Antpedia LOGO WIKI资讯

基因组文库的扩增实验

实验方法原理 通过平板培养可对重组噬菌体文库进行扩增,平板培养的原种可直接来源于本方案所述的包装混合物。但只要可能,该扩增过程可被省略,而感兴趣的 DNA 序列可从原始文库直接筛选。扩增将不可避免地降低文库的复杂性,部分原因在于在连续几轮的噬菌体生长中,对生长缓慢的重组噬菌体来说是十分不利的。实验材料 λ 噬菌体文库大肠杆菌铺平扳细菌试剂、试剂盒 氯仿SM仪器、耗材 LB 或 NZCYM 琼脂平板Sorvall SS-34 或相当型号加热设备或水浴实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液氯仿SM2. 培养基LB 或 NZCYM 琼脂平板(150 mm)LB 或 NZCYM 顶层琼脂糖3. 离心机和转子Sorvall SS-34 或相当型号4. 专用设备预置于 47℃ 的加热设备或水浴(用于顶层琼脂糖)5. 载体和菌株λ 噬菌体文库大肠杆菌铺平扳细菌二、方法1. 为了扩增 λ 噬菌体文库,将含 10000~20000 个重组噬......阅读全文

基因组文库的扩增实验

通过平板培养可对重组噬菌体文库进行扩增,平板培养的原种可直接来源于本方案所述的包装混合物。但只要可能,该扩增过程可被省略,而感兴趣的 DNA 序列可从原始文库直接筛选。扩增将不可避免地降低文库的复杂性,部分原因在于在连续几轮的噬菌体生长中,对生长缓慢的重组噬菌体来说是十分不利的。本实验来源「分子克隆

基因组文库的扩增实验

            实验方法原理 通过平板培养可对重组噬菌体文库进行扩增,平板培养的原种可直接来源于本方案所述的包装混合物。但只要可能,该扩增过程可被省略,而感兴趣的 DNA 序列可从原始文库直接筛选。扩增将不可避免地降低文库的复杂性,部分原因在于在连续

基因组文库的扩增实验

实验方法原理 通过平板培养可对重组噬菌体文库进行扩增,平板培养的原种可直接来源于本方案所述的包装混合物。但只要可能,该扩增过程可被省略,而感兴趣的 DNA 序列可从原始文库直接筛选。扩增将不可避免地降低文库的复杂性,部分原因在于在连续几轮的噬菌体生长中,对生长缓慢的重组噬菌体来说是十分不利的

噬菌体文库的扩增实验

基本方案             实验材料 噬菌体 试剂、试剂盒

噬菌体文库的扩增实验

文库一旦包装就应该尽快进行扩增,它可以大大增加文库的拷贝数,但在扩增时由于克隆的生长速率不同,文库的组成可能会出现某种潜在的改变。这种文库克隆组成比率的变化可以通过把文库克隆预吸附到细菌上并使用一种高密度铺平板和短期培养的方法而尽量减少。文库一旦包装就应该尽快进行扩增,它可以大大增加文库的拷贝数,但

噬菌体文库的扩增实验

实验材料 噬菌体试剂、试剂盒 MgSO4麦芽糖琼脂糖氯仿DMSOSM仪器、耗材 离心机分光光度计水浴锅实验步骤 1.  制备铺平板菌(1)2.5 ml 新鲜过夜培养的宿主菌液接种于250 ml 含0.2%麦芽糖和10 mmol/l MgSO4的LB培养液中。(2)在37℃恒温摇床剧烈摇荡2~4 h,

粘粒和质粒文库的扩增实验

基本方案             实验材料 质粒

粘粒和质粒文库的扩增实验

实验材料 质粒 试剂、试剂盒 LB甘油 仪器、耗材 硝酸纤维素膜培养箱 实验步骤 1.  在含抗生素的平板上加一层硝酸纤维素膜,将抗药性细菌铺在硝酸纤维素膜上,培养细菌至菌落边缘正好相接。 2.  往长满菌落的平板中加入LB培养液,10 cm 平板约加2

粘粒和质粒文库的扩增实验_基本方案

文库一旦包装就应该尽快进行扩增,它可以大大增加文库的拷贝数,但在扩增时由于克隆的生长速率不同,文库的组成可能会出现某种潜在的改变。这种文库克隆组成比率的变化可以通过把文库克隆预吸附到细菌上并使用一种高密度铺平板和短期培养的方法而尽量减少。实验材料质粒试剂、试剂盒LB甘油仪器、耗材硝酸纤维素膜培养箱实

基因组DNA文库构建必备实验技巧

基因组DNA文库用途十分广泛,如用于人类及动植物基因组学研究,基因表达调控研究,分析、分离特定的基因片段等。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为四大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。一、分离基因组DNA(gDNA) 毫无