端或中间设计一错配碱基,使之仅能与突变型或野生型基因互补,而只扩增相对应的突变型或野生型基因。主要用于点突变导致的遗传病的检测。其优点是只需一步PCR,而无需电泳和标记,摆脱了分子生物学方法中必经电泳的现象。在相互竞争的突变

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段...

实验材料核苷酸                                         &n

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合转基因片段实验

实验材料核苷酸试剂、试剂盒冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤原位杂交的基本操作方法(图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交:标底是玻片上的染色体和细胞核,探针是带标记的待测 DNA 序列 [ 本书中即是转基因和对照,图 14.3(a)

AFLP标记技术

实验概要AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来(附图)。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的

酵母三杂交系统检测和分析RNA-蛋白相互作用实验

酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)可用于分析蛋白质与 RNA 间的相互作用。在酵母三杂交系统中,RNA 蛋白质相互作用导致报道基因的转录,可以通过细胞生长、克隆颜色或特异的酶活性检测蛋白质与 RNA 的相互作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方

分子标记——AFLP原理和操作步骤

一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺

分子标记——AFLP原理和操作步骤

一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺

2019年,中国“大农业”里那些高科技

   今年,我国“大农业”科研领域又诞生了诸多令人惊奇的发现,每一条都与我们息息相关。它们涵盖了观赏农业、林业、作物、医学等各个领域,包括睡莲、玉米、硅藻等进展。为了展现这些成就,本报特此就我国农业科学家今年发表的大部分重要论文进行梳理,以飨读者。野生玉米大刍草、SK、现代玉米自交系ZHENG58的

基因捕获技术: 创建人类单倍体细胞库

  日前,使用名为“基因捕获”(gene trap)的技术,奥地利的研究人员建立了一个人类单倍体细胞库,这个细胞库汇集了3000 多种细胞系,每个细胞系都具有一种不同的突变基因。相关的研究论文发表在8月25日的Nature Methods杂志上。渥太华大学教授William Stanford

Cell Res重点论文:单细胞表观多组学测序技术最新突破

  2017年6月16日,北京大学生命科学学院生物动态光学成像中心汤富酬课题组在《Cell Research》杂志在线发表了题为“Single-cell multi-omics sequencing of mouse early embryos and embryonic stem cells”的研

Cell Res重点论文:单细胞表观多组学测序技术最新突破

  2017年6月16日,北京大学生命科学学院生物动态光学成像中心汤富酬课题组在《Cell Research》杂志在线发表了题为“Single-cell multi-omics sequencing of mouse early embryos and embryonic stem cells”的研

Nature:借助第三代测序韩国发表最连续人类基因组

  国立首尔大学医学院的研究人员和美国被誉为“测序黑马”的公司——10x Genomics联合运用去年新发售的GemCodeTM测序平台以及第三代测序PacBio单分子实时测序平台在本期的Nature上发表了一项新的研究,对一名韩国人的基因组(AK1)进行从头组装和单倍体型定相信息分析。这是迄今为止

测序先锋Craig Venter完整测定自身基因组

基因遗传密码比之前预想的复杂的多 科学网 备受争议的基因组研究先锋Craig Venter又有新动作!他的研究小组详细地测定了他自己的基因组序列,使得人们能够观测单个基因组中基因的变化。初步分析报告发表在最新一期的《PLoS生物学》上。 此次研究的领导者、美国J. Craig

染色体制备仪

  培养细胞的染色体核型分析技术在产前诊断,肿瘤预后,不孕不育查因,科学研究等方面应用广泛,也是细胞遗传的一项基本检测技术。  通过体外培养获得大量的分裂细胞之后,加入秋水仙素,使分裂中的细胞停止于分裂中期,再经过染色体制备,将染色体的条带染色显示出来,显微镜下计数细胞核型、染色体数目及条带,分析后

年终盘点:2016年国内不容错过的重磅生物研究

  时间总是过得很快,2016年马上就要过去了,迎接我们的将是崭新的2017年,2016年,我国有很多优秀科研机构的科学家们都做出了意义重大、影响深远的研究成果,发表在国际顶级期刊上。本文中小编盘点了2016年我国科学家发表的一些重磅级研究,以饕读者。   --结构生物学 --  1.清华大学 施一

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

            试剂、试剂盒 扩增缓冲液 dNTP 混合溶液 甲酰胺上样缓冲液 蔗糖凝胶缓冲液 TBE 电泳缓冲液

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

试剂、试剂盒 扩增缓冲液dNTP 混合溶液甲酰胺上样缓冲液蔗糖凝胶缓冲液TBE 电泳缓冲液限制性内切酶热稳定 DNA 聚合酶人类基因组 DNA正向引物和反向引物[a-32P]dCTP丙烯酰胺双丙烯酰胺过硫酸胺甘油TEMED仪器、耗材 带屏障装置的自动移液器吸头 沸水浴电泳板、破璃和 0.4 mm 隔

高通量芯片技术在细胞遗传学检测领域的划时代飞跃

  细胞遗传学是从细胞的角度,主要是从染色体的结构和行为来研究遗传现象,并找出遗传机制和遗传规律。目前和基础理论与临床医学紧密结合对于遗传咨询和产前诊断具有重要意义。而迅速发展的芯片技术在检测通量、分辨率、灵敏度等方面都远远超过了传统的细胞遗传学方法。因此可以说高通量芯片技术是细胞遗传学检测领域的一

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法             实验方法原理

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法             实验方法原理

华大基因再出手 单细胞转录组学测序技术的系统分析

  单细胞转录组测序(Single-cell RNA-seq)是在单细胞水平对转录组(mRNA)进行测序的一项新技术,可发现细胞群体中真正起作用的细胞,特别适合对高度异质性的干细胞、肿瘤细胞及胚胎发育早期的细胞群体进行研究,认识细胞分子机制和基因调控网络。单细胞RNA-seq技术需要在测序前制备文库

六种染色后光镜观察法检测肝癌细胞凋亡

作者:杨连君,司晓辉,王文亮,王文勇,赵一岭,方正清[摘  要] 目的:探讨简便易行的在光镜下通过形态学观察检测细胞凋亡的方法,并对其进行比较。方法:首先用6%的乙醇作用6 h诱导人肝细胞癌细胞系HCC9204细胞凋亡,然后进行未固定细胞的台盼蓝染色、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染色,

多部门共同制定印发“十三五”国家基础研究专项规划

关于印发“十三五”国家基础研究专项规划的通知国科发基〔2017〕162号各省、自治区、直辖市及计划单列市、新疆生产建设兵团科技、教育厅(委、局),国务院各有关部门科技、教育主管司(局),中科院各分院:   为贯彻落实《国家创新驱动发展战略纲要》《“十三五”国家科技创新规划》,加快推动基础研究发展,科

安捷伦发布CGH+SNP癌症芯片以及软件用于癌症研究

  安捷伦发布 CGH+SNP 癌症芯片和 Cytogenomics 软件用于癌症研究   基于癌症 Cytogenomics 芯片协会的设计   2011 年10月11日,蒙特利尔——安捷伦科技公司(纽约证交所:A)今日发布 SurePrint G3 CGH+SNP 癌症目录芯片,该款芯片