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细胞的纯化方法介绍(自然纯化和人工纯化)(二)

(1)上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化: 两者在胰蛋白酶的作用下,由于成纤维细胞先脱壁,二上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代细胞初次传代和早期传代中两种差别尤为明显,故可采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开,方法步骤如下。 采用常规消化传代方式将0.25%胰蛋白酶注入培养瓶内两次,每次加1ml(25ml培养瓶),来回轻摇1-2次,使胰蛋白酶流过所有细胞表面,然后倒掉。 盖好瓶塞,将培养瓶放在倒置显微镜下观察,发现成纤维细胞变园,部分脱落,立即加入2ml有血清的培养基终止消化。 用弯头吸管轻轻吹打成纤维细胞生长区域(可事先在镜下用记号笔在培养瓶上划出记号)。吹打时不要用力,也不要吹打上皮细胞生长区域。吹打结束后,再用少量培养基漂洗一遍,然后加入适量培养基于瓶内继续培养,也可重复上述操作再进行一次。 隔几日后或下次传代时,再进行上述操作,进过几次处理,就可将成纤维细胞去除或者将两者分开。 ......阅读全文

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板

了解传承与发展 看原子光谱新进展

  分析测试百科网讯 继20日开幕式及大会报告后(详情请点击:了解最新进展 共享学术盛宴 看第五届全国原子光谱会议),今日,分析测试百科网继续为您带来第五届全国原子光谱及相关技术学术会议分会场精彩报告。部分报告嘉宾合影分会场现场山东大学 闫兵教授  首先由山东大学闫兵教授带来报告,题目是“Explo

几种常见的微生物基础实验

  本文介绍几种常见的微生物基础试验的目的、原理、内容等,以便刚刚接触微生物的同志们对试验有个基本的认识. 实验一 常用培养基的制备、灭菌与消毒一、实验目的    1、掌握配制培养基的一般方法和步骤;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法; 

空间蛋白质组学:一种强大的细胞生物学发现工具

真核细胞高度区室化,生物过程被分隔在不同的区室进行。蛋白质功能与亚细胞定位密切相关,不同的区室提供不同的化学环境(例如pH和氧化还原条件)、不同的潜在作用配体或底物。因此,对蛋白质亚细胞定位的严格控制是细胞生理学的重要调控内容。大多数细胞生物学过程涉及蛋白质亚细胞定位的变化,例如转录因子在细胞核-胞

ELISA法检测立克次体

ELISA法检测立克次体 立克次体(Rickettsia)是一类专性活细胞内寄生的原核细胞微生物,具有细胞壁,含有RNA和DNA,以二分裂繁殖。需在细胞内繁殖,不能在无细胞的人工培养基中生长。它是属于人兽共患的自然疫源性疾病。临床上常见的有普氏立克次体、莫氏立克次体、恙虫病立克次体和Q热立克次体

盘点2014年:中国生命科学领域5项研究重大事件

  “干细胞多能性与体细胞重编程”项目启动  9月21日,由中科院广州生物医药与健康研究院裴端卿研究员承担的国家自然科学基金“干细胞多能性与体细胞重编程”创新研究群体项目正式启动。据介绍,今年生命科学领域一共启动5个团队项目,其中4个团队在北京,另外一个团队在广州。  “干细胞多能性与体细

强!中国学者用最短时间突破100篇CNS生命科学领域成果

  截止2020月7月27日,中国学者在Cell,Nature 及Science 发表了共计102项生命科学的研究成果,其中新冠肺炎领域占了近一半(共43篇)。iNature系统总结了这些研究成果:   按杂志来划分:Cell 发表了30篇,Nature 发表了45篇,

植物激素重大研究计划八年:从跟踪到超越

①李家洋(左二)院士指导实验。 ②国内首个专业性植物激素分析平台。 ③研究人员在实验室工作。编者按:我国是农业大国,植物激素的基础生物学研究将为实现我国粮食安全和农业提质、增产、高效、抗逆等奠定基础。2007年,国家自然科学基金委员会启动了重大研究计划项目“植物激素

植物激素重大研究计划八年:从跟踪到超越

  植物激素调控着植物生长的方方面面。目前,全球植物生长调节剂市场达几十亿美元,2015年我国使用植物生长调节剂的农田面积超过2亿亩。  然而,作为粮食大国,在十年前,我国却并不是植物激素研究大国。2007年,国家自然科学基金委员会(简称基金委)启动了重大研究计划项目“植物激素作用的分子机理”,目标

中科院生物物理研究所:活性“蛋白质” 捕光“梦工厂”

  蛋白质,英文名称“protein”,是生物体中广泛存在的一类生物大分子,也是生命活动的主要承担者。  时值春暖花开,在中国科学院生物物理研究所寻访,本报记者在这里看到的“蛋白质”,不仅充满科学的奥妙和神奇,而且彰显出其应有的活泼、活性与活力,恍若走进一所“梦工厂”。那么

国家系统布局未来20年重大科技基础设施建设

  国家发展和改革委员会同科技部等8部门编制的《国家重大科技基础设施建设中长期规划(2012―2030年)》(简称《规划》),目前已经国务院批准印发。其中,包括加速器驱动嬗变研究装置、上海光源线站工程、中国南极天文台等16项重大科技基础设施建设,成为我国“十二五”时期的建设重点。据悉,该《规划》是我

电泳分析常用方法

(一)醋酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄 膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小,几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象,又因为膜的亲水性比较小,它所容纳的缓冲液也少,电泳时电流的大部分由样 品传导,所以分离速度快,电泳时间短,样品

电泳技术

电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。    电泳技术的

海洋所科研人员绘制完成牡蛎全基因组序列图谱

  近日,牡蛎基因组计划(Oyster Genome Project,OGP)项目组宣布,历时两年的牡蛎基因组序列图谱终于绘制完成。这是世界上第一张养殖贝类的全基因组序列图谱,标志着基于短序列的高杂合度基因组拼接和组装技术获得了重大突破。据悉,目前的基因组图谱已达到国际领先的基因组图